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公开(公告)号:CN109055302A
公开(公告)日:2018-12-21
申请号:CN201810990740.2
申请日:2018-08-28
Applicant: 重庆医科大学附属第一医院
CPC classification number: C12N5/067 , C12N2500/34 , C12N2509/00 , G01N33/5005 , G01N33/68
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种HBV转基因小鼠原代肝细胞的分离、培养与鉴定的方法。所述方法为改良的胶原酶两步灌流法进行原代肝细胞的分离和收集;用无菌的细胞过滤器将收集的肝细胞进行过滤,再经离心后加培养基重悬,细胞计数后接种培养;鉴定包括小鼠原代肝细胞白蛋白检测、小鼠原代肝细胞糖原检测和小鼠原代肝细胞中HBV的表达分析。本发明获取的HBV转基因小鼠原代肝细胞细胞活率高,具有正常的肝实质细胞功能,并可维持8天,可以更加真实反应其HBV感染状态下的肝细胞生理代谢活动,这对体外研究肝细胞生理代谢功能以及抗病毒药物研究具有重要意义。
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公开(公告)号:CN117866108A
公开(公告)日:2024-04-12
申请号:CN202311819233.X
申请日:2023-12-27
Applicant: 重庆医科大学附属第一医院 , 重庆医科大学
IPC: C07K19/00 , C12N9/02 , C12N15/62 , C12N15/70 , C12N1/21 , G01N33/58 , G01N33/68 , G01N33/573 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了用于小分子化合物、靶向蛋白检测的多功能蛋白分子开关,所述分子开关为融合蛋白,选自NanoSwitch‑Lys、NanoSwitch‑Lys‑11、NanoSwitch‑Lys‑I、NanoSwitch‑Lys‑Q中的任一个;NanoSwitch‑Lys包括依次连接的SmBiT、第一接头、6×赖氨酸短肽、第二接头、LgBiT、第三接头、6×赖氨酸短肽、第四接头、6×His标签。本发明的蛋白分子开关平台可在不更改基础蛋白分子开关模块的前提下,仅需简单的小分子化合物修饰与标记反应,避免检测大分子蛋白时须构建获得特异性结合肽的问题,可广泛应用于不同小分子化合物及其靶蛋白检测。
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