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公开(公告)号:CN117368284A
公开(公告)日:2024-01-09
申请号:CN202311132016.3
申请日:2023-09-04
Applicant: 重庆医科大学附属第二医院
IPC: G01N27/327 , C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/113 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于电化学传感器技术领域,具体公开了一种检测外泌体miRNA的电化学传感器及其制备方法与应用。本发明将巯基和亚甲蓝标记的单链信号报告探针固定至金电极表面;将外泌体miRNA、模板链T1、模板链T2、KF聚合酶、Nt.BbvCI限制性内切酶、dNTP混合,孵育得MC‑SDA扩增产物;将MC‑SDA扩增产物与Cas12a/crRNA复合物混合,形成Cas12a激活体;将Cas12a激活体滴加到固定有信号报告探针的金电极表面,Cas12a激活体反式切割信号报告探针,检测电化学DPV响应信号即可获知相应外泌体miRNA含量。本发明成功构建了一种MC‑SDA介导CRISPER/Cas12a的检测外泌体miRNA电化学传感器,具有成本低、操作简单、反应速度快、灵敏度高、特异性好的优势。
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公开(公告)号:CN116688900A
公开(公告)日:2023-09-05
申请号:CN202310608668.3
申请日:2023-05-28
Applicant: 重庆医科大学附属第二医院
Abstract: 本发明提供了一种基于DNA电路编码组装的胶体分子系统及其制备方法。本发明通过具有交替polyA域和功能域的ssDNA,及动态DNA电路——催化发夹自组装(CHA)对AuNPs进行编码组装,开发了具有高精度和时间依赖性的DNA电路编码CMs,可用于调节AuNPs的过氧化物酶样活性。本发明可通过改变polyA域和功能域的数量和长度,获得二聚、线性或网状结构的DNA电路编码CMs。本发明通过阻断AuNPs表面催化活性位点或简单地改变外部DNA刺激物的浓度,可以精确地调节DNA电路编码CMs系统的过氧化物酶样催化活性。本发明为调控纳米材料催化功能提供了一种新的思路。
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公开(公告)号:CN108660138B
公开(公告)日:2021-06-29
申请号:CN201810453552.6
申请日:2018-05-14
Applicant: 重庆医科大学附属第二医院
IPC: C12N15/115 , G01N33/68 , G01N33/53
Abstract: 本发明提供一种免疫传感器及其制备与应用,其中包括一对基于邻位连接的核酸适配体亲和探针Apt‑P1和Apt‑P2,所述Apt‑P1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述Apt‑P2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的邻位连接探针通过内部碱基转移可以增加反应速度,降低背景信号,在该设计下信噪比最高。核酸适配体替代抗体作为亲和探针,节省了常规抗体所需成本,简化了常规抗体制备及储存所需的苛刻条件。本发明通过改良的邻位连接诱导的熵驱动信号放大策略,实现了对PDGF‑BB的高灵敏及高特异性检测。该检测方法简便,无需昂贵仪器,只需常规荧光分光光度计便可检测,降低检测成本。
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公开(公告)号:CN104404140A
公开(公告)日:2015-03-11
申请号:CN201410629839.1
申请日:2014-11-06
Applicant: 重庆医科大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6844 , C12Q2525/207 , C12Q2525/301 , C12Q2525/307 , C12Q2531/119 , C12Q2531/125
Abstract: 本发明提供了一种基于功能核酸的microRNA(miRNA)比色传感器,该传感器通过引入分子信标以实现对靶miRNA的高特异性的识别,通过链替代聚合反应(SDA)、nicking trigger引发的滚环扩增,及DNAzyme信号放大等生物放大策略实现对痕量miRNA高灵敏的检测。应用本发明的传感器对miRNA进行检测,miRNA的浓度在10aM-1nM范围内呈线性关系,线性方程式为Y=0.5929+0.02916LogX,相关系数为0.994,最低检测限为5aM。与现有技术比较,所述传感器灵敏度高、特异性好、成本低、操作简便,检测周期短,适用于实际样品的测定。
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公开(公告)号:CN115747360A
公开(公告)日:2023-03-07
申请号:CN202211592090.9
申请日:2022-12-12
Applicant: 重庆医科大学附属大学城医院
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/445
Abstract: 本发明提供一种双交叉引物扩增联合CRISPR‑Cas 12a检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的系统。与传统的培养鉴定法不同,本发明能够在3小时内快速识别金黄色葡萄球菌和MRSA,具有很高的临床转化潜力。利用菌悬液对本方案进行验证,最低检测限能达到5 CFU/mL;利用临床样本对本发明方法进行临床验证,相较于传统方法,具有更高的灵敏度,能够成功应用于临床样本的检测。
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公开(公告)号:CN104458659B
公开(公告)日:2017-02-22
申请号:CN201410762442.X
申请日:2014-12-11
Applicant: 重庆医科大学
IPC: G01N21/552
Abstract: 本发明提供了一种检测miRNA-21的表面等离子共振传感器,包括工作芯片,所述工作芯片为在裸金芯片上固定针对miRNA-21的捕获探针所得。应用本发明的传感器对miRNA-21进行检测,校准曲线做四参数拟合,回归方程为Y=(A1-A2)/(1+(X/X0)^P)+A2,A1=-69.95±7.34,A2=2890.50±18.50,X0=5.27±0.16,P=0.47±0.01,检测范围为0.01-1000 nM,相关系数为0.9978,最低检测限为0.009 nM。与现有技术比较,所述传感器无酶、免标记,能实时监测,并且灵敏度高、特异性好、成本低、操作简便,检测周期短,适用于实际样品的测定等,有望成为具有实际应用价值的传感器。
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公开(公告)号:CN104404140B
公开(公告)日:2016-08-24
申请号:CN201410629839.1
申请日:2014-11-06
Applicant: 重庆医科大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明提供了一种基于功能核酸的microRNA(miRNA)比色传感器,该传感器通过引入分子信标以实现对靶miRNA的高特异性的识别,通过链替代聚合反应(SDA)、nicking trigger引发的滚环扩增,及DNAzyme信号放大等生物放大策略实现对痕量miRNA高灵敏的检测。应用本发明的传感器对miRNA进行检测,miRNA的浓度在10aM?1nM范围内呈线性关系,线性方程式为Y=0.5929+0.02916 LogX,相关系数为0.994,最低检测限为5aM。与现有技术比较,所述传感器灵敏度高、特异性好、成本低、操作简便,检测周期短,适用于实际样品的测定。
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公开(公告)号:CN108660138A
公开(公告)日:2018-10-16
申请号:CN201810453552.6
申请日:2018-05-14
Applicant: 重庆医科大学附属第二医院
IPC: C12N15/115 , G01N33/68 , G01N33/53
Abstract: 本发明提供一种免疫传感器及其制备与应用,其中包括一对基于邻位连接的核酸适配体亲和探针Apt-P1和Apt-P2,所述Apt-P1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述Apt-P2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的邻位连接探针通过内部碱基转移可以增加反应速度,降低背景信号,在该设计下信噪比最高。核酸适配体替代抗体作为亲和探针,节省了常规抗体所需成本,简化了常规抗体制备及储存所需的苛刻条件。本发明通过改良的邻位连接诱导的熵驱动信号放大策略,实现了对PDGF-BB的高灵敏及高特异性检测。该检测方法简便,无需昂贵仪器,只需常规荧光分光光度计便可检测,降低检测成本。
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公开(公告)号:CN104458659A
公开(公告)日:2015-03-25
申请号:CN201410762442.X
申请日:2014-12-11
Applicant: 重庆医科大学
IPC: G01N21/552
Abstract: 本发明提供了一种检测miRNA-21的表面等离子共振传感器,包括工作芯片,所述工作芯片为在裸金芯片上固定针对miRNA-21的捕获探针所得。应用本发明的传感器对miRNA-21进行检测,校准曲线做四参数拟合,回归方程为Y = (A1 - A2)/(1 + (X/X0)^P) + A2,A1 =-69.95 ± 7.34,A2 = 2890.50 ± 18.50,X0 = 5.27 ± 0.16,P = 0.47 ± 0.01,检测范围为0.01-1000 nM,相关系数为0.9978,最低检测限为0.009 nM。与现有技术比较,所述传感器无酶、免标记,能实时监测,并且灵敏度高、特异性好、成本低、操作简便,检测周期短,适用于实际样品的测定等,有望成为具有实际应用价值的传感器。
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公开(公告)号:CN220709039U
公开(公告)日:2024-04-02
申请号:CN202322052508.3
申请日:2023-07-28
Applicant: 重庆医科大学
Abstract: 本实用新型公开了一种用于肺癌早筛的EVs自动检测仪,包括外壳,所述外壳内设置有反应池、样本池和试剂池,所述样本池通过样本管连接所述反应池,所述样本管上设置单向阀,所述试剂池通过连通管连接所述反应池,所述连通管上设置泵阀组件,所述反应池通过管路连接真空压力泵,所述反应池的一侧设置有检测光源,所述反应池的上方设置颜色传感器,所述颜色传感器的信号输出端连接控制器的信号输入端,所述控制器的信号输出端连接显示器,所述显示器设置于所述外壳的外侧。本实用新型基本上可以自动化地实现样本的检测,具有检测精准、高通量和低消耗的优势。
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