一种昆虫细胞培养基及其制备方法

    公开(公告)号:CN111304144B

    公开(公告)日:2023-04-07

    申请号:CN201911207739.9

    申请日:2019-11-30

    Abstract: 本发明涉及生物制药技术领域,具体涉及一种昆虫细胞培养基及其制备方法。该培养基有效成分包括氨基酸、维生素、无机盐、碳源、脂类物质和功能添加剂;其中功能添加剂包括腐胺、抗坏血酸磷酸酯镁、乙醇胺、次黄嘌呤、酵母提取物、棉籽水解物、丙酸钠、泊洛沙姆188、柠檬酸铁、柠檬酸钠、丙酮酸钠。本发明公开的培养基无血清、无蛋白,能避免添加血清带来的潜在风险及利于下游重组蛋白的纯化;同时培养基不含动物源添加物,适合生物药物的生产;本发明公开的培养基活细胞密度与细胞存活率高,蛋白表达量高,适合重组蛋白和疫苗的生产。

    一种人脐带血间充质干细胞的培养方法

    公开(公告)号:CN111235100B

    公开(公告)日:2022-04-29

    申请号:CN202010109042.4

    申请日:2020-02-21

    Abstract: 本发明属于细胞生物学领域,具体涉及一种人脐带血间充质干细胞的培养方法。包括以下步骤:将脐带血单个核细胞用第一培养基培养至细胞生长状态稳定,后续改用第二培养基进行培养,所述第一培养基主要由基础培养基、胎牛血清、抗生素和间充质干细胞生长添加物组成,其中胎牛血清体积占比为8‑12%,间充质干细胞生长添加物体积占比为0.1‑0.2%;所述第二培养基主要由基础培养基、胎牛血清、抗生素组成,其中胎牛血清体积占比为8‑12%;所述基础培养基为DMEM/F12培养基。本发明的人脐带血间充质干细胞的培养方法,步骤简单、经济成本较低、培养成功率高,适于获取大量的间充质干细胞以满足相关疾病治疗时的使用量较大的需求。

    一种提取质粒DNA的菌体裂解液、试剂盒及提取质粒DNA的方法

    公开(公告)号:CN109468311B

    公开(公告)日:2021-08-24

    申请号:CN201811427952.6

    申请日:2018-11-27

    Abstract: 本发明涉及一种提取质粒DNA的菌体裂解液、试剂盒及提取质粒DNA的方法,属于生物技术领域。本发明提取质粒DNA的菌体裂解液由裂解缓冲液、溶菌酶、RNase A组成,裂解缓冲液的组成为:每100mL裂解缓冲液中含有1.5~10g蔗糖、0.7~2.2g乙二胺四乙酸二钠、0.3~0.9g三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐、2.7~5.4g NH4Cl、0.1~2.0mL 0.5%的Triton X‑100、0.2~0.6g CaCl2、0.5~8g盐酸胍、0.5~3g异硫氰酸胍,其余量为水。本发明提取质粒DNA的试剂盒,包括上述菌体裂解液、漂洗液和洗脱液。该试剂盒成本低、提取质粒纯度高、适用性好。

    一种三联培养基序贯培养人脐带间充质干细胞的方法

    公开(公告)号:CN113201490A

    公开(公告)日:2021-08-03

    申请号:CN202110579979.2

    申请日:2021-05-26

    Abstract: 本发明涉及一种三联培养基序贯培养人脐带间充质干细胞的方法。本发明提供了三联培养基序贯培养法,该方法的脐带MSCs原代分离培养采用主要由DMEM高糖培养基、胎牛血清、抗生素组成的第一培养基,并在组织块上放置无菌的盖玻片以促进组织块贴壁和间充质干细胞的生长;待第一培养基培养至细胞生长状态稳定,改用主要由DMEM高糖培养基、胎牛血清、抗生素和间充质干细胞生长添加物组成的第二培养基进行传代培养;传代两次后,后续重新换回第一培养基进行培养。试验证明,该方法分离培养的MSCs能够用于再生医学相关研究领域。本发明的方法极大地降低了分离、培养人脐带间充质干细胞的成本,步骤简单、成功率高,适用于人脐带间充质干细胞的大规模培养。

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