-
公开(公告)号:CN114316065B
公开(公告)日:2023-09-22
申请号:CN202111269645.1
申请日:2021-10-29
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明属于重组蛋白细胞培养技术领域,具体涉及小分子肽及其应用、细胞培养基、核酸分子。本发明将细胞穿膜肽氨基酸序列与自噬调控蛋白的功能结构域氨基酸序列整合,合成小分子肽,作为重组蛋白表达的哺乳动物细胞培养基的补充添加物,能够促进细胞自噬,实现重组蛋白在细胞的高效表达。
-
公开(公告)号:CN111378626A
公开(公告)日:2020-07-07
申请号:CN202010200374.3
申请日:2020-03-20
Applicant: 新乡医学院 , 河南医学高等专科学校 , 河南普诺易生物制品研究院有限公司
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域,具体涉及一种CHO细胞系、构建方法、重组蛋白表达系统、应用。利用本发明APRT基因缺陷型CHO细胞系构建重组蛋白表达系统,无论是否存在G418筛选压力,第60代APRT基因缺陷型CHO细胞构建的重组蛋白表达系统中目的蛋白eGFP的表达维持率远高于正常重组CHO细胞中eGFP的表达维持率;在无G418筛选压力时,利用本发明CHO细胞构建的重组蛋白表达系统第30代细胞中重组玻璃粘连蛋白的表达量显著高于正常CHO细胞中相应目的蛋白的表达量。本发明重组蛋白表达系统能够显著提高CHO细胞中目的基因的表达量和长期表达稳定性,克服了目前CHO细胞表达系统存在的表达不稳定的问题。
-
公开(公告)号:CN119464290A
公开(公告)日:2025-02-18
申请号:CN202411579927.5
申请日:2024-11-07
Applicant: 新乡医学院 , 常州南京大学高新技术研究院
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12P21/08 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供了一种敲低MAT2A基因表达的shRNA、载体、CHO细胞系、重组蛋白表达系统及其构建方法和应用,属于基因工程技术领域。本发明将敲低MAT2A基因的shRNA核酸片段插入出发载体U6启动子下游构建得到敲低MAT2A基因载体,在重组酶作用下,将敲低MAT2A基因的载体共转染至CHO细胞系宿主细胞,获得敲低MAT2A基因表达的CHO细胞系;将包含重组蛋白编码基因的表达载体转染至敲低MAT2A基因表达的CHO细胞系构建得到重组蛋白表达系统。本发明通过沉默/抑制CHO细胞系中MAT2A基因表达,提高周期蛋白依赖性激酶抑制因子p21的基因表达,能够显著提升重组蛋白表达量。
-
公开(公告)号:CN118853686A
公开(公告)日:2024-10-29
申请号:CN202410889174.1
申请日:2024-07-04
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/113
Abstract: 本发明涉及重组蛋白表达及细胞培养技术领域,具体涉及RASSF5基因低表达的细胞系、重组蛋白表达系统、试剂盒、构建方法、应用。本发明通过沉默/抑制CHO细胞RASSF5基因表达,实现对细胞生长性能的调控,提升重组蛋白产量;具体将靶向RASSF5基因的shRNA片段插入整合到piggyBac转座子载体中,构建shRNA转座子载体;通过PBase持续高效催化shRNA转座子载体整合到CHO细胞的基因组中,实现CHO细胞中该基因的持续干扰效果。本发明构建的CHO细胞系能够显著降低RASSF5的mRNA和蛋白表达水平,作为重组蛋白表达用宿主细胞,成倍提升重组蛋白表达量。
-
公开(公告)号:CN118240768A
公开(公告)日:2024-06-25
申请号:CN202410479968.0
申请日:2024-04-22
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明涉及重组蛋白表达及细胞培养技术领域,具体涉及一种表达重组蛋白的细胞系培养用添加剂、培养基、应用。本发明添加剂,其有效成分抑制细胞系表达LSD1和HDAC,具体选用LSD1/HDAC双靶点小分子抑制剂作为添加剂,添加应用在重组蛋白表达细胞系悬浮培养,最大单抗滴度特异性单抗产量成倍增加,最优使用浓度添加下单抗滴度增加2.64±0.28倍,特异性单抗产量增加2.97±0.15倍。本发明添加剂通过显著增加LSD1相关底物H3K4me2以及HDAC相关底物Ac‑H3K9、Ac‑H3K27的蛋白表达水平,从而增加重组单抗的产量,为应用表观调控策略提高重组蛋白的表达提供了一种有效的途径。
-
公开(公告)号:CN113139485A
公开(公告)日:2021-07-20
申请号:CN202110474397.8
申请日:2021-04-29
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明提供了一种基于深度学习的骨髓细胞分类识别方法、装置及系统,属于医学图像处理领域。该方法包括:(1)利用低倍镜获取骨髓涂片的低倍镜全切片图像;(2)将骨髓涂片的低倍镜全切片图像裁剪为高倍镜成像视野大小的多张低倍镜小图;(3)利用训练好的图像分类模型对步骤(2)得到的低倍镜小图进行分类,得到具有良好视野的低倍镜小图;(4)利用高倍镜对具备良好视野的低倍镜小图扫描成像得到相应的高倍镜图像;(5)利用训练好的目标检测模型对步骤(4)得到的高倍镜图像中的骨髓细胞进行分类及计数;(6)根据骨髓细胞的分类及计数结果进行血液疾病预测。能可靠、自动化地实现骨髓细胞的识别分类,能提高血液疾病预测的准确率。
-
公开(公告)号:CN112575031A
公开(公告)日:2021-03-30
申请号:CN201910935156.1
申请日:2019-09-29
Applicant: 新乡医学院
Abstract: 本发明涉及一种遍在染色质开放表达元件、重组表达载体、表达系统及其制备方法、应用,属于生物技术领域。本发明中的遍在染色质开放表达元件(UCOE序列)是在分析人UCOE序列(GenBank accession no.D28877.1)的基础上,删除了HNRPA2B1启动子序列,形成672 bp序列,并发现672 bp序列存在隐蔽拼接位点,将456、494隐蔽拼接位点进行突变设计合成了一种新型的UCOE元件。与天然UCOE序列相比,本发明的UCOE序列在提高哺乳动物细胞转基因表达水平上效果更为显著。
-
公开(公告)号:CN119709864A
公开(公告)日:2025-03-28
申请号:CN202411913965.X
申请日:2024-12-24
Applicant: 新乡医学院 , 常州南京大学高新技术研究院
IPC: C12N15/85 , C12N15/67 , C12N15/64 , C12N15/113 , C12N5/10
Abstract: 本发明提供了Aars1基因在调控外源重组蛋白表达中的应用,属于重组蛋白表达、基因工程及细胞培养技术领域。本发明将靶向Aars1基因的shRNA片段插入整合到piggyBac转座子载体中,构建得到了抑制/沉默Aars1基因的重组载体和Aars1低表达的CHO细胞系,该CHO细胞系能够显著降低Aars1的mRNA表达水平,同时该CHO细胞系作为重组蛋白表达用宿主细胞,相比野生型CHO细胞系,能够提升重组蛋白表达量(重组阿达木单抗表达量增加了3.1±0.18倍),有效的克服了目前CHO细胞表达系统表达水平较低的问题,可用于进一步构建重组蛋白表达系统或试剂盒。
-
公开(公告)号:CN119552877A
公开(公告)日:2025-03-04
申请号:CN202411785925.1
申请日:2024-12-06
Applicant: 新乡医学院
IPC: C12N15/12 , C12N15/113 , C12N15/85 , C12N5/10 , C07K14/765 , C07K16/24
Abstract: 本发明涉及重组蛋白表达及细胞培养技术领域。本发明提供了ANXA1基因作为重组蛋白表达调控靶点的应用以及调控该基因核酸片段、质粒和制备获得的CHO细胞系。本发明通过沉默/抑制CHO细胞ANXA1基因表达,调控细胞增殖能力,提升重组蛋白产量;具体将靶向ANXA1基因的shRNA片段插入整合到piggyBac转座子载体中,构建shRNA转座子载体;通过PBase持续高效催化shRNA转座子载体整合到CHO细胞的基因组中,实现CHO细胞中该基因的持续干扰效果。本发明构建的CHO细胞系能够显著降低ANXA1的mRNA和蛋白表达水平,作为重组蛋白表达用宿主细胞,成倍提升重组蛋白表达量。
-
公开(公告)号:CN117789829A
公开(公告)日:2024-03-29
申请号:CN202311792988.5
申请日:2023-12-25
Abstract: 本发明公开了一种基于去噪扩散模型的启动子活性优化方法,涉及生物信息学技术领域。包括:S1、获取待优化的启动子序列;S2、对启动子序列做二维独热编码预处理;S3、根据S2中获得的二维独热编码基于序列表达预测模型以及全局归因函数获取碱基上不同嘌呤的归因系数;S4、根据S3中碱基上不同嘌呤的归因系数确定待优化位置;S5、基于去噪扩散概率模型对S4中确定的待优化位置进行优化。本发明结合了神经网络可解释性分析,根据不同位置碱基的归因系数高低来精确提取待优化位置,能够有效提高启动子的活性,自动识别并保留原启动子的关键序列特征。
-
-
-
-
-
-
-
-
-