公开(公告)号：CN114574415A

公开(公告)日：2022-06-03

申请号：CN202210202272.4

申请日：2022-03-03

Applicant: 齐鲁制药(内蒙古)有限公司

Inventor： 赵霞 ,  李瑞彬 ,  苏振业 ,  王妮 ,  黄科学

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/76 ,  C12N15/53 ,  C12P17/18 ,  C12R1/465 ,  C12R1/55

Abstract: 本发明涉及一种C5‑酮基米尔贝霉素生产菌株的构建方法及应用。所述C5‑酮基米尔贝霉素生产菌株是以含有milF基因的米尔贝霉素A3/A4产生菌株为出发菌株，然后向出发菌株中插入crRNA干扰milF基因表达所得。所述crRNA的序列如SEQ ID NO.1所示，所述milF基因的序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供了C5‑酮基米尔贝霉素生产菌株的构建方法与应用。本发明提供的C5‑酮基米尔贝霉素生产菌株构建方法简单，不需要利用同源重组进行基因敲除的单交换筛选、双交换筛选等复杂流程，仅仅通过对携带所述crRNA的pRimilF接合转移就可以实现milF基因沉默，缩短了C5‑酮基米尔贝霉素的生产工艺周期，减少了昂贵试剂的使用，大幅降低了生产成本。