公开(公告)号：KR100445161B1

公开(公告)日：2004-08-21

申请号：KR1020010031954

申请日：2001-06-08

Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)

Inventor： 황재삼 ,  구태원 ,  윤은영 ,  강석우 ,  김근영 ,  서동상 ,  이진성 ,  이상몽 ,  진병래 ,  김용성

IPC: C12N15/12

Abstract: PURPOSE: Provided are a nucleotide sequence and a putative amino acid sequence containing a fibroin gene isolated from Antheraea yamamai and its promoter, thereby producing transformed silkworms capable of producing raw silk-thread of Antheraea yamamai. CONSTITUTION: The nucleotide sequence containing a fibroin gene isolated from Antheraea yamamai and its promoter is represented by SEQ ID NO: 1. The amino acid sequence encoded by the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1 containing a fibroin gene isolated from Antheraea yamamai and its promoter is represented by SEQ ID NO: 2. A nucleotide sequence of the fibroin gene isolated from Antheraea yamamai comprises from nucleotide 1,672 to nucleotide 9,789 of SEQ ID NO: 1. A nucleotide sequence of the promoter of the fibroin gene of Antheraea yamamai comprises from nucleotide 641 to nucleotide 1,671 of SEQ ID NO: 1.

Abstract translation: 目的：提供一种含有从Antheraea yamamai及其启动子分离的丝心蛋白基因的核苷酸序列和推定的氨基酸序列，由此产生能够产生Antheraea yamamai的生丝线的转化的蚕。 构成：含有从Antheraea yamamai分离的丝心蛋白基因及其启动子的核苷酸序列由SEQ ID NO：1表示。由含有从Antheraea yamamai分离的丝心蛋白基因的核苷酸序列SEQ ID NO：1编码的氨基酸序列及其 由Antheraea yamamai分离的丝心蛋白基因的核苷酸序列包含SEQ ID NO：1的核苷酸1,672至核苷酸9,789。Antheraea yamamai的丝心蛋白基因的启动子的核苷酸序列包含SEQ ID NO： SEQ ID NO：1的核苷酸641至核苷酸1,671。

公开(公告)号：KR1020010074351A

公开(公告)日：2001-08-04

申请号：KR1020000003378

申请日：2000-01-25

Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)

Inventor： 김근영 ,  진병래 ,  강석우 ,  윤은영 ,  황재삼 ,  조은숙

IPC: C12N15/63

CPC classification number: C12N15/866 ,  C12N2511/00

Abstract: PURPOSE: An expression vector for transforming an insect cell line is provided which has high expression efficiency and is thus used in mass-producing a foreign gene product. And an insect cell line transformant is also provided, which introduces the vector and produces antibacterial protein, Nuecin. CONSTITUTION: The expression vector pAcIE1-Neo-hsp consists of Baculovirus AcNPV IE1 promoter-neomycin resistant gene-Drosophila heat shock protein promoter-foreign gene inserting site(restriction enzyme EcoRV)-SV40 poly(A)-IE1 structural gene. The expression vector pAcIE1-Neo-hsp is constructed by: inserting neomycin resistant gene under the control of IE1 gene promoter of insect Baculovirus AcNPV; introducing a strong Drosophila heat shock protein promoter; placing a foreign gene inserting site, EcoRV site under the control of the promoter; and inserting animal virus, SV40 poly(A) site for the termination of transcription. The expression vector pAcIE1-Neo-hsp-Nuecin is constructed by inserting Nuecin cDNA gene into foreign gene inserting site, EcoRV site of pAcIE1-Neo-hsp.

Abstract translation: 目的：提供用于转化昆虫细胞系的表达载体，其具有高表达效率，因此用于批量生产外源基因产物。 还提供了一种昆虫细胞系转化体，其引入载体并产生抗菌蛋白质Nuecin。 构成：表达载体pAcIE1-Neo-hsp由杆状病毒AcNPV IE1启动子 - 新霉素抗性基因 - 果蝇热休克蛋白启动子 - 外源基因插入位点（限制酶EcoRV）-SV40聚（A）-IE1结构基因组成。 构建表达载体pAcIE1-Neo-hsp：将新霉素抗性基因插入昆虫杆状病毒AcNPV的IE1基因启动子控制下; 引入强果蝇热休克蛋白启动子; 将外源基因插入位点，EcoRV位点置于启动子的控制下; 并插入动物病毒，SV40 poly（A）位点终止转录。 通过将Nuecin cDNA基因插入外源基因插入位点，pAcIE1-Neo-hsp的EcoRV位点构建表达载体pAcIE1-Neo-hsp-Nuecin。

公开(公告)号：KR100270928B1

公开(公告)日：2001-02-01

申请号：KR1019980019951

申请日：1998-05-30

Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)

Inventor： 강석우 ,  윤은영 ,  진병래 ,  김상현 ,  김근영 ,  김호락 ,  강석권

IPC: C12N15/33 ,  C12N15/63

Abstract: PURPOSE: Provided are transitional vector, pBm10 using p10 gene of Bombyx mori nucleocapside polyhedron virus VB2(KCTC8873P), which is useful for mass-producing materials useful in both biotechnology and insect biotechnology, and a method for preparation of the vector. CONSTITUTION: The transitional vector, pBm10, using p10 gene of Bombyx mori nucleocapside polyhedron virus VB2(KCTC8873P) is prepared by that: (a) 5' end of p10 gene of Bombyx mori nucleocapside polyhedron virus VB 2 is obtained by treating Pinpoint XalT-5'f vector with restriction enzyme HaeIII and BgIII, to produce a genetic fragment of 3Kb; treating this gene with restriction enzyme Kpn1; making blunt end of the gene by using T4 polymerase; and liking this to pBluescript SK+ which was cleaved by Bam HI and selecting recombinant plasmid (pSK-5'f) of 5.9 kb; and (b) 3' end is prepared by treating pGEM-3'f vector with restriction enzyme SmaI and SacI, to obtain a genetic fragment of 2.0kb and liking this to pSK-5'f vector which was cleaved by SmaI and SacI.

Abstract translation: 目的：提供使用Bombyx mori nucleocapside多面体病毒VB2（KCTC8873P）的p10基因的pBm10，其可用于生物技术和昆虫生物技术中有用的批量生产材料，以及用于制备载体的方法。 构成：通过以下方法制备使用Bombyx mori nucleocapside多面体病毒VB2（KCTC8873P）的p10基因的过表达载体pBm10：（a）通过处理Pinpoint XalT-片段获得家蚕蛹多核苷酸病毒VB2的p10基因的5'末端， 5'f载体与限制酶HaeIII和BgIII，以产生3Kb的遗传片段; 用限制酶Kpn1处理该基因; 通过使用T4聚合酶使基因平端化; 并喜欢这一点由Bam HI切割的pBluescript SK +，并选择5.9kb的重组质粒（pSK-5'f）; 通过用限制性内切酶SmaI和SacI处理pGEM-3'f载体，得到2.0kb的遗传片段，并将其转化成由SmaI和SacI切割的pSK-5'f载体，制备（b）3'末端。

公开(公告)号：KR1019990086802A

公开(公告)日：1999-12-15

申请号：KR1019980019951

申请日：1998-05-30

Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)

Inventor： 강석우 ,  윤은영 ,  진병래 ,  김상현 ,  김근영 ,  김호락 ,  강석권

IPC: C12N15/33 ,  C12N15/63

Abstract: 본 발명은 국내산 누에 핵다각체병 바이러스 브이비2(KCTC8873P)의 p10 단백질 유전자를 클로닝하고 그 유전자 구조를 분석하였으며 이를 이용하여 외래유전자 발현용 전이벡터 피비엠l0을 제작하고, 그 전이벡터에 표지유전자로 베타-갈락토시다아제 유전자를 삽입하여 누에세포주에서 발현 여부를 분석한 결과, 그 전이벡터에의한 재조합바이러스는 다각체를 형성하면서 베타-갈락토시다아제를 발현하여 전이벡터로서 기능을 가지고 있음을 확인하였다. 따라서 본 발명은 국내산 누에 핵다각체병 바이러스 브이비2의 p10 단백질 유전자를 이용한 전이벡터 피비엠10과 이에의한 재조합바이러스 제작과 외래유전자 발현 및 유용물질 생산에 적용할 수 있다.

公开(公告)号：KR1019990065232A

公开(公告)日：1999-08-05

申请号：KR1019980000444

申请日：1998-01-10

Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)

Inventor： 진병래 ,  윤은영 ,  강석우 ,  윤형주 ,  김근영 ,  김호락 ,  강석권

IPC: C12N15/85

Abstract: 본 발명은 곤충 베큘로바이러스(AcNPV)의 다각체 단백질 유전자 프로모터의 조절하에 초록색 형광 단백질 유전자를 삽입한 재조합 바이러스(한국과학기술연구원 생명공학연구소 균주기탁번호 KCTC0418BP)를 제조하여, 이를 누에에 체강주사하면 재조합 바이러스의 소량 증식과 다각체 단백질 유전자 프로모터 조절에 의해 초록색 형광 단백질 유전자가 발현되는 유전자재조합 바이러스의 형광누에 및 제조방법 그리고 그 용도에 관한 발명이다. 형광누에는 누에품종에 따라서 그 발현정도가 다르며 특히 대성잠이 발현율과 전이에서 효과적이었고, 자외선 조사시 온몸에서 초록색 형광을 발하였다. 또 형광누에의 초록색 형광 단백질 유전자는 숙주곤충에 게놈에 삽입되는 기작으로 차세대에 전이됨을 밝혔다. 따라서 본 발명의 형광누에 개발 기술은 신기능 및 유전공학적으로 개량된 형질전환 곤충 창출에 활용될 수 있다.

公开(公告)号：KR1019990025553A

公开(公告)日：1999-04-06

申请号：KR1019970047219

申请日：1997-09-12

Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)

Inventor： 강석우 ,  진병래 ,  강석권 ,  윤은영 ,  김상현 ,  김근영

IPC: C12N15/12

Abstract: [기술분야]
본 발명은 집누에로부터 항세균성 단백질 유전자 누에신 cDNA를 분리하고, 이를 염기서열 분석을 통해 새로운 유전자 임을 밝혔으며, 이 누에신 cDNA를 이용하여 누에신 cDNA를 포함하는 재조합 베큘로바이러스를 제작하고, 곤충 세포주에 감염시킴으로서 재조합 누에신 단백질을 생산하여 그 재조합 누에신 단백질이 그람 음성 세균 뿐만 아니라 그람 양성 세균에도 항세균 활성을 가짐을 확인됨.
따라서, 본 발명은 집누에로부터 분리된 그람 양성 및 음성 세균에 항세균 활성을 갖는 새로운 항세균성 단백질 누에신 유전자를 암호화하는 cDNA 및 이들을 포함하는 재조합 베큘로바이러스 발현 전이벡터 및 이 전이벡터에 의해 제작된 재조합 베큘로바이러스와 이에 의해 곤충 세포주에서 발현 생산된 재조합 누에신 단백에 관한 것이다.

公开(公告)号：KR100577003B1

公开(公告)日：2006-05-10

申请号：KR1020030021504

申请日：2003-04-04

Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)

Inventor： 최지영 ,  김근영 ,  김종길 ,  최영철 ,  김남정 ,  제연호

IPC: C12Q1/68

Abstract: 본 발명은 곤충병원 미포자충병 조기진단을 위하여 특이적 PCR 프라이머 및 이를 이용한 PCR 기법으로 곤충병원성 미포자충의 감염여부를 효과적으로 진단하는 방법에 관한 것이다.
본 발명은 자원화 곤충에 병을 일으키는 미포자충에 특이적으로 존재하는 small subunit ribosomal RNA 유전자의 염기서열로부터 본 발명에 이용하기에 가장 적합한 프라이머를 제작하였고, 이 제작된 프라이머로 PCR을 수행하면 미포자충의 감염여부를 효과적으로 진단할 수 있음을 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명은 미포자충의 small subunit ribosomal RNA의 특정 염기서열에 상응하는 프라이머를 사용하여 PCR 기법으로 곤충병원성 미포자충을 조기 진단함으로서, 미포자충병 예방과 방제에 시간과 비용을 절약하여 자원화 곤충의 안정적인 대량생산에 기여할 수 있다.
곤충, 미포자충, 조기진단

公开(公告)号：KR1020020094304A

公开(公告)日：2002-12-18

申请号：KR1020010031954

申请日：2001-06-08

Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)

Inventor： 황재삼 ,  구태원 ,  윤은영 ,  강석우 ,  김근영 ,  서동상 ,  이진성 ,  이상몽 ,  진병래 ,  김용성

IPC: C12N15/12

CPC classification number: C07K14/43586

Abstract: PURPOSE: Provided are a nucleotide sequence and a putative amino acid sequence containing a fibroin gene isolated from Antheraea yamamai and its promoter, thereby producing transformed silkworms capable of producing raw silk-thread of Antheraea yamamai. CONSTITUTION: The nucleotide sequence containing a fibroin gene isolated from Antheraea yamamai and its promoter is represented by SEQ ID NO: 1. The amino acid sequence encoded by the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 1 containing a fibroin gene isolated from Antheraea yamamai and its promoter is represented by SEQ ID NO: 2. A nucleotide sequence of the fibroin gene isolated from Antheraea yamamai comprises from nucleotide 1,672 to nucleotide 9,789 of SEQ ID NO: 1. A nucleotide sequence of the promoter of the fibroin gene of Antheraea yamamai comprises from nucleotide 641 to nucleotide 1,671 of SEQ ID NO: 1.

Abstract translation: 目的：提供一种核苷酸序列和推定的氨基酸序列，其含有从花药和其启动子分离的丝心蛋白基因，从而产生能够产生Antheraea yamamai的生丝线的转化的蚕。 构成：含有从花药和其启动子分离的丝心蛋白基因的核苷酸序列由SEQ ID NO：1表示。由SEQ ID NO：1的核苷酸序列编码的氨基酸序列含有从花药（Antheraea yamamai）分离的丝心蛋白基因及其 启动子由SEQ ID NO：2表示。从花药分离的丝心蛋白基因的核苷酸序列包含SEQ ID NO：1的核苷酸1,672至核苷酸9,789。Antheraea yamamai的丝心蛋白基因的启动子的核苷酸序列包括 SEQ ID NO：1的核苷酸641至核苷酸1,671。

公开(公告)号：KR100353475B1

公开(公告)日：2002-09-27

申请号：KR1020000003378

申请日：2000-01-25

Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)

Inventor： 김근영 ,  진병래 ,  강석우 ,  윤은영 ,  황재삼 ,  조은숙

IPC: C12N15/63

Abstract: 본 발명은 형질전환체 선발이 용이하고 외래 유전자의 발현효율이 현저히 향상된 곤충 세포주용 형질전환 발현벡터 및 이 발현벡터를 함유하는 형질전환체에 관한 것이다.
본 발명에 의한 발현벡터 pAcIE1-Neo-hsp-Nuecin은 형질전환 세포주의 선발이 용이하고, 외래 유전자 산물의 발현효율이 높은 벡터로서, 이 발현벡터를 도입하여 형질전환시킨 곤충세포주는 계대 배양과 함께 영속적으로 항세균 단백질인 누에신을 생산할 수 있어, 계대 배양 및 대량 배양시 배지에 항생제를 첨가가 필요가 없는 장점이 있다. 또한, 발현벡터 pAcIE1-Neo-hsp는 발현효율이 높으므로, 외래 유전자 산물을 생산하기 위한 곤충세포주 형질전환용 벡터로서 유용하게 이용할 수 있다.
따라서, 본 발명에 의한 발현벡터와 형질전환 곤충 세포주는 연구용 뿐만 아니라 산업적으로 외래 유전자의 대량생산 발현계로 유용하게 이용될 수 있다.

公开(公告)号：KR100261044B1

公开(公告)日：2000-07-01

申请号：KR1019970047219

申请日：1997-09-12

Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)

Inventor： 강석우 ,  진병래 ,  강석권 ,  윤은영 ,  김상현 ,  김근영

IPC: C12N15/12

Abstract: PURPOSE: Provided is a cDNA of antimicrobial protein nuecin separated from Bombyx mori. And a recombinant antimicrobial protein nuecin is also provided which is effective on both gram positive and negative bacteria, so as to be applied to agricultural chemicals. CONSTITUTION: The cDNA of antimicrobial protein nuecin has the nucleotide sequence of figure (1) consisting of 852 bp and the amino acid sequence of figure (2) consisting of 214 amino acids. The expression vector pBacPAK8-nuecin shown in figure (3) contains the cDNA of antimicrobial protein nuecin. The recombinant virus vAc-nuecin is produced by transforming with the expression vector pBacPAK8-nuecin. The antimicrobial protein nuecin is produced by infecting Spodoptera frugiferda 9 with vAc-nuecin and collecting nuecin.

Abstract translation: 目的：提供从家蚕分离的抗微生物蛋白质素的cDNA。 并提供了一种对革兰氏阳性细菌和阴性菌有效的重组抗微生物蛋白质，以适用于农药。 构成：抗菌蛋白质核糖核酸的cDNA具有图（1）的核苷酸序列，由852bp和由214个氨基酸组成的图（2）的氨基酸序列组成。 图（3）所示的表达载体pBacPAK8-nuecin含有抗微生物蛋白质素的cDNA。 通过用表达载体pBacPAK8-nuecin转化产生重组病毒vAc-核糖核酸。 通过用vAc-nuecin感染草地贪夜蛾9并收集胡桃素来生产抗微生物蛋白质胡桃素。