GhMYB33基因在创制带有遗传标记的棉花雄性不育系中的应用

    公开(公告)号:CN118345085A

    公开(公告)日:2024-07-16

    申请号:CN202410443576.9

    申请日:2024-04-13

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及GhMYB33基因在创制带有遗传标记的棉花雄性不育系中的应用。本发明提供了与棉花雄性不育性状相关的四个基因片段,所述四个基因片段的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.4所示。本发明所述四个基因片段为GhMYB33基因的同源基因片段,在棉花花药发育过程中可能发挥着相似的功能,本发明通过将四个基因片段同时进行敲除,可以创制出带有可遗传黑斑标记的棉花雄性不育系。本发明创制的雄性不育系不仅容易识别,且败育率达到100%,为棉花杂交育种提供了重要的技术支持。

    CRISPR/Cas13b介导的棉花RNA转录调控方法

    公开(公告)号:CN113832180B

    公开(公告)日:2024-06-28

    申请号:CN202110885202.9

    申请日:2021-08-03

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,公开了一种CRISPR/Cas13b介导的棉花RNA转录调控方法,对含有棉花内源启动子载体进行改造,以PbuCas13b蛋白取代原有的nCas9+Tad蛋白,构建在棉花中具有RNA编辑能力的载体CRISPR/PbuCas13b;选取GhCLA和GhPGF为目标基因验证CRISPR/PbuCas13b在棉花中的应用;设计靶标,利用农杆菌介导的遗传转化将单碱基编辑系统导入棉花基因组,对转基因植株进行qRT‑PCR,以jin668为对照,检测CRISPR/PbuCas13b在异源四倍体棉花基因组中的编辑效率。本发明的转化载体可在陆地棉基因组编辑中应用。

    一种棉花原生质体的制备方法及其应用和转化方法

    公开(公告)号:CN117535220A

    公开(公告)日:2024-02-09

    申请号:CN202311499394.5

    申请日:2023-11-13

    Abstract: 本发明属于植物分子育种技术领域,具体涉及一种棉花原生质体的制备方法及其应用和转化方法。本发明通过选择棉花黄化苗子叶或棉花黄化苗愈伤组织作为外植体,消耗了大部分次生成分,并通过实验处理减少干扰条件,在棉花中构建了省时、高效的原生质体制备方法。采用该方法可以进一步建立快速高效的原生质体瞬时转化体系,从外植体到获得成功表达GFP的原生质体只需13小时,可以快速获得高通量高活性的原生质体,获得的高通量高活性原生质体可应用于棉花亚细胞定位、体细胞杂交、遗传转化、植株再生等领域。

    一种热诱导的基因编辑系统CRISPR-Cas12b在陆地棉中的应用

    公开(公告)号:CN111378684B

    公开(公告)日:2023-06-27

    申请号:CN202010179130.1

    申请日:2020-03-15

    Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域,具体涉及一种热诱导的基因编辑系统CRISPR‑Cas12b首次在陆地棉中的应用。对含有棉花内源启动子pGhU6‑7的pRGEB32‑GhU6.7‑NPT Ⅱ载体进行改造,以密码子优化合成的AaCas12b蛋白取代原Cas9蛋白,构建棉花中具有编辑能力的载体。选取GhCLA为目标基因验证载体在棉花中的应用。设计2个靶标,利用农杆菌介导的转化将Cas12b编辑系统导入棉花基因组,使用三种温度不同时间处理下胚轴,转基因植株进行相关测序,检测异源四倍体棉花基因组中的编辑效率和全基因组检测脱靶效应。本发明使用特定的温度和处理时间得到良好的编辑效率和特异性。

    一种改良高温下棉花雄性育性的方法

    公开(公告)号:CN112662684B

    公开(公告)日:2022-10-11

    申请号:CN202110014741.5

    申请日:2021-01-07

    Abstract: 本发明属于植物分子育种技术领域,具体涉及一种改良高温下棉花雄性育性的方法。本发明发现高温抑制棉花花药中茉莉酸合成酶基因GhACO2的表达,导致花药内源茉莉酸含量降低。通过敲除一种GhACO2基因,得到一种棉花突变体,该突变体在常温下表现出雄性不育表型特征。对敲除GhACO2基因的棉花突变体在花蕾期喷施茉莉酸甲酯,可恢复突变体的雄性育性。对敏高温型棉花在花蕾期喷施相同浓度的茉莉酸甲酯,同样可提高高温下棉花的雄性育性,本发明可显著降低因高温导致的棉花雄性败育以及由此引起的棉花大幅减产问题。

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