Abstract:
본 발명은 2,3-부탄다이올의 제조방법에 관한 것으로, 보아 상세하게는 (a) 크렙시엘라의 wabG를 코딩하는 뉴클레오타이드 서열을 불활성화 하는 단계; (b) 아세토락테이트 디카르복실라아제(acetolactate decarboxylase)를 코딩하는 뉴클레오타이드 서열 및 아세토락테이트 신타아제(acetolactate synthase)를 코딩하는 뉴클레오타이드 서열을 발현 벡터에 삽입하여 재조합 벡터를 제조하는 단계; (c) 상기 재조합 벡터를 상기 크렙시엘라에 도입하여 형질전환 크렙시엘라를 제조하는 단계; (d) 상기 형질전환 크렙시엘라를 배양 배지에서 배양하여 2,3-부탄다이올을 제조하는 단계; 및 (e) 상기 2,3-부탄다이올을 수득하는 단계를 포함하는 형질전환 크렙시엘라( Klebsiella )를 이용한 2,3-부탄다이올의 제조방법을 제공한다. 본 발명에 따르면, 본 발명은 종래의 기술보다 경제적인 산업용 탄소원을 이용하여 경제적으로 2,3-부탄다이올을 제조할 수 있다.
Abstract:
The present invention relates to a method for preparing 2,3-butanediol by metabolic flux analysis, comprising the steps of: preparing a recombinant vector by inserting a nucleotide sequence encoding acetolactate decarboxylase, acetolactate synthase, and butanediol dehydrogenase among Klebsiella genus into an expression vector; transforming the recombinant vector into E. coli and preparing recombinant E. coli; culturing the recombinant E. coli under an acidic pH condition and preparing 2,3-butanediol; and obtaining 2,3-butanediol. Accordingly, the present invention provides an optimal condition for preparing 2,3-butanediol through metabolic flus analysis.
Abstract:
PURPOSE: A manufacturing method of meso-2,3-butanediol is provided to produce the meso-2,3-butanediol with the recombinant Escherichia through the codon optimization of the gene sequence which encodes the acetoin reductase nucleotide of Klebsiella. CONSTITUTION: The manufacturing method of meso-2,3-butanediol comprises a step of obtaining the nucleotide sequence of the first rank of the rank list by optimizing the codon which is suitable for manifesting the acetoin reductase nucleotide of Klebsiella in the Escherichia coli; a step of manufacturing the recombinant vector by inserting the nucleotide which optimizes the codon of the acetoin reductase to the manifesting vector; a step of manufacturing the recombinant Escherichia by transforming the recombinant vector to the Escherichia; and a step of manufacturing meso-2,3-butanediol from the recombinant Escherichia.
Abstract:
본 발명은 (a) 아세토락테이트 디카복실실레이즈(acetolactate decarboxylase)를 코딩하는 뉴클레오티드; 및 (b) 알코올 디하이드로지네이즈(alcohol dehydrogenase)를 코딩하는 뉴클레오티드로 구성된 군으로부터 선택되는 최소 1종의 뉴클레오티드 서열을 포함하는 발현벡터로 형질전환된(cotransformed) 2,3-부탄다이올 과발현용 대장균을 제공한다. 본 발명의 형질전환 대장균은 야생종 크렙시엘라 뉴모니아 KCTC 2242와 비교하였을 때, 포도당의 소모량에 따른 2,3-부탄다이올의 생산량이 20% 증가하였다.
Abstract:
PURPOSE: A method for preparing meso-2,3-butandiol from acetoin using a recombinant microorganism containing a novel acetoin reductase is provided to obtain a large amount of compounds for a platform. CONSTITUTION: Acetoin reductase has an amino acid sequence of sequence number 2. A nucleic acid molecule encodes acetoin reductase and has a nucleotide sequence of sequence number 1. A vector contains the nucleic acid molecule. A microorganism is transformed by the nucleic acid molecule. The transformed microorganism is transformed E.coli. A method for preparing 2,3-butanediol comprises a step of culturing the transformed microorganism.
Abstract:
PURPOSE: A method for producing transformed E.coli for 2,3-butanediol overexpression is provided to enhance 2,3-butanediol production. CONSTITUTION: An E.coli for 2,3-butandiol overexpression is prepared by cotransforming E.coli with an expression vector containing a nucleotide encoding acetolactate decarboxylase and a nucleotide sequence encoding alcohol dehydrogenase. The nucleotides are derived from Klebsiella pneumonia. The acetolactate decarboxylase contains an amino acid sequence of sequence number 1. The alcohol dehydrogenase contains an amino acid sequence of sequence number 2. The expression vector is E.coli-Klebsiella shuttle vector Puc18k. The nucleotide sequences are inserted to MCS(multiple cloning site) of pUC18K.
Abstract:
본 발명은 (a) wabG 유전자가 불활성화(inactivation) 되어 있고; (b) budR 유전자가 과발현된 2,3-부탄다이올 생산용 크렙시엘라( Klebsiella ) 재조합 균주에 관한 것으로, 본 발명의 2,3-부탄다이올 생산용 크렙시엘라( Klebsiella ) 종 재조합 균주은 비병원성으로 안전하게 2,3-부탄다이올을 생성할 수 있으며, 증가된 2,3-부탄다이올 생성능을 갖는 재조합 균주를 제공한다.
Abstract:
본 발명은 (a) 미생물의 바이오매스를 냉장 메탄올(cold methanol)에 현탁한 다음 동결시키는 단계; (b) 상기 동결된 바이오매스를 해동시키는 단계; (c) 상기 단계 (a) 및 (b)를 반복하여 상기 바이오매스로부터 누출된 대사물의 현탁액을 얻는 단계; 및 (d) 상기 대사물의 현탁액에 대하여 매스 스펙트로미트리(mass spectrometry) 분석을 실시하여 상기 미생물의 세포 내 대사물을 동정하는 단계를 포함하는 미생물의 세포 내 대사 프로파일(intracellular metabolic profile)을 얻는 방법을 제공한다. 본 발명의 방법에 따르면, 본 발명은 고생산 및 고수율의 대사 프로파일을 제공할 수 있다.