一种微小RNA启动子活性检测的方法

    公开(公告)号:CN103484544A

    公开(公告)日:2014-01-01

    申请号:CN201310421926.3

    申请日:2013-09-17

    CPC classification number: C12Q1/686 C12Q2525/143 C12Q2525/207 C12Q2531/113

    Abstract: 本发明公开了一种微小RNA启动子活性检测的方法,该微小RNA启动子活性检测的方法包括以下步骤:利用分子生物学技术,在无启动子、增强子的真核载体基础上,构建含miRNAs启动子、miRNA和3’段侧翼序列在内的重组真核载体;将重组真核载体体外转染真核细胞,利用荧光定量PCR仪检测miRNAs成熟体的表达;通过体外实验观察启动子表达miRNAs后的生物学效应。本发明提供的微小RNA启动子活性检测的方法可以在不依赖昂贵仪器的条件下,广泛用于分子生物学和细胞生物学实验中检测miRNAs启动子活性,方便地观察miRNAs表达后的生物学效应,检测方便并准确反映启动子活性。

    使用非随机引物的CDNA合成

    公开(公告)号:CN102124126A

    公开(公告)日:2011-07-13

    申请号:CN200880122833.8

    申请日:2008-10-24

    Abstract: 本发明提供了选择性扩增RNA模板分子群中的靶核酸分子群的方法(例如,除了最高表达的mRNA种类以外,细胞类型中表达的所有mRNA分子)。本发明还提供了包括SEQ ID NO:1-749中所示的核酸序列的第一寡核苷酸群,和包括SEQID NO:750-1498中所示的核酸序列的第二寡核苷酸群。例如,第一寡核苷酸群可用于引发与从哺乳动物细胞分离的mRNA分子互补的第一链cDNA分子的合成,但不引发与核糖体RNA分子互补的cDNA分子的合成。第二寡核苷酸群可用于例如引发,与从哺乳动物细胞分离的mRNA分子互补的引物延伸产物(第一链cDNA)的第二链合成,但不引发从核糖体RNA分子合成的引物延伸产物的第二链合成。

    用于RNA序列扩增的方法
    6.
    发明公开

    公开(公告)号:CN1898397A

    公开(公告)日:2007-01-17

    申请号:CN200480038577.6

    申请日:2004-10-27

    CPC classification number: C12Q1/6865 C12Q2525/179 C12Q2525/143

    Abstract: 本发明涉及用于靶RNA序列扩增的方法,其中第一引物包含能够结合所述靶RNA序列的第一区段的7至14个核苷酸的杂交序列、转录增强序列和能够结合所述靶RNA序列的第二区段的锚定物,和/或其中第二引物包含7至14个核苷酸的杂交序列、扩增增强序列和能够结合第一单链cDNA的第二区段的锚定物。本发明还涉及用于靶RNA序列扩增的引物和包含所述引物中的一种或多种的试剂盒。

    表达基因分析方法以及用于表达基因分析的探针试剂盒

    公开(公告)号:CN1537954A

    公开(公告)日:2004-10-20

    申请号:CN200410039338.4

    申请日:2004-01-19

    CPC classification number: C12Q1/6818 C12Q1/6865 C12Q2525/143 C12Q2521/307

    Abstract: 本发明提供一种用于检测核酸的新试剂盒,其无关于靶核酸序列而可以被普遍使用,以及一种使用该试剂盒用于检测核酸的简单方法。该方法包括:使用含有与靶基因或核酸特异性杂交的碱基序列的引物,和含有与第一碱基序列相同或互补碱基序列的TaqMan探针或分子信标(MolecularBeacon),对待分析基因进行实时检测,其中待分析基因的制备是通过将第一碱基序列和含有T7启动子序列(其对靶基因或核酸的碱基序列是非特异性的)的第二碱基序列导入靶基因或核酸,使得第二碱基序列结合位置比第一碱基序列更靠近5’端。本发明还提供一种用于检测核酸的通用探针。本发明中两种通用探针的使用实现了在单一反应容器中同时进行几种靶基因的实时检测。

    基于转录的核酸扩增方法和组合物

    公开(公告)号:CN1498274A

    公开(公告)日:2004-05-19

    申请号:CN01813297.9

    申请日:2001-06-26

    Inventor: N·库尔恩

    Abstract: 公开了靶多核苷酸等温指数级扩增的方法。该方法应用两个转录组件,第一组件提供产生RNA转录本的线性扩增,且第二组件提供进一步的(通常为循环的)产生更多RNA转录本的扩增。一方面,第一组件的扩增基于复合引物。第二方面,第一组件的扩增基于靶转换,以产生包含启动子序列的引物延伸产物。在所有的方面中,第一转录组件的RNA转录本通过产生包含可启动转录的双链启动子区域的中间产物而进行进一步的扩增。本发明还提供了用于实践所述方法的组合物和试剂盒,并提供了使用扩增结果的方法。

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