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公开(公告)号：CN114958914A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202210627448.0
申请日：2022-06-06
Applicant: 新乡医学院 , 新乡医学院第一附属医院
Abstract: 本发明属于基因工程及基因治疗技术领域，具体涉及一种高效人类及哺乳动物细胞附着体表达载体，同时还涉及该附着体表达载体的构建方法和应用。本发明在启动子上游反向插入第一核基质结合区序列，启动子下游正向插入内含子序列，内含子序列下游正向插入第二核基质结合序列，并进一步优选启动子序列为EF‑1α序列、第一核基质结合区序列为MAR X‑29、内含子序列为hCMV内含子序列、第二核基质结合区序列为MAR特征性序列构建形成附着体表达载体。通过实验验证，使用本发明构建的表达载体，宿主细胞采用CHO细胞或人结肠癌细胞HCT116，能显著提高转基因表达水平与表达稳定性，表达的目的蛋白具有生物学功能。
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公开(公告)号：CN114958914B
公开(公告)日：2023-09-26
申请号：CN202210627448.0
申请日：2022-06-06
Applicant: 新乡医学院 , 新乡医学院第一附属医院
Abstract: 本发明属于基因工程及基因治疗技术领域，具体涉及一种高效人类及哺乳动物细胞附着体表达载体，同时还涉及该附着体表达载体的构建方法和应用。本发明在启动子上游反向插入第一核基质结合区序列，启动子下游正向插入内含子序列，内含子序列下游正向插入第二核基质结合序列，并进一步优选启动子序列为EF‑1α序列、第一核基质结合区序列为MAR X‑29、内含子序列为hCMV内含子序列、第二核基质结合区序列为MAR特征性序列构建形成附着体表达载体。通过实验验证，使用本发明构建的表达载体，宿主细胞采用CHO细胞或人结肠癌细胞HCT116，能显著提高转基因表达水平与表达稳定性，表达的目的蛋白具有生物学功能。
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公开(公告)号：CN114958912B
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202210597822.7
申请日：2022-05-30
Applicant: 新乡医学院 , 北京同立海源生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一种HEK293细胞瞬时表达转染用试剂和瞬时表达系统转染方法，涉及基因工程技术领域，所述试剂包括穿膜肽DLR8与脂质体混合物，试剂中穿膜肽DLR8：脂质体的质量比为4～8.8:1。所述HEK293细胞瞬时表达转染用试剂和瞬时表达系统转染方法中，选择穿膜肽DLR8与脂质体混合物作为HEK293细胞瞬时表达的转染试剂，高糖DMEM培养基作为转染孵育Buffer，并在细胞转染处理后48h进行细胞悬浮，添加小分子添加剂丁酸钠，提高了HEK293细胞外源蛋白的表达水平，使得目的基因可高效表达。
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公开(公告)号：CN116837010A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202310830429.2
申请日：2023-07-07
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明提供了一种CHO细胞来源的外泌体miRNA在调控重组蛋白表达中的应用，本发明属于生物医药技术领域。本发明提供的一种CHO细胞来源的外泌体miRNA在调控重组蛋白表达中的应用中所述miRNA为cgr‑miR‑92a‑3p，核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明发现转染miRNA inhibitor下调CHO细胞来源的外泌体miR‑92a‑3p水平，阿达木抗体(重组蛋白)的表达水平显著升高，有望提供一种提高CHO细胞重组蛋白表达的新方法。
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公开(公告)号：CN115786240A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202211614585.7
申请日：2022-12-15
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N5/071 , C12P21/02 , C07K14/765
Abstract: 本发明提供了一种中国仓鼠卵巢细胞外泌体的提取方法及其应用，属于基因工程技术领域。本发明采用差速超速离心法提取中国仓鼠卵巢细胞的外泌体，通过简单操作可以获得高产量、高纯度的外泌体，将该外泌体作为细胞培养基补充添加剂，能够提高重组蛋白的表达水平，提高重组蛋白药物的生产效率和经济效益。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114958912A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202210597822.7
申请日：2022-05-30
Applicant: 新乡医学院 , 北京同立海源生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一种HEK293细胞瞬时表达转染用试剂和瞬时表达系统转染方法，涉及基因工程技术领域，所述试剂包括穿膜肽DLR8与脂质体混合物，试剂中穿膜肽DLR8：脂质体的质量比为4～8.8:1。所述HEK293细胞瞬时表达转染用试剂和瞬时表达系统转染方法中，选择穿膜肽DLR8与脂质体混合物作为HEK293细胞瞬时表达的转染试剂，高糖DMEM培养基作为转染孵育Buffer，并在细胞转染处理后48h进行细胞悬浮，添加小分子添加剂丁酸钠，提高了HEK293细胞外源蛋白的表达水平，使得目的基因可高效表达。
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公开(公告)号：CN111235100A
公开(公告)日：2020-06-05
申请号：CN202010109042.4
申请日：2020-02-21
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N5/0775
Abstract: 本发明属于细胞生物学领域，具体涉及一种人脐带血间充质干细胞的培养方法。包括以下步骤：将脐带血单个核细胞用第一培养基培养至细胞生长状态稳定，后续改用第二培养基进行培养，所述第一培养基主要由基础培养基、胎牛血清、抗生素和间充质干细胞生长添加物组成，其中胎牛血清体积占比为8-12％，间充质干细胞生长添加物体积占比为0.1-0.2％；所述第二培养基主要由基础培养基、胎牛血清、抗生素组成，其中胎牛血清体积占比为8-12％；所述基础培养基为DMEM/F12培养基。本发明的人脐带血间充质干细胞的培养方法，步骤简单、经济成本较低、培养成功率高，适于获取大量的间充质干细胞以满足相关疾病治疗时的使用量较大的需求。
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公开(公告)号：CN105802997A
公开(公告)日：2016-07-27
申请号：CN201610270090.5
申请日：2016-04-27
Applicant: 新乡医学院
CPC classification number: C12N15/85 , C12N15/66 , C12N2800/107
Abstract: 本发明公开了一种人类及哺乳动物细胞附着体表达载体、构建方法和应用，属于基因工程与基因治疗技术领域。本发明以pEGFP?C1为出发载体构建含核基质结合区特征性序列(如SEQ ID NO:1所示)的附着体表达载体，并以EF?1α启动子(如SEQ ID NO:2所示)替换pEGFP?C1载体上原CMV启动子，得到的pEME载体能高效、持续、稳定表达外源目的基因。
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公开(公告)号：CN120053603A
公开(公告)日：2025-05-30
申请号：CN202510234419.1
申请日：2025-02-28
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种RBM3在制备治疗地中海贫血制剂中的应用，所述RBM3的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。本发明首次发现RBM3基因表达的下调可显著激活γ‑globin的表达，RBM3相关的shRNA在制备治疗β‑地中海贫血疾病中具有积极作用。同时，在本发明的实验过程中未发现RBM3存在骨髓抑制、损害造血干细胞的红系分化潜力和肝肾损伤的不良反应。
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公开(公告)号：CN118599907A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410884991.8
申请日：2024-07-03
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域。本发明提供了人源hDGKθ基因的过表达载体、过表达人源hDGKθ基因的CHO细胞系及其构建方法，以及过表达人源hDGKθ基因的CHO细胞系在外源重组蛋白表达中的应用。本发明以含Tol2转座子元件的载体为骨架，构建hDGKθ过表达质粒，通过转座酶的催化将hDGKθ整合到CHO细胞基因座中，可以实现CHO细胞中hDGKθ的稳定过表达，应用于构建重组蛋白表达系统时也能够提高重组蛋白表达量。这有效克服了目前CHO细胞表达系统存在的表达水平较低的问题，为重组蛋白的生产提供了方向。
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