公开(公告)号：CN104862383B

公开(公告)日：2019-05-28

申请号：CN201510087407.7

申请日：2009-03-27

Applicant: 加利福尼亚太平洋生物科学股份有限公司

Inventor： K·特拉弗斯 ,  G·奥托 ,  S·特纳 ,  C·海纳 ,  C·马

IPC: C12Q1/6869 ,  C12M1/34

CPC classification number: G16B30/00 ,  C12Q1/6806 ,  C12Q1/6855 ,  C12Q1/6869 ,  C12Q1/689 ,  C12Q2525/307 ,  C12Q2525/301 ,  C12Q2525/155 ,  C12Q2531/125 ,  C12Q2535/122

Abstract: 用于核酸测序的组合物和方法包含模板构建物，部分或完全连续构建物中包含双链部分，用于通过正义链和反义链中的一条链或两条链的测序来确定丰余序列以及多次重复测定完整构建物的序列。可选的是，其他的序列组分也可以包含在这种模板构建物内。本发明还提供了这些构建物以及这些应用所需的测序组合物的使用和制备方法。

公开(公告)号：CN109142704A

公开(公告)日：2019-01-04

申请号：CN201810737964.2

申请日：2018-07-06

Applicant: 军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所

Inventor： 王江 ,  高志贤 ,  宁保安 ,  白家磊 ,  李双 ,  彭媛 ,  张曼

IPC: G01N33/53 ,  G01N33/543 ,  C12Q1/682

CPC classification number: G01N33/53 ,  C12Q1/682 ,  G01N33/54346 ,  C12Q2531/125

Abstract: 本发明属于食品安全检测及免疫竞争技术领域，涉及一种基于生物条形码与滚环扩增技术检测T‑2毒素的试剂盒及方法。该试剂盒包括以下组分：(1)磁珠；(2)抗T‑2单克隆抗体；(3)抗T‑2抗原；(4)金纳米粒子；(5)捕获DNA，能够与金纳米粒子形成共价连接；(6)条形码DNA；(7)环状DNA；(8)引物DNA，与环状DNA两端互补配对；其中，所述捕获DNA中的至少一部分与条形码DNA中的至少一部分互补配对；所述条形码DNA与环状DNA中的至少一部分相同。利用该试剂盒和方法能够高灵敏的检测T‑2毒素。

公开(公告)号：CN109136331A

公开(公告)日：2019-01-04

申请号：CN201810963038.7

申请日：2018-08-22

Applicant: 中山大学

Inventor： 戴宗 ,  徐梦菲 ,  陈俊 ,  王洋 ,  邹小勇

IPC: C12Q1/6811 ,  C12Q1/6851

CPC classification number: C12Q1/6811 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q2525/207 ,  C12Q2531/125 ,  C12Q2563/107

Abstract: 本发明公开了一种高灵敏度高特异性错配核酸序列的设计方法，通过计算错配序列和目标序列和同源干扰序列的ΔMFE值，确定候选错配核酸序列。本发明的方法，避免了错配核酸序列设计依赖于经验，大大减少了错配核酸序列，特别是错配引物的设计工作量，可以快速从大量错配核酸序列中获得少量的候选核酸序列，有利于从少量候选核酸序列中确定最佳的核酸序列。基于本方法设计的错配引物，在目标序列浓度低时，依然可以与目标序列保持较高的亲和力，同时与干扰同源序列的亲和力较差，有效提高了目标序列的扩增灵敏度，可以更好地用于高度同源核酸序列，特别是miRNA的扩增。

公开(公告)号：CN108949910A

公开(公告)日：2018-12-07

申请号：CN201810588394.5

申请日：2018-06-08

Applicant: 武汉博杰生物医学科技有限公司

Inventor： 姚杰 ,  王恩惠 ,  代佳丽

IPC: C12Q1/6825

CPC classification number: C12Q1/6825 ,  C12Q2525/207 ,  C12Q2565/607 ,  C12Q2531/125 ,  C12Q2563/107

Abstract: 本发明公开了一种高通量miRNAs表达谱的检测方法及生物传感器。所述高通量miRNAs表达谱的检测方法，包括以下步骤：(1)探针制备；(2)生物传感器制备；(3)miRNA表达谱检测。所述生物传感器，包括氧化石墨烯基质、以及具有特异发射光谱的量子点标记的miRNA‑量子点探针，所述miRNA‑量子点探针通过π‑π堆积作用与所述氧化石墨烯基质吸附。本发明设计简单、扩增特异性高、成本低。

公开(公告)号：CN108707652A

公开(公告)日：2018-10-26

申请号：CN201810535249.0

申请日：2014-11-26

Applicant: 苏州新波生物技术有限公司

Inventor： C·O·F·达尔 ,  J·O·埃瑞克森

IPC: C12Q1/6876 ,  C12Q1/6816 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/6876 ,  C12Q1/6816 ,  C12Q2521/501 ,  C12Q2525/161 ,  C12Q2525/307 ,  C12Q2531/125

Abstract: 本文尤其提供一种处理核酸样本的方法。在一些实施方案中，所述方法包括：a)使包含靶片段的样本与核酸探针杂交，所述核酸探针包含：i.头部序列和尾部序列，其中所述头部序列和所述尾部序列在第一寡核苷酸分子的末端处；以及ii.夹板序列，所述夹板序列依次包含：与所述头部序列互补的上游侧翼序列、与所述靶片段互补的靶标互补序列以及与所述尾部序列互补的下游侧翼序列；从而产生杂交产物，其中所述靶片段的末端可连接地邻近所述第一寡核苷酸分子中的头部序列和尾部序列的末端；以及b)将所述靶片段的末端连接至所述第一寡核苷酸分子的头部序列和尾部序列的末端，从而产生包含所述靶片段以及所述头部序列和尾部序列的环状产物。还提供用于进行所述方法的探针和试剂盒。

公开(公告)号：CN108707649A

公开(公告)日：2018-10-26

申请号：CN201810792602.3

申请日：2018-07-18

Applicant: 桂林理工大学

Inventor： 朱文远 ,  周琳莹 ,  郝杰 ,  梁晓琳 ,  潘宏程 ,  郭自宽

IPC: C12Q1/6858

CPC classification number: C12Q1/6858 ,  C12Q2531/125 ,  C12Q2563/107

Abstract: 本发明公开了一种超支化一锅法滚环扩增检测单核苷酸多态性的方法。结合超支化一锅法滚环扩增反应和无标记荧光检测，建立了一种灵敏度高和特异性好的单核苷酸多态性检测方法。方法利用了特异性的连接反应和强有力的目标DNA引导的支化滚环扩增反应，在一锅法的基础上引入第二引物，其能通过一锅法超支化滚环扩增反应进行有效的扩增并产生了不同长度的DNA产物，随后加入高灵敏的SYBR Green I染料进行荧光测量，提高了一锅法滚环扩增的灵敏度，方法可用于单核苷酸多态性的快速定量检测。

公开(公告)号：CN107760763A

公开(公告)日：2018-03-06

申请号：CN201711156103.7

申请日：2017-11-20

Applicant: 东南大学

Inventor： 王进科 ,  张贝贝

IPC: C12Q1/6844 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/6844 ,  C12Q2531/125 ,  C12Q2525/301

Abstract: 本发明公开了一种用于茎环引物-滚环扩增反应的茎环引物以及茎环引物-滚环扩增的应用，该茎环引物为一种具有双链茎部和单链环区的单分子链内发卡结构，通过茎环引物进行茎环引物-滚环扩增可以对核酸分子进行检测。本发明通过在滚环扩增反应中使用茎环引物开发了一种创新性的滚环扩增方法。该滚环扩增方法在核酸检测中具有卓越和独特的优点，包括在液相和固相中的灵活性检测、高通量和高灵敏度，在容易实现的恒定反应条件下进行自控的线性或指数扩增，并且可以在溶液中均相和快速地检测靶核酸分子。本发明茎环引物-滚环扩增方法克服了目前滚环扩增方法中的几乎所有的局限性。

公开(公告)号：CN106929598A

公开(公告)日：2017-07-07

申请号：CN201710323897.5

申请日：2017-05-04

Applicant: 湖南融健基因生物科技有限公司

Inventor： 蒋健晖 ,  唐丽娟 ,  黄志梅 ,  钟志坚

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6851 ,  C12Q2531/125 ,  C12Q2563/143 ,  C12Q2563/149

Abstract: 本发明提供了一种乳液中进行滚环扩增的数字核酸分析方法，本发明所述数字核酸分析方法是以引物标记的磁珠为载体，在乳液中发生滚环扩增反应，磁珠在反应后生成大量的扩增产物并捕捉与之互补的荧光标记引物，形成磁珠‑扩增产物‑荧光标记引物的复合物，反应后的乳液经破乳后收集反应磁珠，使用显微镜和流式细胞仪采集磁珠的荧光信号，通过对荧光磁珠数的计数实现对目标DNA的数字核酸分析。本发明所述的一种乳液中进行滚环扩增的数字核酸分析方法利用滚环扩增的优势缩短了时间、提高了效率，该方法为基因诊断和基因治疗等研究提供了一种工艺简单、信号稳定、具有较高的灵敏度与准确性的数字核酸分析手段。

公开(公告)号：CN106929593A

公开(公告)日：2017-07-07

申请号：CN201710287339.8

申请日：2017-04-27

Applicant: 华侨大学

Inventor： 柯荣秦 ,  林辰 ,  陈小媛

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6841 ,  C12Q2521/501 ,  C12Q2531/125 ,  C12Q2543/10

Abstract: 本发明公开了一种原位核酸检测方法，该本方法基于双连接探针特异性识别靶序列和通过滚环扩增放大信号，可用于原位检测一种或多种目标核酸。这种新方法产生了一种高信噪比的特异性检测信号，能够实现对样品中的核酸靶序列的检测。

公开(公告)号：CN106834508A

公开(公告)日：2017-06-13

申请号：CN201710162311.1

申请日：2017-03-17

Applicant: 武汉大学

Inventor： 周翔 ,  刘奕侬 ,  王少儒 ,  田沺 ,  张小娥 ,  黄俊捷 ,  杨伊文

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/682 ,  C12Q2525/207 ,  C12Q2531/125 ,  C12Q2563/107 ,  C12Q2533/107

Abstract: 本发明公开了一种连接反应引发的超分支滚环扩增检测miRNA的方法，属于分子生物学和核酸化学领域。本发明方法主要由三部分组成；第一部分是5'端磷酸化的锁式探针的两末端与靶标miRNA互补配对后利用SplintR连接酶连接成环；第二部分是超分支滚环扩增，锁式探针成环后作为模板、靶标miRNA作为引物，在phi29 DNA聚合酶的作用下发生线性滚环扩增，通过引入二级引物，使线性滚环扩增沿着支链方向发展，达到信号进一步放大；第三部分是往滚环扩增产物中加入SYBR GREEN I染料进行检测。本发明操作简单、成本较低、体系单一、灵敏度高、无背景荧光信号干扰，适于复杂生物环境中miRNA的检测。