公开(公告)号：CN119552840A

公开(公告)日：2025-03-04

申请号：CN202411778307.4

申请日：2024-12-05

Applicant: 新乡医学院 ,  常州南京大学高新技术研究院

Inventor： 贾岩龙 ,  张慧婕 ,  王冲 ,  王稳 ,  王天云 ,  华子春 ,  林艳 ,  赵琦

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N5/10 ,  C12N15/85 ,  C12N15/67 ,  C07K16/24

Abstract: 本发明提供了过表达Tgm2基因的重组载体、重组CHO细胞及其在提高外源重组蛋白表达中的应用，属于基因工程技术领域，本发明创造性发现编码转谷氨酰胺酶2的基因Tgm2具有提高哺乳动物细胞中外源重组蛋白表达水平的作用，本发明将基因Tgm2过表达载体转染至CHO细胞构建过表达Tgm2的CHO细胞系，该CHO细胞系能够显著提高Tgm2的mRNA和蛋白表达水平，同时该CHO细胞系作为重组蛋白表达用宿主细胞，相比野生型CHO细胞系，能够提升重组蛋白表达量，有效的克服了目前CHO细胞表达系统存在的表达水平较低的问题。

公开(公告)号：CN119552877A

公开(公告)日：2025-03-04

申请号：CN202411785925.1

申请日：2024-12-06

Applicant: 新乡医学院

Inventor： 贾岩龙 ,  赵琦 ,  王冲 ,  王稳 ,  王天云 ,  耿少雷 ,  张慧婕 ,  韩明明

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C07K14/765 ,  C07K16/24

Abstract: 本发明涉及重组蛋白表达及细胞培养技术领域。本发明提供了ANXA1基因作为重组蛋白表达调控靶点的应用以及调控该基因核酸片段、质粒和制备获得的CHO细胞系。本发明通过沉默/抑制CHO细胞ANXA1基因表达，调控细胞增殖能力，提升重组蛋白产量；具体将靶向ANXA1基因的shRNA片段插入整合到piggyBac转座子载体中，构建shRNA转座子载体；通过PBase持续高效催化shRNA转座子载体整合到CHO细胞的基因组中，实现CHO细胞中该基因的持续干扰效果。本发明构建的CHO细胞系能够显著降低ANXA1的mRNA和蛋白表达水平，作为重组蛋白表达用宿主细胞，成倍提升重组蛋白表达量。