公开(公告)号：CN118562847A

公开(公告)日：2024-08-30

申请号：CN202410728821.0

申请日：2024-06-06

Applicant: 滨州医学院

Inventor： 王国丽 ,  安天悦 ,  范本贵 ,  李明凯 ,  李德芳 ,  郑秋生 ,  曹鹤鹏 ,  林智善

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/66 ,  C12N15/54 ,  C12N1/19 ,  C12N15/31 ,  C12N15/62 ,  C12P5/00 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明属于合成生物学技术领域，公开了一种提高酵母长叶烯产量的方法及其应用，本发明构建高产长叶烯的菌株为LF06；所述菌株LF06以酿酒酵母CEN.PK2‑1C为出发菌株，通过异源引入EfMvaE和突变体EfMvaS(A110G)，同时过表达ERG8、ERG12、ERG19、IDI1，通过引入突变体基因ERG20(F96W‑N127W)，同时抑制酵母内源性基因ERG9的表达，在此基础上异源引入PCIF1基因，最后通过linker将PsLS与ERG20连接构建融合蛋白，并连接载体转入酵母获得高产长叶烯的菌株；本发明中基于过表达PCIF1提高酵母长叶烯产量的代谢工程新方法效果显著。

公开(公告)号：CN114958637B

公开(公告)日：2024-03-08

申请号：CN202210526239.7

申请日：2022-05-16

Applicant: 滨州医学院 ,  烟台毓璜顶医院

Inventor： 李德芳 ,  安天悦 ,  王国丽 ,  林春华 ,  李明凯 ,  武振科 ,  郑秋生

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/53 ,  C12N15/60 ,  C12N15/54 ,  C12N15/81 ,  C12P7/02 ,  C12R1/865

公开(公告)号：CN116479032A

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN202310598534.8

申请日：2023-05-25

Applicant: 滨州医学院

Inventor： 王国丽 ,  李德芳 ,  安天悦 ,  李明凯 ,  梁希芹 ,  马梦雨 ,  武振科 ,  高宇航 ,  郑秋生

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/54 ,  C12N15/55 ,  C12N15/62 ,  C12P19/30 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明属于微生物制备技术领域，公开了一种长寿酶的生物制备方法，利用GSGlinker将PNC1和NPT1基因连接，构建融合基因PNC1‑NPT1；将融合蛋白基因PNC1‑NPT1与线性化载体连接后构建到pESC‑URA的第一个多克隆位点，获得载体pESC‑URA‑PNC1‑NPT1；将载体pESC‑URA‑PNC1‑NPT1转化酿酒酵母菌株BY4741，利用酵母缺陷型培养基SD‑URA筛选培养，得到酿酒酵母工程菌菌株NM01；将酿酒酵母工程菌菌株NM01进行发酵，并外源添加烟酰胺，继续发酵得到长寿酶NMN。本发明基于过表达PNC1和NPT1融合基因催化酵母长寿酶生物合成的新方法效果显著。

公开(公告)号：CN114854751A

公开(公告)日：2022-08-05

申请号：CN202210527238.4

申请日：2022-05-16

Applicant: 滨州医学院

Inventor： 安天悦 ,  李德芳 ,  王国丽 ,  武振科 ,  李明凯 ,  郑秋生

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/12 ,  C12N15/81 ,  C12N15/66 ,  C12N1/19 ,  C12P7/04 ,  C12P5/02 ,  C12R1/865

Abstract: 本申请适用于微生物技术领域，提供了代谢工程方法、产角鲨烯工程菌、产橙花叔醇工程菌及其构建方法、应用。所述代谢工程方法为过表达长非编码RNA PCGEM1和原癌基因c‑Myc，可有效促进酿酒酵母工程菌三萜化合物角鲨烯和倍半萜化合物橙花叔醇的产量。

公开(公告)号：CN118308399A

公开(公告)日：2024-07-09

申请号：CN202410451383.8

申请日：2024-04-16

Applicant: 滨州医学院

Inventor： 安天悦 ,  王国丽 ,  李德芳 ,  李明凯 ,  马梦雨 ,  范本贵 ,  李佳容 ,  郑秋生

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/63 ,  C12N15/65 ,  C12P7/6431 ,  C12P7/6409 ,  C12N15/53 ,  C12N15/55 ,  C12N15/31 ,  C12N15/52 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明属于微生物技术领域，公开了一种提高酵母游离脂肪酸产量的方法及其应用。所构建高产油酸和亚油酸的菌株分别为L03和L05；所述菌株L03以酿酒酵母BY4741为出发菌株，敲除FAA4和FAA1基因，过表达TGL1、TGL3、TGL5基因，其中TGL1基因整合到FAA4基因位点，TGL3和TGL5基因整合到FAA1基因位点；所述菌株L05以酿酒酵母L03为出发菌株，将PfFAD2基因与组成型启动子TEF1p和终止子CYC1t重叠，整合到NDT80位点。本发明中基于过表达MDM1提高酵母亚油酸产量的代谢工程新方法效果显著。

公开(公告)号：CN116640784A

公开(公告)日：2023-08-25

申请号：CN202310602993.9

申请日：2023-05-26

Applicant: 滨州医学院

Inventor： 王国丽 ,  李德芳 ,  安天悦 ,  洪盼 ,  李明凯 ,  马梦雨 ,  高豪男 ,  郑秋生

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/02 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12N15/10 ,  C12P7/6431 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明属于分子生物学和代谢工程技术领域，公开了一种亚油酸合酶基因、克隆方法及其应用，亚油酸合酶基因FAD2的核苷酸序列为SEQ ID NO.1，基因FAD2编码蛋白质的氨基酸残基序列为SEQ ID NO.2。生物合成亚油酸的酿酒酵母工程菌株的构建方法包括：以酿酒酵母为出发菌株，敲除FAA4和FAA1基因，过表达TGL1、TGL3、TGL5和FAD2基因；TGL1基因整合到FAA4基因位点；TGL3和TGL5基因整合到FAA1基因位点；FAD2基因与组成型启动子TEF1p和终止子CYC1t重叠，整合到NDT80位点。本发明基于过表达亚油酸合酶基因FAD2提高酵母亚油酸产量的代谢工程方法效果显著。

公开(公告)号：CN114958637A

公开(公告)日：2022-08-30

申请号：CN202210526239.7

申请日：2022-05-16

Applicant: 滨州医学院 ,  烟台毓璜顶医院

Inventor： 李德芳 ,  安天悦 ,  王国丽 ,  林春华 ,  李明凯 ,  武振科 ,  郑秋生

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/53 ,  C12N15/60 ,  C12N15/54 ,  C12N15/81 ,  C12P7/02 ,  C12R1/865

Abstract: 本申请适用于微生物技术领域，提供了一种产β‑桉叶醇工程菌及其构建方法、应用。所述产β‑桉叶醇工程菌以酿酒酵母为出发菌株，过表达tHMGR、UPC2‑1、ASG1和ZSS2基因，敲低ERG9基因；其中，tHMGR和UPC2‑1基因整合到酿酒酵母染色体TY3位点；ERG9基因的启动子替换为半乳糖抑制型启动子HXT1p；ASG1基因的启动子替换为组成型强启动子GAL1p；ZSS2基因整合到酿酒酵母染色体的TY1位点。将本申请提供的产β‑桉叶醇工程菌经活化后接种到发酵培养基中进行发酵培养，可得到高产量的β‑桉叶醇，实现利用合成生物学的手段高产量制备β‑桉叶醇的方法。

公开(公告)号：CN114774299A

公开(公告)日：2022-07-22

申请号：CN202210527268.5

申请日：2022-05-16

Applicant: 滨州医学院 ,  烟台毓璜顶医院

Inventor： 李德芳 ,  安天悦 ,  王国丽 ,  林春华 ,  李明凯 ,  武振科 ,  郑秋生

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/31 ,  C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  C12N15/81 ,  C12P33/00 ,  C12R1/865

Abstract: 本申请适用于微生物技术领域，提供了一种代谢工程方法、产羊毛甾醇工程菌及其构建方法、应用。其中，所述基于m6A甲基转移酶IME4的代谢工程方法，包括：将酵母内源性IME4基因的启动子替换为组成型启动子PGK1p。本申请提供的基于酿酒酵母m6A甲基转移酶IME4的代谢工程方法，可有效促进单倍体酿酒酵母工程菌羊毛甾醇产量。