公开(公告)号：ES2890776T3

公开(公告)日：2022-01-24

申请号：ES16710633

申请日：2016-03-10

Applicant: LIFE TECHNOLOGIES CORP

Inventor： LIU CHUNMEI ,  DONG SHOULIAN ,  WONG LINDA

IPC: C12Q1/68

Abstract: Un método para detectar un ARN pequeño maduro en una muestra que comprende ARN pequeño maduro, comprendiendo el método: poliadenilar el extremo 3' del ARN pequeño maduro y ligar un adaptador monocatenario al extremo 5' del ARN pequeño maduro en presencia de una ligasa de ARN monocatenario, de modo que se forma un producto de ligadura de ARN, en donde el adaptador comprende una porción de cebador directo universal; transcribiendo de manera inversa el producto de ligadura de ARN usando un cebador de transcripción inversa (RT), formando de este modo un producto de ADNc del producto de ligadura del ARN, en donde el cebador de RT comprende una porción poli(T) y una porción de cola, en donde la porción de cola comprende una porción de cebador inverso universal; amplificar el producto de ADNc usando una primera pareja de cebador directo e inverso para formar un producto de amplificación, en donde el primer cebador directo puede hibridarse con la porción de cebador directo universal o su complemento, y el primer cebador inverso puede hibridarse con la porción de cebador inverso universal o su complemento; y detectar el producto de amplificación correspondiente al ARN pequeño maduro mediante reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real cuantitativa (qPCR), en donde la amplificación del producto del ADNc es una etapa de amplificación previa, y en donde la poliadenilación, la ligadura y la transcripción inversa se llevan a cabo en el mismo recipiente de reacción, y en donde la poliadenilación, la ligadura, la transcripción inversa y la preamplificación se llevan a cabo sin que intervengan extracción, precipitación, purificación y/u otros procesos de limpieza.

公开(公告)号：PL3260558T3

公开(公告)日：2020-08-10

申请号：PL17186097

申请日：2013-11-04

Applicant: LIFE TECHNOLOGIES CORP

Inventor： DONG SHOULIAN ,  LIU CHUNMEI

IPC: C12Q1/6851