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公开(公告)号：KR101528812B1
公开(公告)日：2015-06-15
申请号：KR1020140124197
申请日：2014-09-18
Applicant: 강원대학교산학협력단
Abstract: TALEN은특정유전자를표적하여녹아웃시킬수 있는새로운개념의유전자클로닝이다. TALEN 플라스미드에는 DNA 결합도메인과 Fok1 절단효소기능이융합되어있기때문에, 게놈 DNA의어느부위라도결합할수 있고, 표적염기서열을절단하여유전자돌연변이를유도할수 있다. 본발명자들은 SETDB1 HMTase 유전자의단백질개시코돈과프로모터 -25 상류부위를표적하는 2종의 TALEN 구조물을제작하였다. 이를위하여두 단계의클로닝을진행하였다. 첫번째는모듈벡터에서 pFUS 배열벡터로표적서열을옮기고, 콜로니 PCR을통해얼룩진밴드와 Esp1 제한효소를이용하여약 1kb의삽입물이들어있음을확인하였다. 두번째는배열벡터로부터 TALEN 발현벡터로옮기는과정을진행하였으며, 염기서열분석을통해확인하였다. 그결과, 최초의고안된모듈벡터서열들이약 100 bp 간격으로배열되어있음을확인하였다. 제작된 TALEN-DBEX2 구조물은트랜스펙션을통해 SETDB1의발현이사라지는것을확인하였고, T7E1 분석을통하여표적부위에서돌연변이가발생하였음을확인하였다. 한편, TALEN-DBPR25 트랜스펙션을통해서도 SETDB1 발현이감소하는현상을확인할수 있었다.
Abstract translation: 提供了一种抑制SET结构域，分叉1（SETDB1）组蛋白甲基转移酶（HMTase）表达的方法，构建了一种用于敲出编码H3K9me3 HMTase的SETDB1基因的最佳转录激活子样效应核酸酶（TALEN）。 TALEN是一种能够靶向特定基因并敲除相同基因的新概念基因克隆。 TALEN质粒可以连接到基因组DNA的任何位点，并通过剪切靶基因序列诱导基因突变，因为DNA结合域和Fok1切割酶功能融合在TALEN质粒中。 因此，本发明的发明人已经制造了两种TALEN结构。 其中之一是靶向SETDB1 HMTase基因的蛋白质起始密码子的TALEN结构，另一种是靶向启动子的-25上游位点的结构。 为了制造这两种结构，通过两个步骤进行克隆过程。 在第一步中，将靶序列从模块载体移动到Pfus排列载体，通过使用染色带和Esp1限制酶的菌落PCR证实存在约1kb的插入片段。 在第二步中，靶序列从阵列向量移动到TALEN表达载体，通过碱基序列分析证实。 因此，证实了最初发明的模块向量以大约100bp的间隔排列。 此外，证实了通过转染消除SET DB1的表达，并且在制备的TALEN-DBC2结构中通过T7E1的分析在靶位点产生突变。 另一方面，也证实了通过转染降低SET DB1的表达。 抑制SETDB1 HMTase表达的方法包括（a）选择SETDB1基因的一个位点，具体地，存在于SETDB1基因的轴突2中的蛋白质起始密码子和用于合成SETDB1的转移起始位点的-25上游位点之间 mRNA作为表达抑制靶标; （b）将SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2从模块载体移动到pFUS阵列载体中作为靶序列，其靶向SETDB 1基因或SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：3的轴突2中的蛋白质密码子 ID NO：4从模块载体到作为靶序列的pFUS阵列，其靶向用于合成SETDB1 mRNA的转移起始位点的-25上游位点; （c）通过将目标序列从经过（b）步骤的阵列向量移动到TALEN表达载体来制造TALEN-DBEX2结构和TALEN-DBPR25结构; 和（d）将细胞转染到通过步骤（c）制造的TALEN-DBEX2结构和TALEN-DBPR25结构中的一种结构。
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公开(公告)号：KR1020170087692A
公开(公告)日：2017-07-31
申请号：KR1020160007575
申请日：2016-01-21
Applicant: 강원대학교산학협력단
IPC: G01N33/574 , C12Q1/68 , C12N15/113
Abstract: 본발명은종양환자에대해선별적인항암화학요법을시행하기위한항암제내성진단용바이오마커및 이를이용한항암제내성진단용킷트에관한것이다. 다양한유전자발현변화를조사하기위해총 24,331종의유전자들을대상으로독소루비신, 탁솔, siSETDB1에의해발현이증가한유전자를분석하였다. 독소루비신, 탁솔, siSETDB1에의해서공통으로상향조절된유전자를분석한결과, 222종의유전자가독소루비신과탁솔처리군에서공통적으로발현이증가하였으며, 탁솔과 siSETDB1은 15종의유전자가공통, 독소루비신과 siSETDB1은 24종의유전자가공통이었다. 특히, 독소루비신, 탁솔및 siSETDB1 간에공통적으로발현이증가한유전자는모두 9종이며, 이중에는 FosB, Jun 등과같은발암 AP-1 구성요소들이포함되어있었다.
Abstract translation: 本发明涉及一种抗癌药物有抗性的癌症诊断生物标志物和诊断试剂盒使用相同的免疫力来实现对癌症患者的化疗选择性。 靶基因的基因表达增加的由总共24331种多柔比星，紫杉醇，siSETDB1的分析，以研究各种基因表达变化。 阿霉素，紫杉醇，有人分析常见的siSETDB1上调的基因，它的基因222增加阿霉素和紫杉醇治疗组共同表达，紫杉醇和siSETDB1是常见，多柔比星和siSETDB1的15个基因 共有24个基因。 特别是，通用于多柔比星，紫杉醇和siSETDB1之间所有九个种基因的表达增加，有包含一个双致癌物AP-1组分如FOSB，六月。
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公开(公告)号：KR101875462B1
公开(公告)日：2018-07-06
申请号：KR1020160182160
申请日：2016-12-29
Applicant: 강원대학교산학협력단
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6886 , C12Q2600/118 , C12Q2600/158
Abstract: 해결하려는과제: 항암제내성예측용바이오마커및 예측방법을제공하려는것. 과제해결수단: FosB 프로모터의특정부위의발현정도를측정하여발현이증가하는경우항암제내성가능성을판단할수 있다.
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公开(公告)号：KR1020170124830A
公开(公告)日：2017-11-13
申请号：KR1020160054750
申请日：2016-05-03
Applicant: 강원대학교산학협력단
IPC: A61K36/605 , A23L1/30
Abstract: 과제 : 부작용없이지방세포생성을억제하는항비만조성물의제공을목적으로한다. 해결수단 : 본발명은꾸지뽕잎을준비하는단계; 상기꾸지뽕잎을추출하는단계; 상기추출한꾸지뽕잎 추출물을여과하는단계; 상기여과한꾸지뽕잎 추출물을진공농축하는단계; 상기진공농축한꾸지뽕잎 추출물을분무건조하는단계;를포함하는것을특징으로하는꾸지뽕잎 추출물을포함하는항비만약학조성물에관한것이다. 꾸지뽕잎 추출물은투여량의존적으로지방세포의지방축적을저해하였고, 세포에꾸지뽕잎 추출물을처리한경우지방세포생성의주요마커인 PPARγ발현이미처리대조군과비교할때 현저히감소하였다.
Abstract translation: 本发明的一个目的是提供抑制脂肪细胞产生而没有副作用的抗肥胖组合物。 解决问题的手段： 提取黄花鱼叶; 过滤提取的黄瓜叶提取物; 将过滤的黄瓜叶提取物真空浓缩; 并喷雾干燥真空浓缩雪松叶提取物。本发明还涉及包含该提取物的抗肥胖药物组合物。 Kkujippong叶萃取物显著相比减少的剂量依赖性抑制因为是由脂肪细胞的局部积累，PPARγ表达的主要的标记已经在kkujippong叶提取物处理的处理过的脂肪细胞hangyeongwoo生成的控制单元。
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