公开(公告)号：CN118256465A

公开(公告)日：2024-06-28

申请号：CN202410309999.1

申请日：2024-03-19

Applicant: 青岛科技大学

Inventor： 马玉珍 ,  马翠萍 ,  石超 ,  李勇 ,  杜双双 ,  王鹏宇

IPC: C12N9/10

Abstract: 本发明公开了一种体外甲基化提高异戊烯基转移酶均一性的方法，解决现有技术中异戊烯基转移酶存在分子不均一的技术问题。本发明提供的体外甲基化提高异戊烯基转移酶均一性的方法，使用二甲胺硼烷络合物作为体外甲基化的还原剂，在体外缓冲液条件下定向甲基化修饰异源表达的异戊烯基转移酶侧链，获得均一的甲基化后的异戊烯基转移酶。本发明的原理是利用异戊烯基转移酶赖氨酸氨基和甲醛之间形成席夫碱，将其还原为仲胺或叔胺，然后赖氨酸残基与甲醛继续迅速反应生成二甲基化产物。本发明以独特和明确的化学反应定向修饰异戊烯基转移酶侧链，不会改变蛋白质重要残基的性质。可广泛应用于基因工程技术领域。

公开(公告)号：CN119859621A

公开(公告)日：2025-04-22

申请号：CN202510151568.1

申请日：2025-02-11

Applicant: 青岛科技大学

Inventor： 马玉珍 ,  王鹏宇 ,  杜双双 ,  刘佳佳 ,  张家启 ,  马翠萍

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P5/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种异戊二烯转移酶突变体及其用途。为了解决现有技术中微生物无法合成聚异戊二烯的技术问题，本发明运用酶的半理性设计，在不改变该酶催化结构域氨基酸序列的前提下，通过截短N端疏水性氨基酸等，获得了具有底物特异性的异戊二烯转移酶突变体，其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：5所示。将上述突变体的基因重组至表达载体，获得重组表达载体，并将其转入宿主细胞大肠杆菌中，最终得到了可生产聚异戊二烯的工程菌，实现了聚异戊二烯的异源合成。