Abstract:
Multiplex RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain reaction) primers are provided to screen BCR(breakpoint cluster region)-ABL fusion genes required for diagnosis of chronic myeloid leukemia, detect breakpoints and transcript frequency of various types of BCR-ABL genes without cell genetic analysis and reduce detection time. Oligonucleotide primers for amplifying BCR-ABL fusion genes comprise the nucleotide sequence of SEQ ID NO:1 and SEQ ID NO:9 for sense primer, and SEQ ID NO:2 for antisense primer. A composition for amplifying BCR-ABL fusion genes comprises the oligonucleotide primers of SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2 and SEQ ID NO:9, and a multiplex RT-PCR amplification mixture containing reaction buffer, deoxynucleotide, Taq-polymerase and reverse transcriptase. A diagnostic kit of BCR-ABL fusion genes comprises the composition for amplifying BCR-ABL fusion genes and cDNA of standard BCR-ABL fusion protein. A method for amplifying BCR-ABL fusion genes comprises the steps of: (1) obtaining mRNA(messenger RNA) from a biological sample; and (2) performing multiplex RT-PCR of the mRNA by using the oligonucleotide primers of SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2 and SEQ ID NO:9.
Abstract translation:提供多重RT-PCR(逆转录 - 聚合酶链式反应)引物,筛选诊断慢性粒细胞白血病所需的BCR(断点簇区)-ABL融合基因,检测各种BCR-ABL基因无细胞的断裂点和转录本频率 遗传分析,缩短检测时间。 用于扩增BCR-ABL融合基因的寡核苷酸引物包含用于正义引物的SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:9的核苷酸序列,反义引物的SEQ ID NO:2。 用于扩增BCR-ABL融合基因的组合物包含SEQ ID NO:1,SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:9的寡核苷酸引物,以及含有反应缓冲液,脱氧核苷酸,Taq聚合酶和 逆转录酶。 BCR-ABL融合基因的诊断试剂盒包括用于扩增BCR-ABL融合基因的组合物和标准BCR-ABL融合蛋白的cDNA。 扩增BCR-ABL融合基因的方法包括以下步骤:(1)从生物样品获得mRNA(信使RNA); 和(2)通过使用SEQ ID NO:1,SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:9的寡核苷酸引物进行mRNA的多重RT-PCR。
Abstract:
본 발명은 기존의 다단계 RT-PCR 방법을 사용한 만성골수성백혈병(Chronic Myeloid Leukemia) 진단 방법을 개선하여, 단 한 번의 다중 RT-PCR (multiplex RT-PCR) 을 통해 만성골수성백혈병을 진단할 수 있는 프라이머를 포함하는 조성물 및 이 조성물을 함유하는 키트에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 상기 키트를 사용하여 만성골수성백혈병 진단하는 지표가 될 수 있는 BCR-ABL 유전자의 증폭 방법에 관한 것이다. 만성골수성백혈병, 다중 RT-PCR, BCR-ABL