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公开(公告)号:KR100784478B1
公开(公告)日:2007-12-11
申请号:KR1020050117353
申请日:2005-12-05
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C07K1/36
CPC classification number: C12N15/1027 , C12N9/78 , C12N9/88 , C12N15/1044
Abstract: 본 발명은 새로운 기능을 갖는 단백질을 제조하는 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 (A) 기존에 존재하는 단백질 골격(protein scaffold)에 부여하기를 원하는 새로운 기능에 필요한 기능요소들을 설계하는
기능요소 설계 단계 ; (B) 설계된 기능요소들에 해당하는 두 개 이상의 유전자 단편들을 단백질 골격 유전자에 동시에 삽입하는
기능요소 삽입단계 ; 및 (C) 새로운 변이 유전자들이 삽입된 변이체들의 라이브러리로부터 새로운 기능을 가진 1차 변이체를 선별하고 선별된 1차 변이체의 임의의 유전자 부위에 돌연변이를 유발시켜 상기 기능이 1차 변이체보다 개량된 2차 변이체를 얻는
변이체 선별 및 개량단계 ;로 구성되는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 새로운 기능을 갖는 단백질을 제조하는 방법은 의약용 단백질의 개발 및 산업용 효소의 창출 등 생명공학 및 생물공학 분야에서 광범위하게 활용될 수 있다.
신기능 단백질, 단백질 골격, 단백질 진화, 유전자 재조합-
公开(公告)号:KR100704011B1
公开(公告)日:2007-04-04
申请号:KR1020060012213
申请日:2006-02-08
Applicant: 한국과학기술원
CPC classification number: G01N33/542 , A61K49/0065 , A61K49/0067 , B82Y5/00 , B82Y10/00 , B82Y30/00
Abstract: 본 발명은, FRET 현상을 나타내는 한 쌍의 에너지 수용체 및 에너지 공여체, 특이결합을 하는 한 쌍의 생체분자의 특성을 활용한, ① 알려지지 않은 생체분자 간의 특이결합 여부를 확인하는 방법 ② 검체내 표적분자의 존재여부를 검출하는 방법 및 ③ 검체내 존재하는 표적분자를 정량하는 방법에 관한 것이다.
본 발명에 의하면, 검체의 라벨링 없이 빠르고 쉬운 방법으로 한 쌍의 생체분자 사이의 특이적 결합을 저해하는 생화학 물질을 초고속으로 스크리닝하고 정량적으로 분석하여 신약개발에 응용할 수 있으며, 여러 가지 세포에서 생산되는 신약 후보물질로 사용되는 당단백질의 당량 변화와 같은 단백질의 특성변화 따른 분석을 이용하여 생산되는 단백질의 품질 검사 등에 응용할 수 있다
금속나노입자, 양자점, 형광에너지공명전이, 당단백질, 초고속 스크리닝-
3.
公开(公告)号:KR1020060092059A
公开(公告)日:2006-08-22
申请号:KR1020060012213
申请日:2006-02-08
Applicant: 한국과학기술원
CPC classification number: G01N33/542 , A61K49/0065 , A61K49/0067 , B82Y5/00 , B82Y10/00 , B82Y30/00
Abstract: 본 발명은, FRET 현상을 나타내는 한 쌍의 에너지 수용체 및 에너지 공여체, 특이결합을 하는 한 쌍의 생체분자의 특성을 활용한, ① 알려지지 않은 생체분자 간의 특이결합 여부를 확인하는 방법 ② 검체내 표적분자의 존재여부를 검출하는 방법 및 ③ 검체내 존재하는 표적분자를 정량하는 방법에 관한 것이다.
본 발명에 의하면, 검체의 라벨링 없이 빠르고 쉬운 방법으로 한 쌍의 생체분자 사이의 특이적 결합을 저해하는 생화학 물질을 초고속으로 스크리닝하고 정량적으로 분석하여 신약개발에 응용할 수 있으며, 여러 가지 세포에서 생산되는 신약 후보물질로 사용되는 당단백질의 당량 변화와 같은 단백질의 특성변화 따른 분석을 이용하여 생산되는 단백질의 품질 검사 등에 응용할 수 있다
금속나노입자, 양자점, 형광에너지공명전이, 당단백질, 초고속 스크리닝-
公开(公告)号:KR100464780B1
公开(公告)日:2005-01-06
申请号:KR1020020014243
申请日:2002-03-16
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C12N15/55
Abstract: PURPOSE: Mutated N-carbamoylase with improved acid-stability is provided, thereby effectively and cheaply producing synthetic D-amino acids without addition of DTT(dithiothreitol). CONSTITUTION: A gene encoding mutated N-carbamoylase has the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 4, 12, 13 or 14, wherein the mutated N-carbamoylase is NC23, Gln23Leu, Val40AAla or Gly75Ser, respectively. A recombinant plasmid pNC23 contains the gene of SEQ ID NO: 4. A transformed Escherichia coli NC23(JM109/pTrc99a/NC23)(KCTC 10164BP) is produced by transforming with the recombinant plasmid pNC23. A method for producing the mutated N-carbamoylase comprises culturing the transformed Escherichia coli NC23(JM109/pTrc99a/NC23)(KCTC 10164BP). A method for producing synthetic D-amino acid comprises reacting the mutated N-carbamoylase with N-carbamoyl-D-amino acid, wherein the N-carbamoyl-D-amino acid is N-carbamoyl-D-para-hydroxyphenylglycine, N-carbamoyl-D-valine or N-carbamoyl-D-serine; and the synthetic D-amino acid is D-para-hydroxyphenylglycine, D-valine or D-serine.
Abstract translation: 目的:提供具有改善的酸稳定性的突变N-氨基甲酰基酶,由此有效且廉价地生产合成D-氨基酸而不添加DTT(二硫苏糖醇)。 构成:编码突变N-氨基甲酰基酶的基因具有SEQ ID NO:4,12,13或14的核苷酸序列,其中突变的N-氨基甲酰基酶分别是NC23,Gln23Leu,Val40AAla或Gly75Ser。 重组质粒pNC23含有SEQ ID NO:4的基因。用重组质粒pNC23转化产生转化的大肠杆菌NC23(JM109 / pTrc99a / NC23)(KCTC 10164BP)。 产生突变的N-氨基甲酰基酶的方法包括培养转化的大肠杆菌NC23(JM109 / pTrc99a / NC23)(KCTC 10164BP)。 生产合成D-氨基酸的方法包括使突变的N-氨基甲酰基酶与N-氨基甲酰基-D-氨基酸反应,其中N-氨基甲酰基-D-氨基酸是N-氨基甲酰基-D-对羟基苯基甘氨酸,N-氨基甲酰基 -D-缬氨酸或N-氨基甲酰基-D-丝氨酸; 并且合成的D-氨基酸是D-对羟基苯基甘氨酸,D-缬氨酸或D-丝氨酸。
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公开(公告)号:KR100738003B1
公开(公告)日:2007-07-13
申请号:KR1020060014588
申请日:2006-02-15
Applicant: 한국과학기술원
CPC classification number: G01N33/542 , A61K49/0065 , A61K49/0067 , B82Y5/00 , B82Y10/00 , B82Y30/00
Abstract: 본 발명은 (a) 리간드와 금속염 또는 유기금속화합물을 혼합하여 금속입자 표면에 상기 리간드가 결합된 나노입자 분산액을 제조하는 단계;와 (b) 상기 나노입자 분산액에 덴드리머를 가하여 나노입자 표면의 리간드를 상기 덴드리머로 수식화하는 단계;에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는 나노입자에 관한 것이다.
본 발명에 의한 나노입자는 물에 대한 용해도와 안정성이 높고, 표지분자의 도입이 용이하다. 또한, 본 발명에 의한 덴드리머에 의해 수식화된 나노입자에 표지분자를 도입하는 경우, 표적분자와 특이적으로 결합한다.
나노입자, 콜로이드, 덴드리머-
公开(公告)号:KR1020070058732A
公开(公告)日:2007-06-11
申请号:KR1020050117353
申请日:2005-12-05
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C07K1/36
CPC classification number: C12N15/1027 , C12N9/78 , C12N9/88 , C12N15/1044
Abstract: A method for preparing a protein having new functions is provided to be widely utilized for developing protein for medicines and making industrial enzymes in the field of biotechnology. The method comprises the steps of: (a) designing function elements required for new functions which are desired to be provided to pre-existing protein scaffold; (b) simultaneously inserting at least two gene fragments corresponding to the designed function elements into a protein scaffold gene; and (c) selecting mutant having the new function from a library of mutants in which the new mutant genes are inserted and improving and adjusting the function of the selected mutant using a directed evolution technique such as an error prone-PCR and a DNA shuffling. The mutant protein evMBL8 of SEQ ID : NO. 29, in which function elements of a metallo beta-lactamase are introduced into a glyoxalase scaffold, is prepared by the method and deposited as a deposition number of KCTC 10877BP.
Abstract translation: 提供一种制备具有新功能的蛋白质的方法,被广泛用于开发生物技术领域的药物蛋白质和制造工业酶。 该方法包括以下步骤:(a)设计期望提供给预先存在的蛋白质支架的新功能所需的功能元件; (b)同时将至少两个对应于所设计的功能元件的基因片段插入到蛋白质支架基因中; 和(c)从其中插入新的突变基因的突变体的文库中选择具有新功能的突变体,并使用定向进化技术(例如易错PCR和DNA改组)改进和调整所选突变体的功能。 SEQ ID NO:1的突变蛋白evMBL8。 29,其中将金属β-内酰胺酶的功能元件引入乙二醛酶支架中,通过该方法制备并沉积为KCTC 10877BP的沉积数。
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公开(公告)号:KR100575058B1
公开(公告)日:2006-05-04
申请号:KR1020040031878
申请日:2004-05-06
Applicant: 한국과학기술원
Abstract: 본 발명은 방향족 기질에 대한 효소활성이 향상된 히단토이나제(D-hydantoinase) 변이체에 관한 것으로서, 구체적으로 바실러스 스테아로써머필러스 SD1(
Bacillus stearothermophilus SD1) 유래의 야생형 히단토이나제의 활성부위를 구성하는 3개의 루프(loop)에 위치한 소수성의 아미노산을 다른 아미노산으로 치환하여 수득되는, 방향족 치환기를 갖는 기질에 대하여 효소활성이 증진된 새로운 히단토이나제 변이체에 관한 것이다.
본 발명에 따른 히단토이나제 변이체는 야생형 히단토이나제에 비하여 방향족 기질에 대한 기질 특이성이 최대 150배 이상 향상되어 산업적으로 매우 유용하다.
히단토이나제, D-아미노산, 하이드록시페닐히단토인, 변이, 기질 특이성-
公开(公告)号:KR1020060092110A
公开(公告)日:2006-08-22
申请号:KR1020060014588
申请日:2006-02-15
Applicant: 한국과학기술원
CPC classification number: G01N33/542 , A61K49/0065 , A61K49/0067 , B82Y5/00 , B82Y10/00 , B82Y30/00
Abstract: 본 발명은 (a) 리간드와 금속염 또는 유기금속화합물을 혼합하여 금속입자 표면에 상기 리간드가 결합된 나노입자 분산액을 제조하는 단계;와 (b) 상기 나노입자 분산액에 덴드리머를 가하여 나노입자 표면의 리간드를 상기 덴드리머로 수식화하는 단계;에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는 나노입자에 관한 것이다.
본 발명에 의한 나노입자는 물에 대한 용해도와 안정성이 높고, 표지분자의 도입이 용이하다. 또한, 본 발명에 의한 덴드리머에 의해 수식화된 나노입자에 표지분자를 도입하는 경우, 표적분자와 특이적으로 결합한다.
나노입자, 콜로이드, 덴드리머-
公开(公告)号:KR1020050106831A
公开(公告)日:2005-11-11
申请号:KR1020040031878
申请日:2004-05-06
Applicant: 한국과학기술원
Abstract: 본 발명은 방향족 기질에 대한 효소활성이 향상된 히단토이나제(D-hydantoinase) 변이체에 관한 것으로서, 구체적으로 바실러스 스테아로써머필러스 SD1(
Bacillus stearothermophilus SD1) 유래의 야생형 히단토이나제의 활성부위를 구성하는 3개의 루프(loop)에 위치한 소수성의 아미노산을 다른 아미노산으로 치환하여 수득되는, 방향족 치환기를 갖는 기질에 대하여 효소활성이 증진된 새로운 히단토이나제 변이체에 관한 것이다.
본 발명에 따른 히단토이나제 변이체는 야생형 히단토이나제에 비하여 방향족 기질에 대한 기질 특이성이 최대 150배 이상 향상되어 산업적으로 매우 유용하다.-
公开(公告)号:KR1020030075098A
公开(公告)日:2003-09-22
申请号:KR1020020014243
申请日:2002-03-16
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C12N15/55
CPC classification number: C12N9/80 , C12N9/78 , C12N15/70 , C12P13/06 , C12P13/08 , C12Q1/34 , C12Q2334/00 , C12Y305/01077 , C12Y305/01087 , C12Y305/05001
Abstract: PURPOSE: Mutated N-carbamoylase with improved acid-stability is provided, thereby effectively and cheaply producing synthetic D-amino acids without addition of DTT(dithiothreitol). CONSTITUTION: A gene encoding mutated N-carbamoylase has the nucleotide sequence of SEQ ID NO: 4, 12, 13 or 14, wherein the mutated N-carbamoylase is NC23, Gln23Leu, Val40AAla or Gly75Ser, respectively. A recombinant plasmid pNC23 contains the gene of SEQ ID NO: 4. A transformed Escherichia coli NC23(JM109/pTrc99a/NC23)(KCTC 10164BP) is produced by transforming with the recombinant plasmid pNC23. A method for producing the mutated N-carbamoylase comprises culturing the transformed Escherichia coli NC23(JM109/pTrc99a/NC23)(KCTC 10164BP). A method for producing synthetic D-amino acid comprises reacting the mutated N-carbamoylase with N-carbamoyl-D-amino acid, wherein the N-carbamoyl-D-amino acid is N-carbamoyl-D-para-hydroxyphenylglycine, N-carbamoyl-D-valine or N-carbamoyl-D-serine; and the synthetic D-amino acid is D-para-hydroxyphenylglycine, D-valine or D-serine.
Abstract translation: 目的:提供具有改善的酸稳定性的突变的N-氨基甲酰基酶,从而有效且廉价地生产合成的D-氨基酸而不添加DTT(二硫苏糖醇)。 构成:编码突变的N-氨基甲酰基酶的基因具有SEQ ID NO:4,12,13或14的核苷酸序列,其中突变的N-氨基甲酰基酶分别为NC23,Gln23Leu,Val40AAla或Gly75Ser。 重组质粒pNC23含有SEQ ID NO:4的基因。通过用重组质粒pNC23转化产生转化的大肠杆菌NC23(JM109 / pTrc99a / NC23)(KCTC 10164BP)。 制备突变的N-氨甲酰基酶的方法包括培养转化的大肠杆菌NC23(JM109 / pTrc99a / NC23)(KCTC10164BP)。 制备合成的D-氨基酸的方法包括使突变的N-氨基甲酰基酶与N-氨基甲酰基-D-氨基酸反应,其中N-氨基甲酰基-D-氨基酸是N-氨基甲酰基-D-对羟基苯基甘氨酸,N-氨基甲酰基 D-缬氨酸或N-氨基甲酰-D-丝氨酸; 并且合成的D-氨基酸是D-对羟基苯基甘氨酸,D-缬氨酸或D-丝氨酸。
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