本发明公开了一种单宁酶在制备没食子酸中的应用，属于酶工程技术领域，所述应用包括如下步骤：1)配制浓度为25％‑35％(w/v)的单宁酸溶液，调节单宁酸溶液pH至4.0‑5.0；2)取步骤1)得到的单宁酸溶液添加到反应釜中，按照36‑54U/g的底物添加量加入单宁酶，水解生成没食子酸。本发明所用的单宁酶来源于黑曲霉ATCC13496，其氨基酸序列与SEQIDNO:13或其成熟多肽具有至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％以上的序列一致性。本发明还公开了利用黑曲霉CICC2462菌株表达单宁酶的氨基酸序列制备单宁酶的方法。