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公开(公告)号:KR1020070058732A
公开(公告)日:2007-06-11
申请号:KR1020050117353
申请日:2005-12-05
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C07K1/36
CPC classification number: C12N15/1027 , C12N9/78 , C12N9/88 , C12N15/1044
Abstract: A method for preparing a protein having new functions is provided to be widely utilized for developing protein for medicines and making industrial enzymes in the field of biotechnology. The method comprises the steps of: (a) designing function elements required for new functions which are desired to be provided to pre-existing protein scaffold; (b) simultaneously inserting at least two gene fragments corresponding to the designed function elements into a protein scaffold gene; and (c) selecting mutant having the new function from a library of mutants in which the new mutant genes are inserted and improving and adjusting the function of the selected mutant using a directed evolution technique such as an error prone-PCR and a DNA shuffling. The mutant protein evMBL8 of SEQ ID : NO. 29, in which function elements of a metallo beta-lactamase are introduced into a glyoxalase scaffold, is prepared by the method and deposited as a deposition number of KCTC 10877BP.
Abstract translation: 提供一种制备具有新功能的蛋白质的方法,被广泛用于开发生物技术领域的药物蛋白质和制造工业酶。 该方法包括以下步骤:(a)设计期望提供给预先存在的蛋白质支架的新功能所需的功能元件; (b)同时将至少两个对应于所设计的功能元件的基因片段插入到蛋白质支架基因中; 和(c)从其中插入新的突变基因的突变体的文库中选择具有新功能的突变体,并使用定向进化技术(例如易错PCR和DNA改组)改进和调整所选突变体的功能。 SEQ ID NO:1的突变蛋白evMBL8。 29,其中将金属β-内酰胺酶的功能元件引入乙二醛酶支架中,通过该方法制备并沉积为KCTC 10877BP的沉积数。
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公开(公告)号:KR1020110049193A
公开(公告)日:2011-05-12
申请号:KR1020090106098
申请日:2009-11-04
Applicant: 한국과학기술원
CPC classification number: C12N15/63
Abstract: PURPOSE: A method for screening a quorum sensing inhibitor using a strain in which a vector is introduced is provided to easily analyze host cell growth with respect to antibiotics. CONSTITUTION: A vector for screening a quorum sensing inhibitor comprises: a gene encoding transcription protein which binds to acyl homoserine lactone; a promoter and a gene encoding a protein which suppresses antibiotic lyase inhibitor protein which is operatively lined to the promoter; and a gene encoding antiobic lyase. The antibiotic lyase inhibitor protein is beta-lactamase inhibitor protein(BLIP). A method for screening the quorum sensing inhibitor comprises: a step of determining the concentration of acyl homoserine lactone and antibiotics; a step of contacting the strain with quorum sensing inhibitor candidate; and a step of determining quorum sensing inhibitor.
Abstract translation: 目的:提供一种使用其中引入载体的菌株筛选群体感测抑制剂的方法,以容易地分析宿主细胞相对于抗生素的生长。 构成:用于筛选群体感知抑制剂的载体包括:编码结合酰基高丝氨酸内酯的转录蛋白的基因; 启动子和编码蛋白质的基因,其抑制有效地排列于启动子的抗生素裂解酶抑制剂蛋白质; 和编码抗bic裂解酶的基因。 抗生素裂解酶抑制蛋白是β-内酰胺酶抑制蛋白(BLIP)。 用于筛选群体感知抑制剂的方法包括:测定酰基高丝氨酸内酯和抗生素的浓度的步骤; 将菌株与群体感应抑制剂候选物接触的步骤; 以及确定群体感知抑制剂的步骤。
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公开(公告)号:KR100784478B1
公开(公告)日:2007-12-11
申请号:KR1020050117353
申请日:2005-12-05
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C07K1/36
CPC classification number: C12N15/1027 , C12N9/78 , C12N9/88 , C12N15/1044
Abstract: 본 발명은 새로운 기능을 갖는 단백질을 제조하는 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 (A) 기존에 존재하는 단백질 골격(protein scaffold)에 부여하기를 원하는 새로운 기능에 필요한 기능요소들을 설계하는
기능요소 설계 단계 ; (B) 설계된 기능요소들에 해당하는 두 개 이상의 유전자 단편들을 단백질 골격 유전자에 동시에 삽입하는
기능요소 삽입단계 ; 및 (C) 새로운 변이 유전자들이 삽입된 변이체들의 라이브러리로부터 새로운 기능을 가진 1차 변이체를 선별하고 선별된 1차 변이체의 임의의 유전자 부위에 돌연변이를 유발시켜 상기 기능이 1차 변이체보다 개량된 2차 변이체를 얻는
변이체 선별 및 개량단계 ;로 구성되는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 새로운 기능을 갖는 단백질을 제조하는 방법은 의약용 단백질의 개발 및 산업용 효소의 창출 등 생명공학 및 생물공학 분야에서 광범위하게 활용될 수 있다.
신기능 단백질, 단백질 골격, 단백질 진화, 유전자 재조합-
公开(公告)号:KR101141787B1
公开(公告)日:2012-05-04
申请号:KR1020090106098
申请日:2009-11-04
Applicant: 한국과학기술원
CPC classification number: C12N15/63
Abstract: 본 발명은 쿼럼센싱 (Quorum sensing) 저해제를 스크리닝하기 위한 발현 카세트로 이루어진 벡터 및 상기 벡터가 도입된 균주를 이용한 쿼럼센싱 저해제의 스크리닝 방법에 관한 것이다. 상세하게는 아실 호모세린 락톤을 인식하여 결합하는 전사조절 단백질을 인코딩하는 유전자, 상기 전사조절 단백질에 의해 전사가 조절되는 프로모터에 작동가능하게 연결된 항생제 분해 효소 저해 단백질을 인코딩하는 유전자, 및 상기 항생제 분해 효소 저해 단백질에 의해 활성이 전해되는 항생제 분해 효소를 인코딩하는 유전자를 포함하는, 쿼럼센싱 저해제를 스크리닝하기 위한 발현 카세트로 이루어진 벡터, 상기 벡터로 형질전환된 균주, 상기 균주에 쿼럼센싱 저해제 후보물질과 접촉시켜 쿼럼센싱 저해제를 스크리닝하는 방법 및 상기 방법에 의해 스크리닝된 쿼럼센싱 저해제에 관한 것이다.
쿼럼센싱, 아실 호모세린 락톤, LuxI, LuxR, β-락타마제 저해 단백질, TEM-1 β-락타마제
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