公开(公告)号：CN117568399A

公开(公告)日：2024-02-20

申请号：CN202311305465.3

申请日：2023-10-10

Applicant: 桂林医学院

Inventor： 于鸿浩 ,  付灿 ,  岳鹏鹏 ,  李勇 ,  辜澜涛 ,  杨玲玲

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  A01K67/0276

Abstract: 本发明涉及基于CRISPR‑Cas9系统的Galt基因敲除小鼠模型、构建方法及应用，涉及动物基因工程技术领域，包括如下的步骤：步骤1：设计靶向Galt基因的sgRNA；步骤2：体外转录制备的sgRNA和Cas9mRNA，一起显微注射到小鼠受精卵中，然后移植到代孕母鼠体内，产出F0代，对F0代进行PCR鉴定，将阳性F0代连续繁殖至少2代，筛选获得Galt基因敲除小鼠模型；所述sgRNA1序列如SEQ ID NO:1所示。本发明针对小鼠Galt基因的9号外显子设计了sgRNA，并利用CRISPR‑Cas9系统，成功构建了Galt基因敲除小鼠模型，Galt基因在转录的时候发生移码突变，GALT蛋白无法正确翻译，进而模拟人类经典半乳糖血症，为探索人类经典半乳糖血症的发生和发展机理、发现药物新靶点以及临床前药效学评价等生物医学研究奠定基础。