公开(公告)号：CN110862984B

公开(公告)日：2021-04-06

申请号：CN201911070123.1

申请日：2019-11-05

Applicant: 桂林医学院

Inventor： 岳鹏鹏 ,  于鸿浩 ,  付灿 ,  肖福英 ,  李勇

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明公开了一种特异靶向小鼠Tyr基因的sgRNA导向序列及其应用，属于医学遗传学和分子生物学技术领域。所述sgRNA对应的核苷酸序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3中的任意一种序列。本发明还公开了利用上述的特异靶向小鼠Tyr基因的sgRNA导向序列编辑小鼠Tyr基因的方法。本发明的sgRNA导向序列可以介导Cas9蛋白高效地切割靶点DNA，进而用于编辑小鼠Tyr基因，影响小鼠Tyr基因编码蛋白的功能。本发明的sgRNA导向序列可以通过CRISPR/Cas9系统实现高效打靶，效率均为100％。

公开(公告)号：CN117568400A

公开(公告)日：2024-02-20

申请号：CN202311305645.1

申请日：2023-10-10

Applicant: 桂林医学院

Inventor： 于鸿浩 ,  付灿 ,  岳鹏鹏 ,  辜澜涛 ,  李勇 ,  季子涵

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  A01K67/0275

Abstract: 本发明涉及一种构建I型半乳糖血症(GAL I)基因点突变小鼠模型的方法及应用，涉及动物基因工程技术领域，包括如下步骤：利用CRISPR/Cas9系统对小鼠Galt基因c.847+1G位点进行点突变，进而使所述小鼠的Galt基因c.847+1G位点由碱基G突变为碱基T，得到I型半乳糖血症的基因点突变小鼠模型；所述CRISPR/Cas9系统包括Cas9mRNA、sgRNA和ssODN；所述sgRNA的序列如SEQ ID NO.1所示，所述ssODN的序列如SEQ ID NO.2所示。本发明针对经典半乳糖血症GALT基因的致病位点Galt c.847+1G>T(人类为GALT c.904+1G>T)设计了sgRNA、ssODN，成功构建了Galt c.847+1G>T点突变小鼠，其在转录的时候发生剪接错误，GALT蛋白无法正确翻译，为探索GAL I发生和发展机理、发现药物新靶点以及临床前药效学评价等生物医学研究奠定基础。

公开(公告)号：CN110862982B

公开(公告)日：2021-04-06

申请号：CN201911070099.1

申请日：2019-11-05

Applicant: 桂林医学院

Inventor： 于鸿浩 ,  付灿 ,  岳鹏鹏 ,  李勇 ,  高进涛

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明公开了一种特异靶向小鼠Gaa基因的sgRNA导向序列及其应用，属于医学遗传学和分子生物学技术领域。所述sgRNA对应的核苷酸序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3中的任意一种序列。本发明还公开了利用上述的特异靶向小鼠Gaa基因的sgRNA导向序列编辑小鼠Gaa基因的方法。本发明的sgRNA导向序列可以介导Cas9蛋白高效地切割靶点DNA，进而用于编辑小鼠Gaa基因，影响小鼠Gaa基因编码蛋白的功能。本发明的sgRNA导向序列可以通过CRISPR/Cas9系统实现高效打靶，效率均为100％。

公开(公告)号：CN110777144B

公开(公告)日：2021-04-06

申请号：CN201911070100.0

申请日：2019-11-05

Applicant: 桂林医学院

Inventor： 岳鹏鹏 ,  于鸿浩 ,  付灿 ,  李勇 ,  马海林

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种特异靶向小鼠Krt14基因的sgRNA导向序列及其应用，属于医学遗传学和分子生物学技术领域。所述sgRNA对应的核苷酸序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4中的任意一种序列。本发明还公开了利用上述的特异靶向小鼠Krt14基因的sgRNA导向序列编辑小鼠Krt14基因的方法。本发明的sgRNA导向序列可以介导Cas9蛋白高效地切割靶点DNA，进而用于编辑小鼠Krt14基因，影响小鼠Krt14基因编码蛋白的功能。本发明的sgRNA导向序列可以通过CRISPR/Cas9系统实现高效打靶，效率分别为70％、90％、65％和100％。

公开(公告)号：CN110777144A

公开(公告)日：2020-02-11

申请号：CN201911070100.0

申请日：2019-11-05

Applicant: 桂林医学院

Inventor： 岳鹏鹏 ,  于鸿浩 ,  付灿 ,  李勇 ,  马海林

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种特异靶向小鼠Krt14基因的sgRNA导向序列及其应用，属于医学遗传学和分子生物学技术领域。所述sgRNA对应的核苷酸序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4中的任意一种序列。本发明还公开了利用上述的特异靶向小鼠Krt14基因的sgRNA导向序列编辑小鼠Krt14基因的方法。本发明的sgRNA导向序列可以介导Cas9蛋白高效地切割靶点DNA，进而用于编辑小鼠Krt14基因，影响小鼠Krt14基因编码蛋白的功能。本发明的sgRNA导向序列可以通过CRISPR/Cas9系统实现高效打靶，效率分别为70％、90％、65％和100％。

公开(公告)号：CN110885821B

公开(公告)日：2021-04-02

申请号：CN201911070131.6

申请日：2019-11-05

Applicant: 桂林医学院

Inventor： 于鸿浩 ,  岳鹏鹏 ,  付灿 ,  韦日明 ,  郭俊璠

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明公开了一种特异靶向小鼠Idua基因的sgRNA导向序列及其应用，属于医学遗传学和分子生物学技术领域。所述sgRNA对应的核苷酸序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3中的任意一种序列。本发明还公开了利用上述的特异靶向小鼠Idua基因的sgRNA导向序列编辑小鼠Idua基因的方法。本发明的sgRNA导向序列可以介导Cas9蛋白，高效地切割靶点DNA，进而用于编辑小鼠Idua基因，影响小鼠Idua基因编码蛋白的功能。本发明的sgRNA导向序列可以通过CRISPR/Cas9系统实现高效打靶，效率分别为100％、83.33％和100％。

公开(公告)号：CN110862982A

公开(公告)日：2020-03-06

申请号：CN201911070099.1

申请日：2019-11-05

Applicant: 桂林医学院

Inventor： 于鸿浩 ,  付灿 ,  岳鹏鹏 ,  李勇 ,  高进涛

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12Q1/02

Abstract: 本发明公开了一种特异靶向小鼠Gaa基因的sgRNA导向序列及其应用，属于医学遗传学和分子生物学技术领域。所述sgRNA对应的核苷酸序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.3中的任意一种序列。本发明还公开了利用上述的特异靶向小鼠Gaa基因的sgRNA导向序列编辑小鼠Gaa基因的方法。本发明的sgRNA导向序列可以介导Cas9蛋白高效地切割靶点DNA，进而用于编辑小鼠Gaa基因，影响小鼠Gaa基因编码蛋白的功能。本发明的sgRNA导向序列可以通过CRISPR/Cas9系统实现高效打靶，效率均为100％。

公开(公告)号：CN117568399A

公开(公告)日：2024-02-20

申请号：CN202311305465.3

申请日：2023-10-10

Applicant: 桂林医学院

Inventor： 于鸿浩 ,  付灿 ,  岳鹏鹏 ,  李勇 ,  辜澜涛 ,  杨玲玲

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  A01K67/0276

Abstract: 本发明涉及基于CRISPR‑Cas9系统的Galt基因敲除小鼠模型、构建方法及应用，涉及动物基因工程技术领域，包括如下的步骤：步骤1：设计靶向Galt基因的sgRNA；步骤2：体外转录制备的sgRNA和Cas9mRNA，一起显微注射到小鼠受精卵中，然后移植到代孕母鼠体内，产出F0代，对F0代进行PCR鉴定，将阳性F0代连续繁殖至少2代，筛选获得Galt基因敲除小鼠模型；所述sgRNA1序列如SEQ ID NO:1所示。本发明针对小鼠Galt基因的9号外显子设计了sgRNA，并利用CRISPR‑Cas9系统，成功构建了Galt基因敲除小鼠模型，Galt基因在转录的时候发生移码突变，GALT蛋白无法正确翻译，进而模拟人类经典半乳糖血症，为探索人类经典半乳糖血症的发生和发展机理、发现药物新靶点以及临床前药效学评价等生物医学研究奠定基础。

公开(公告)号：CN110878301B

公开(公告)日：2021-04-06

申请号：CN201911070458.3

申请日：2019-11-05

Applicant: 桂林医学院

Inventor： 付灿 ,  于鸿浩 ,  岳鹏鹏 ,  李勇 ,  农月娟

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N9/22 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了一种特异靶向小鼠G6pc基因的sgRNA导向序列及其应用，属于医学遗传学和分子生物学技术领域。所述sgRNA对应的核苷酸序列含有SEQ ID NO.2所示序列，本发明还公开了利用上述的特异靶向小鼠G6pc基因的sgRNA导向序列编辑小鼠G6pc基因的方法。本发明的sgRNA导向序列可以介导Cas9蛋白，高效地切割靶点DNA，进而用于编辑小鼠G6pc基因，影响小鼠G6pc基因编码蛋白的功能。该sgRNA导向序列可以通过CRISPR/Cas9系统实现高效打靶，效率为100％。

公开(公告)号：CN110878301A

公开(公告)日：2020-03-13

申请号：CN201911070458.3

申请日：2019-11-05

Applicant: 桂林医学院

Inventor： 付灿 ,  于鸿浩 ,  岳鹏鹏 ,  李勇 ,  农月娟

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N9/22 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了一种特异靶向小鼠G6pc基因的sgRNA导向序列及其应用，属于医学遗传学和分子生物学技术领域。所述sgRNA对应的核苷酸序列含有SEQ ID NO.2所示序列，本发明还公开了利用上述的特异靶向小鼠G6pc基因的sgRNA导向序列编辑小鼠G6pc基因的方法。本发明的sgRNA导向序列可以介导Cas9蛋白，高效地切割靶点DNA，进而用于编辑小鼠G6pc基因，影响小鼠G6pc基因编码蛋白的功能。该sgRNA导向序列可以通过CRISPR/Cas9系统实现高效打靶，效率为100％。