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    Captura, detección y cuantificación de ARN pequeño
    4.
    发明专利
    Captura, detección y cuantificación de ARN pequeño 未知

    公开(公告)号：ES2749463T3

    公开(公告)日：2020-03-20

    申请号：ES13795633

    申请日：2013-11-04

    Applicant: LIFE TECHNOLOGIES CORP

    Inventor： WONG LINDA ,  CHEN CAIFU ,  WU YALEI ,  DONG SHOULIAN ,  LIU CHUNMEI

    IPC: C12Q1/6851 ,  C12P19/34 ,  C12Q1/6832 ,  C12Q1/6853 ,  C12Q1/6855 ,  C12Q1/6858

    Abstract: Un método para detectar un ARN pequeño maduro, comprendiendo el método: proporcionar una muestra que comprende una molécula de ARN pequeño que comprende aproximadamente 20-30 nucleótidos que se ha procesado a partir de un precursor de ARN más grande (ARN pequeño maduro); poliadenilar el extremo 3' del ARN pequeño maduro; realizar la transcripción inversa del ARN pequeño maduro poliadenilado usando un cebador de transcripción inversa universal, de modo que se forma así un ADNc del ARN pequeño maduro, en donde el cebador de transcripción inversa universal comprende una parte de poli(T) y una parte de cola, en donde la parte de cola comprende una parte de cebador universal; ligar un adaptador de ligadura universal al extremo 3' del ADNc en presencia de una férula de ligadura, en donde la férula de ligadura comprende una región terminal 3' que contiene de aproximadamente 3 nucleótidos a aproximadamente 6 nucleótidos que se hibridan con el extremo 3' del ADNc del ARN pequeño maduro y una región terminal 5' que se hibrida con el extremo 5' del adaptador de ligadura, de modo que se forma un producto de ligadura de ADNc; amplificar el producto de ligadura de ADNc usando un par de cebadores directo e inverso universales para formar un producto de amplificación; y detectar el producto de amplificación.

    Métodos, composiciones y kits para la captura, la detección y la cuantificación del ARN pequeño
    5.
    发明专利
    Métodos, composiciones y kits para la captura, la detección y la cuantificación del ARN pequeño 未知

    公开(公告)号：ES2890776T3

    公开(公告)日：2022-01-24

    申请号：ES16710633

    申请日：2016-03-10

    Applicant: LIFE TECHNOLOGIES CORP

    Inventor： LIU CHUNMEI ,  DONG SHOULIAN ,  WONG LINDA

    IPC: C12Q1/68

    Abstract: Un método para detectar un ARN pequeño maduro en una muestra que comprende ARN pequeño maduro, comprendiendo el método: poliadenilar el extremo 3' del ARN pequeño maduro y ligar un adaptador monocatenario al extremo 5' del ARN pequeño maduro en presencia de una ligasa de ARN monocatenario, de modo que se forma un producto de ligadura de ARN, en donde el adaptador comprende una porción de cebador directo universal; transcribiendo de manera inversa el producto de ligadura de ARN usando un cebador de transcripción inversa (RT), formando de este modo un producto de ADNc del producto de ligadura del ARN, en donde el cebador de RT comprende una porción poli(T) y una porción de cola, en donde la porción de cola comprende una porción de cebador inverso universal; amplificar el producto de ADNc usando una primera pareja de cebador directo e inverso para formar un producto de amplificación, en donde el primer cebador directo puede hibridarse con la porción de cebador directo universal o su complemento, y el primer cebador inverso puede hibridarse con la porción de cebador inverso universal o su complemento; y detectar el producto de amplificación correspondiente al ARN pequeño maduro mediante reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real cuantitativa (qPCR), en donde la amplificación del producto del ADNc es una etapa de amplificación previa, y en donde la poliadenilación, la ligadura y la transcripción inversa se llevan a cabo en el mismo recipiente de reacción, y en donde la poliadenilación, la ligadura, la transcripción inversa y la preamplificación se llevan a cabo sin que intervengan extracción, precipitación, purificación y/u otros procesos de limpieza.

    Nuevas composiciones y métodos para mejorar la especificidad de la PCR
    7.
    发明专利
    Nuevas composiciones y métodos para mejorar la especificidad de la PCR 未知

    公开(公告)号：ES2800075T3

    公开(公告)日：2020-12-23

    申请号：ES17186097

    申请日：2013-11-04

    Applicant: LIFE TECHNOLOGIES CORP

    Inventor： DONG SHOULIAN ,  LIU CHUNMEI

    IPC: C12Q1/6851

    Abstract: Un cebador oligonucleotidico que comprende una secuencia de etiqueta de Restriccion de amplificacion dirigida a secuencia (STAR) 5' y una secuencia de hibridacion del acido nucleico objetivo, en donde la secuencia de la etiqueta STAR es capaz de formar una estructura de tallo-lazo tras la extension del oligonucleotido a lo largo del acido nucleico objetivo, en donde la secuencia de la etiqueta STAR comprende una secuencia igual a la totalidad o a una parte de una parte de hibridacion del acido nucleico objetivo de un segundo cebador para usarse con el oligonucleotido en una reaccion de amplificacion, o en donde la secuencia de la etiqueta STAR es complementaria a todo o a una parte del sitio de union objetivo de un segundo cebador para usarse con el cebador oligonucleotidico en una reaccion de amplificacion; y en donde el cebador oligonucleotidico y el segundo cebador son un par de cebadores directo e inverso.

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