公开(公告)号：KR101325322B1

公开(公告)日：2013-11-08

申请号：KR1020110072455

申请日：2011-07-21

Applicant: 가톨릭대학교 산학협력단

Inventor： 김동욱 ,  고현경

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/62 ,  C12Q1/68

Abstract: 본 발명은 BCR-BCR-ABL 융합 유전자를 포함한 정량분석용 표준 플라스미드 및 이를 이용한 BCR-ABL 유전자의 정량분석 방법에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 서열번호 7로 표시되는 BCR-BCR-ABL 유전자의 염기서열을 포함하는 백혈병의 예측 또는 진단을 위한 정량분석용 표준 플라스미드 및 상기 표준 플라스미드를 이용하여 시료에 존재하는 BCR-ABL의 발현양을 정량 분석하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 상기 백혈병의 예측 또는 진단을 위한 정량분석용 표준 플라스미드는 백혈병 특이 유전자인 BCR-ABL 및 모든 세포내에서 비교적 안정적으로 일정량 발현되는 BCR 유전자가 융합된 BCR-BCR-ABL가 도입되어 있어, 하나의 플라스미드에 2개의 표준물질이 함께 포함되어 있기 때문에 PCR을 통한 백혈병 진단시 상기 플라스미드를 표준정량곡선 산출을 위한 용도로 사용할 경우, 기존 PCR 방법에 비해 시료에 존재하는 BCR-ABL의 발현양을 간편하고 정확하게 측정할 수 있는 효과가 있다.

公开(公告)号：KR1020120010184A

公开(公告)日：2012-02-02

申请号：KR1020110072454

申请日：2011-07-21

Applicant: 가톨릭대학교 산학협력단

Inventor： 김동욱 ,  고현경

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/62 ,  C12Q1/68

CPC classification number: C12N15/63 ,  C12N15/62 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/6886 ,  C12Q2600/118

Abstract: PURPOSE: A standard plasmid containing GUS-BCR-ABL fusion gene for quantitative analysis is provided to simply and accurately measure BCR-ABL expression level in a sample. CONSTITUTION: A standard plasmid for quantitative analysis for predicting or diagnosing leukemia contains a base sequence of GUS-BCR-ABL of sequence number 7. The plasmid is pGUS-BCR-ABL. A method for quantitative analysis of BCR-ABL expression level in a sample using the standard plasmid comprises: a step of diluting the standard plasmid by concentration; a step of performing PCR of the standard plasmid and nucleic acids prepared from a biological sample using PCR primer set which is specific to BCR-ABL and GUS gene; a step of measuring PCR product using the standard plasmid and calculating standard quantitative curve; and a step of calculating expression level of BCR-ABL and GUS of the sample.

Abstract translation: 目的：提供含有用于定量分析的GUS-BCR-ABL融合基因的标准质粒，简单而准确地测量样品中的BCR-ABL表达水平。 构成：用于预测或诊断白血病的定量分析的标准质粒含有序列号7的GUS-BCR-ABL的碱基序列。质粒是pGUS-BCR-ABL。 使用标准质粒定量分析样品中BCR-ABL表达水平的方法包括：通过浓缩稀释标准质粒的步骤; 使用对BCR-ABL和GUS基因特异的PCR引物组进行标准质粒和由生物样品制备的核酸的PCR的步骤; 使用标准质粒测定PCR产物并计算标准定量曲线的步骤; 以及计算样品的BCR-ABL和GUS的表达水平的步骤。

公开(公告)号：KR101365810B1

公开(公告)日：2014-02-20

申请号：KR1020110072454

申请日：2011-07-21

Applicant: 가톨릭대학교 산학협력단

Inventor： 김동욱 ,  고현경

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/62 ,  C12Q1/68

Abstract: 본 발명은 GUS-BCR-ABL 융합 유전자를 포함한 정량분석용 표준 플라스미드 및 이를 이용한 BCR-ABL 유전자의 정량분석 방법에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 서열번호 7로 표시되는 GUS-BCR-ABL 유전자의 염기서열을 포함하는 백혈병의 예측 또는 진단을 위한 정량분석용 표준 플라스미드 및 상기 표준 플라스미드를 이용하여 시료에 존재하는 BCR-ABL의 발현양을 정량 분석하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 상기 백혈병의 예측 또는 진단을 위한 정량분석용 표준 플라스미드는 백혈병 특이 유전자인 BCR-ABL 및 모든 세포내에서 비교적 안정적으로 일정량 발현되는 GUS 유전자가 융합된 GUS-BCR-ABL가 도입되어 있어, 하나의 플라스미드에 2개의 표준물질이 함께 포함되어 있기 때문에 PCR을 통한 백혈병 진단시 상기 플라스미드를 표준정량곡선 산출을 위한 용도로 사용할 경우, 기존 PCR 방법에 비해 시료에 존재하는 BCR-ABL의 발현양을 간편하고 정확하게 측정할 수 있는 효과가 있다.

公开(公告)号：KR1020120015422A

公开(公告)日：2012-02-21

申请号：KR1020110072455

申请日：2011-07-21

Applicant: 가톨릭대학교 산학협력단

Inventor： 김동욱 ,  고현경

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/62 ,  C12Q1/68

CPC classification number: C12N15/63 ,  C12N15/62 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/6886 ,  C12Q2600/118

Abstract: PURPOSE: A standard plasmid for quantitative analsis, containing BCR-BCR-ABL fusion gene is provided to simply and accurately measure BCR-ABL expression level in a test sample. CONSTITUTION: A standard plasmid for quantitative analysis for predicting or diagnosing leukemia contains a base sequence of BCR-BCR-ABL gene of sequence number 7. The plasmid is pBCR-BCR-ABL. A method for quantitation of BCR-ABL expression level in a test sample using the standard plasmid comprises: a step of diluting the standard plasmid by concentration; a step of performing PCR of the standard plasmid and a nucleic acid from the sample using specific PCR primer set; and a step of measuring PCR production amount to obtain standard quantitative curve.

Abstract translation: 目的：提供含有BCR-BCR-ABL融合基因的定量麻醉标准质粒，简便准确测定样本中的BCR-ABL表达水平。 构成：用于预测或诊断白血病的定量分析的标准质粒含有序列号7的BCR-BCR-ABL基因的碱基序列。质粒是pBCR-BCR-ABL。 使用标准质粒定量测试样品中BCR-ABL表达水平的方法包括：通过浓缩稀释标准质粒的步骤; 使用特异性PCR引物对来自样品的标准质粒和核酸进行PCR的步骤; 并测定PCR产生量以获得标准定量曲线的步骤。

公开(公告)号：KR100894511B1

公开(公告)日：2009-04-24

申请号：KR1020060070818

申请日：2006-07-27

Applicant: 가톨릭대학교 산학협력단

Inventor： 윤정호 ,  김영준 ,  김성한 ,  이우진 ,  김자은 ,  이한용 ,  유창혁 ,  김동욱 ,  고현경

IPC: C12Q1/68 ,  G01N33/53

Abstract: 본 발명은 기존의 다단계 RT-PCR 방법을 사용한 만성골수성백혈병(Chronic Myeloid Leukemia) 진단 방법을 개선하여, 단 한 번의 다중 RT-PCR (multiplex RT-PCR) 을 통해 만성골수성백혈병을 진단할 수 있는 프라이머를 포함하는 조성물 및 이 조성물을 함유하는 키트에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 키트를 사용하여 만성골수성백혈병 진단하는 지표가 될 수 있는 BCR-ABL 유전자의 증폭 방법에 관한 것이다.
만성골수성백혈병, 다중 RT-PCR, BCR-ABL

公开(公告)号：KR1020080010597A

公开(公告)日：2008-01-31

申请号：KR1020060070818

申请日：2006-07-27

Applicant: 가톨릭대학교 산학협력단

Inventor： 윤정호 ,  김영준 ,  김성한 ,  이우진 ,  김자은 ,  이한용 ,  유창혁 ,  김동욱 ,  고현경

IPC: C12Q1/68 ,  G01N33/53

CPC classification number: C12Q1/6858 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2521/107 ,  C12Q2537/143

Abstract: Multiplex RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction) primers are provided to screen BCR(breakpoint cluster region)-ABL fusion genes required for diagnosis of chronic myeloid leukemia, detect breakpoints and transcript frequency of various types of BCR-ABL genes without cell genetic analysis and reduce detection time. Oligonucleotide primers for amplifying BCR-ABL fusion genes comprise the nucleotide sequence of SEQ ID NO:1 and SEQ ID NO:9 for sense primer, and SEQ ID NO:2 for antisense primer. A composition for amplifying BCR-ABL fusion genes comprises the oligonucleotide primers of SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2 and SEQ ID NO:9, and a multiplex RT-PCR amplification mixture containing reaction buffer, deoxynucleotide, Taq-polymerase and reverse transcriptase. A diagnostic kit of BCR-ABL fusion genes comprises the composition for amplifying BCR-ABL fusion genes and cDNA of standard BCR-ABL fusion protein. A method for amplifying BCR-ABL fusion genes comprises the steps of: (1) obtaining mRNA(messenger RNA) from a biological sample; and (2) performing multiplex RT-PCR of the mRNA by using the oligonucleotide primers of SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2 and SEQ ID NO:9.

Abstract translation: 提供多重RT-PCR（逆转录 - 聚合酶链式反应）引物，筛选诊断慢性粒细胞白血病所需的BCR（断点簇区）-ABL融合基因，检测各种BCR-ABL基因无细胞的断裂点和转录本频率 遗传分析，缩短检测时间。 用于扩增BCR-ABL融合基因的寡核苷酸引物包含用于正义引物的SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：9的核苷酸序列，反义引物的SEQ ID NO：2。 用于扩增BCR-ABL融合基因的组合物包含SEQ ID NO：1，SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：9的寡核苷酸引物，以及含有反应缓冲液，脱氧核苷酸，Taq聚合酶和 逆转录酶。 BCR-ABL融合基因的诊断试剂盒包括用于扩增BCR-ABL融合基因的组合物和标准BCR-ABL融合蛋白的cDNA。 扩增BCR-ABL融合基因的方法包括以下步骤：（1）从生物样品获得mRNA（信使RNA）; 和（2）通过使用SEQ ID NO：1，SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：9的寡核苷酸引物进行mRNA的多重RT-PCR。