公开(公告)号：CN116162623A

公开(公告)日：2023-05-26

申请号：CN202211267220.1

申请日：2022-10-17

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 贾岩龙 ,  张淼 ,  王天云 ,  杨智利 ,  杨露露 ,  路江涛 ,  张玺

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C07K16/24

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及敲低Setdb1基因表达的CHO细胞系、构建方法、应用、重组蛋白表达系统。本发明构建含有SSR重组酶元件的Setdb1基因的shRNA转座子载体；利用SSR重组酶将shRNA转座子载体载入CHO细胞，实现shRNA片段的细胞稳转效果；同时由于SSR重组酶整合效率极高，shRNA片段在目的细胞基因组整合的高拷贝数显著提升了shRNA片段的表达效果，增强了基因的干扰效果。本发明构建的CHO细胞系能够显著降低Setdb1 mRNA和蛋白表达水平，敲低作用十分明显；能够显著提高重组蛋白表达，有效克服了目前CHO细胞表达系统存在的表达水平较低的问题。

公开(公告)号：CN116790664A

公开(公告)日：2023-09-22

申请号：CN202310631107.5

申请日：2023-05-31

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 贾岩龙 ,  杨露露 ,  王天云 ,  郭潇 ,  杨智利 ,  张玺 ,  耿少雷 ,  张俊河 ,  米春柳 ,  张淼

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  C12N5/10 ,  C07K16/24 ,  C07K14/765

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及敲低SUV39H1基因表达的CHO细胞系的应用、重组蛋白表达系统。本发明构建靶向SUV39H1基因的shRNA表达载体，利用SSR重组酶实现干扰序列DNA载体高效稳转，催化shRNA载体整合到细胞基因组，可明显提升干扰效率；敲低SUV39H1基因表达，应用于重组蛋白表达系统，能够显著提高目的蛋白表达水平，有效解决了CHO细胞表达系统在生物制药生产过程中存在的表达水平较低的问题。