소 베타-카제인과 융합된 바이오 신약용 단백질 생산을 위한 넉-인 방법
    11.
    发明公开

    公开(公告)号:KR1020160017870A

    公开(公告)日:2016-02-17

    申请号:KR1020140101328

    申请日:2014-08-06

    Abstract: 본발명은치료용단백질의대량생산을위하여, ⅰ) 5'-아암으로서, 서열번호 1로기재되는핵산서열을갖는폴리뉴클레오티드로구성된소 게놈 DNA의베타-카제인암호화영역의엑손 2, 3, 4, 5, 6 및 7을포함하는 4,840 bp 크기의단편; ⅱ) 상기베타-카제인암호화영역과프레임에맞게연결된치료용단백질(therapeutic protein)을암호화하는폴리뉴클레오티드; 및ⅲ) 3'-아암으로서, 서열번호 2로기재되는핵산서열을갖는폴리뉴클레오티드로구성된소 게놈 DNA의베타-카제인암호화영역의엑손 8 및엑손 9를포함하는단편으로구성되는유전자컨스트럭트를포함하는, 형질전환소에서의외래단백질생산용넉-인(knock in) 벡터를제공한다.

    Abstract translation: 提供了用于在转化的牛中产生外源蛋白的敲入载体。 为了大规模生产治疗性蛋白质,载体包含:(i)4,840bp的片段,其是5'臂,并且在β-酪蛋白编码区中包含2,3,4,5,6和7个外显子, 由具有由序列号1表示的核酸序列的多核苷酸组成的牛基因组DNA; (ii)编码与β-酪蛋白编码区连接以配合到框架中的治疗性蛋白质的多核苷酸; 和(iii)3'臂的基因构建体,由包含序列号2所示的核酸序列的多核苷酸的牛基因组DNA中的β-酪蛋白编码区的外显子8和9的片段构成。

    소 베타 카제인을 이용하여 제조된 넉-인 벡터

    公开(公告)号:KR101507600B1

    公开(公告)日:2015-04-29

    申请号:KR1020120111075

    申请日:2012-10-08

    Abstract: 본 발명은 치료용 단백질의 대량 생산을 위하여, 5' 아암(arm)으로서, 서열번호 1로 기재되는 핵산서열을 갖는 폴리뉴클레오티드로 구성된 소 베타-카제인 게놈 DNA의 5176 bp 프로모터, 엑손 1 및 2를 포함하는 5' 말단 단편; 치료용 단백질(therapeutic protein)을 암호화하는 유전자; 및 3' 아암으로서, 서열번호 2로 기재되는 핵산서열을 갖는 폴리뉴클레오티드로 구성된 소 베타-카제인 게놈 DNA의 엑손 3 및 엑손 4를 포함하는, 치료용 단백질 생산용 넉-인(knock in) 벡터를 제공한다.

    돼지 베타-카제인 게놈 DNA를 이용하여human basic FGF를 생산하기 위한 넉-인 벡터가 도입된 형질전환 돼지 체세포 제작 방법
    13.
    发明公开

    公开(公告)号:KR1020100039620A

    公开(公告)日:2010-04-16

    申请号:KR1020080098659

    申请日:2008-10-08

    Abstract: PURPOSE: A method for producing porcine somatic cells for producing a human basic FGF(hFGF) with a knock-in vector is provided to express the hFGF with high concentration and to ensure stability and excellent physical activity. CONSTITUTION: A method for manufacturing porcine somatic cells in which porcine beta-casein is targeted comprises: a step of transforming porcine somatic cells with porcine beta-casein gene targeting knock-in vector ; a step of culturing the porcine somatic cells to induce homology recombination; and a step of selecting porcine somatic cells in which porcine beta-casein gene is targeted by the homology recombination. A method for transforming porcine comprises: a step of transforming porcine somatic cells with porcine beta-casein gene targeting knock-in vector; a step of culturing porcine somatic cells to induce homology recombination; a step of selecting the porcine somatic cells; a step of removing nucleus of the porcine ovary and introducing the targeted cells to obtain a fertilized egg in which somatic cells are nuclear transplanted; and a step of implanting the fertilized egg.

    Abstract translation: 目的:提供用于产生具有敲入载体的人碱性FGF(hFGF)的猪体细胞的生产方法,以高浓度表达hFGF并确保稳定性和优异的身体活动。 构成:猪β-酪蛋白靶向生产猪体细胞的方法包括:用猪β-酪蛋白基因靶向敲入载体转化猪体细胞的步骤; 培养猪体细胞以诱导同源重组的步骤; 以及通过同源重组来选择猪β-酪蛋白基因靶向的猪体细胞的步骤。 一种转化猪的方法包括:用靶向敲入载体的猪β-酪蛋白基因转化猪体细胞的步骤; 培养猪体细胞以诱导同源重组的步骤; 选择猪体细胞的一个步骤; 去除猪卵巢的核并引入目标细胞以获得其中体细胞被移植的受精卵的步骤; 以及植入受精卵的步骤。

    넉-인 형질전환 동물, 그의 선별 방법 및 키트
    14.
    发明授权
    넉-인 형질전환 동물, 그의 선별 방법 및 키트 有权
    - 敲入转基因动物用于选择相同的方法和试剂盒

    公开(公告)号:KR101573793B1

    公开(公告)日:2015-12-03

    申请号:KR1020130123640

    申请日:2013-10-16

    Abstract: 본발명은치료용단백질의대량생산을위하여, ⅰ) 소베타-카제인게놈 DNA의프로모터, 엑손 1, 2 및 3 일부를포함하는 5' 아암; ⅱ) 외래단백질을암호화하는유전자; 및ⅲ) 소베타-카제인게놈 DNA의엑손 4, 5 및 6을포함하는 3' 아암으로구성된유전자컨스트럭트를포함하는, 외래단백질생산용넉-인(knock in) 벡터를제공한다.

    돼지 β-카제인 게놈 DNA를 이용하여 생리활성물질을생산하기 위한 넉-인 벡터 및 이를 이용하여생리활성물질을 생산하는 방법
    16.
    发明公开
    돼지 β-카제인 게놈 DNA를 이용하여 생리활성물질을생산하기 위한 넉-인 벡터 및 이를 이용하여생리활성물질을 생산하는 방법 失效
    通过使用PORCINEβ-CASEIN基因组DNA生产生物活性物质的插入载体,以及使用其生产生物活性物质的方法

    公开(公告)号:KR1020090073921A

    公开(公告)日:2009-07-03

    申请号:KR1020070141992

    申请日:2007-12-31

    Abstract: A knock-in vector for producing a bioactive substance is provided to efficiently and stably express bFGF (basic Fibroblast Growth Factor) and GFP (Green Fluorescent Protein) from porcine milk. A knock-in vector for producing a bioactive substance comprises 5' end fragment, gene coding the bioactive substance, and 3' end fragment. The 5' end fragment is 5' arm and comprises 2.65kb of promoter, one axon and one intron. The 3' end fragment is 3' arm, and comprises an axon 5, 6, and 7 of porcine beta-casein genome DNA. A nuclear localization signal (NLS) is additionally connected to the 5' end. The knock-in vector comprises a positive selectable marker and negative selectable marker. The bioactive substance is basic fibroblast growth factor (bFGF) or green fluorescent protein (GFP).

    Abstract translation: 提供用于产生生物活性物质的敲入载体,以有效和稳定地从猪牛奶中表达bFGF(碱性成纤维细胞生长因子)和GFP(绿色荧光蛋白)。 用于生产生物活性物质的敲入载体包含5'末端片段,编码生物活性物质的基因和3'末端片段。 5'末端片段是5'臂,包含2.65kb的启动子,一个轴突和一个内含子。 3'末端片段是3'臂,并且包含猪β-酪蛋白基因组DNA的轴突5,6和7。 核定位信号(NLS)另外连接到5'端。 敲入载体包含阳性选择标记和阴性可选择标记。 生物活性物质是碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)或绿色荧光蛋白(GFP)。

    돼지 HNF6 유전자 타겟팅 벡터 및 그의 용도
    18.
    发明公开
    돼지 HNF6 유전자 타겟팅 벡터 및 그의 용도 无效
    PORCINE HNF6基因靶向载体及其用途

    公开(公告)号:KR1020160001781A

    公开(公告)日:2016-01-07

    申请号:KR1020140078941

    申请日:2014-06-26

    Abstract: 본발명은돼지로부터유래된 HNF6(hepatocyte nuclease factor 6) 유전자타겟팅벡터, HNF6 유전자가넉-아웃된돼지체세포의제조방법, 상기방법으로제조된 HNF6 유전자가넉-아웃된돼지체세포를이용하여제조된 HNF6 유전자가넉-아웃된돼지수정란, 상기수정란을이용하여 HNF6 유전자가넉-아웃된형질전환돼지를제조하는방법및 상기방법으로제조되어 HNF6 유전자가넉-아웃된형질전환돼지에관한것이다. 본발명에서개발된 HNF6 유전자넉-아웃벡터를이용할경우, 대상세포에서 HNF6 유전자를효과적으로넉-아웃시킬수 있으므로, 이를사용하면, HNF6 유전자가넉-아웃된세포를이용한인간맞춤형장기생산용형질전환돼지를생산하기위한연구에널리활용될수 있을것이다.

    Abstract translation: 本发明涉及一种猪肝细胞核酸酶因子6(HNF6)基因靶向载体,HNF6基因敲除猪体细胞的制备方法,使用HNF6基因敲除猪体细胞产生的HNF6基因敲除猪受精卵 该方法,通过使用受精卵制备HNF6基因敲除转化的猪的方法和HNF6基因敲除转化的猪。 当使用由本发明开发的HNF6基因敲除载体时,HNF6基因可以有效地在靶细胞中被敲除,因此该载体可广泛用于研究中以产生转化的猪,以使用HNF6基因产生定制的人体器官 - 敲除细胞。

    넉-인 형질전환 동물, 그의 선별 방법 및 키트
    19.
    发明公开
    넉-인 형질전환 동물, 그의 선별 방법 및 키트 有权
    敲入转基因动物,用于选择它的方法和试剂盒

    公开(公告)号:KR1020150044524A

    公开(公告)日:2015-04-27

    申请号:KR1020130123640

    申请日:2013-10-16

    Abstract: 본발명은치료용단백질의대량생산을위하여, ⅰ) 소베타-카제인게놈 DNA의프로모터, 엑손 1, 2 및 3 일부를포함하는 5' 아암; ⅱ) 외래단백질을암호화하는유전자; 및ⅲ) 소베타-카제인게놈 DNA의엑손 4, 5 및 6을포함하는 3' 아암으로구성된유전자컨스트럭트를포함하는, 외래단백질생산용넉-인(knock in) 벡터를제공한다.

    Abstract translation: 在本发明中,提供了用于产生异源蛋白质的敲入载体,其包含i)包含牛β-酪蛋白基因组DNA的启动子和外显子1,2和3的5'; ii)编码异源蛋白质的基因; 和iii)由用于批量生产治疗性蛋白质的牛β-酪蛋白基因组DNA的外显子4,5和6组成的3'基因构建体。

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