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公开(公告)号：KR100285271B1
公开(公告)日：2001-05-02
申请号：KR1019980056952
申请日：1998-12-21
Applicant: 주식회사대성미생물연구소 , 한국과학기술연구원
IPC: C12N15/63
Abstract: 본 발명은 파이타제 (phytase)를 고발현하는 재조합 플라스미드 pJPK 및 이에 의해 형질전환된 바실러스 서브틸리스 (
Bacillus subtilis ) pJPK에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 동물의 소화생리에 적합하며 사료제조시 효소의 잔존활성이 뛰어난 바실러스 아밀로리퀴페이션스 (
Bacillus amyloliquefaciens ) DS-11이 생산하는 파이타제를 바실러스 서브틸리스에서 고발현하기 위한 재조합 플라스미드 및 이에 의해 형질전환된 바실러스 서브틸리스 pJPK, 그리고 이를 이용한 파이타제의 고효율 제조방법에 관한 것이다.-
公开(公告)号：KR1020000041160A
公开(公告)日：2000-07-15
申请号：KR1019980056952
申请日：1998-12-21
Applicant: 주식회사대성미생물연구소 , 한국과학기술연구원
IPC: C12N15/63
Abstract: PURPOSE: Phytase expression vector, pJPK has strong BJ27 promoter. Bacillus subtilis pJPK (KCTC 0526BP) transformed with pJPK expresses phytase highly, secrets expressed protein and is nontoxic to animal because of lacking endotoxin such as lipopolysaccharides. CONSTITUTION: Bacillus expression vector pJH27, having strong promoter BJ27, is ligated with 2.2 kb phytase gene originated from Bacillus amyloliquefaciens DS-11. The 2.2kb DNA includes SD sequence of phytase gene complementary to Bacillus subtilis 16S rRNA sequence (UCCUCC) for the overexpression of phytase. Resulting recombinant plasmid, pJPK, is introduced into E. coli JM83. Purified pJPK is transformed into Bacillus subtilis DB104 by protoplast transformation. Modified LB medium is consisted of 1% of potassium phosphate, 0.045% of magnesium sulfate, 4% of glucose, 1% of tryptone, 0.5% of yeast extract, 0.5% of NaCl and trace elements. 500-1000 unit of phytase is added to 1kg of animal feed. Animal experiment with porcine reveals that phytase produced from bacillus effectively degrades phytic acid in the animal feed.
Abstract translation: 目的：植酸酶表达载体pJPK具有较强的BJ27启动子。 用pJPK转化的枯草芽孢杆菌pJPK（KCTC 0526BP）高度表达植酸酶，秘密表达蛋白质，由于缺乏内毒素，如脂多糖，对动物无毒。 构成：具有强启动子BJ27的芽孢杆菌表达载体pJH27与源自解淀粉芽孢杆菌DS-11的2.2kb植酸酶基因连接。 2.2kb DNA包括与枯草芽孢杆菌16S rRNA序列（UCCUCC）互补的植酸酶基因的SD序列，用于过表达植酸酶。 将得到的重组质粒pJPK导入大肠杆菌JM83中。 纯化的pJPK通过原生质体转化转化到枯草芽孢杆菌DB104中。 改性LB培养基由1％磷酸钾，0.045％硫酸镁，4％葡萄糖，1％胰蛋白胨，0.5％酵母提取物，0.5％NaCl和微量元素组成。 将500-1000单位的植酸酶加入1kg动物饲料中。 猪的动物实验显示，由芽孢杆菌产生的植酸酶有效降解动物饲料中的植酸。
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公开(公告)号：KR100180570B1
公开(公告)日：1999-04-01
申请号：KR1019960020320
申请日：1996-06-07
Applicant: 한국과학기술연구원
Abstract: 본 발명은 신규한 플라스미드 pKLE와 이를 이용한 리파제의 대량생산방법에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 유전자 조작에 의해 제조된 신규한 재조합 벡터 pKLE을 이용하여 알카리 및 단백질 분해효소에 대한 내성이 강하고 용매안정성이 우수한 리파제를 대장균 세포내에서 다량 발현시키고 이를 활성이 있는 안정된 형태로 고수율로 분리정제하여 제조하는 방법에 관한 것이다.
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