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公开(公告)号：WO2018044143A1
公开(公告)日：2018-03-08
申请号：PCT/KR2017/009706
申请日：2017-09-05
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C12N15/85 , C12N9/00 , A01K67/027
CPC classification number: A01K67/027 , C12N9/00 , C12N15/85
Abstract: 본 발명은 목적 단백질의 위치 특이적 변형이 시공간적으로 조절되는 마우스( Mus musclus ), 이의 제조방법 및 그 용도에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 비천연 아미노산에 시공간적 주입에 따라 특정 위치의 변형이 부착된 목적 단백질의 발현이 조절되는 형질전환 마우스에 관한 것이다. 본 발명에 따른 목적 단백질의 위치 특이적 변형을 시공간적으로 조절할 수 있는 마우스는 위치 특이적 변형이 부착된 목적 단백질의 발현을 비천연 아미노산의 주입 시기 및/또는 주입 위치에 따라 조절할 수 있기 때문에, 목적 단백질의 생체 내 기능 연구, 신약 개발 등에 유용하다.
Abstract translation: 本发明涉及其靶蛋白的位置特异性修饰在空间和时间上受到调控的小鼠（Mus musclus），其制备方法及其用途， 本发明涉及转基因小鼠，其中通过时空注射到非天然氨基酸中来控制附着了特定位置修饰的靶蛋白的表达。 由于根据本发明能够空间调节靶蛋白的位点特异性修饰的小鼠可以根据注射时机和/或非天然氨基酸的注射位点来控制具有位点特异性突变的靶蛋白的表达， 蛋白质的体内功能研究，新药开发等都很有用。
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公开(公告)号：WO2018044130A1
公开(公告)日：2018-03-08
申请号：PCT/KR2017/009629
申请日：2017-09-04
Applicant: 한국과학기술원
Abstract: 본 발명은 특정 위치가 변형된(modified) 목적 단백질의 제조방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 (a) 목적 단백질의 특정 위치에 아미노산을 첨가하여 변형시킬 위치를 반응기를 가지는 물질로 표지하는 단계; (b) 상기 위치의 표지를 활성화시키는 단계; 및 (c) 상기 활성화된 표지에 번역후변형(post translational modification, PTM) 작용기(moiety)를 부착시켜 변형된 단백질을 수득하는 단계를 포함하는 새로운 탄소-탄소 결합 기반 위치 특이적으로 변형된 목적 단백질의 제조방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 위치 특이적으로 변형된 목적 단백질의 제조 방법은 목적 단백질의 원하는 위치에 원하는 변형(modification)을 추가할 뿐만 아니라, 변형이 추가된 목적 단백질이 세포 내에 존재하는 목적 단백질과 동일한 효과를 나타내어 목적 단백질의 기능연구, 신약 스크리닝에 등에 유용하다.
Abstract translation: 本发明涉及生产在特定位点修饰的靶蛋白质的方法，更具体地涉及生产在特定位置修饰的靶蛋白质的方法， 在一个实施例中， （b）激活该地点的标签; （c）将翻译后修饰（PTM）功能部分连接到活化的标记上以获得修饰的蛋白质，新的基于碳 - 碳键的位点特异性修饰的靶蛋白 及其制造方法。 的根据本发明被改性，以及添加一个变形例（变形例）的兴趣位置的特定的蛋白质的制造方法，期望在靶蛋白的期望位置时，相同的效果所需的蛋白质，该修改的额外靶蛋白是存在于细胞 它对靶蛋白的功能研究，新药的筛选等都很有用。
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公开(公告)号：WO2022098160A1
公开(公告)日：2022-05-12
申请号：PCT/KR2021/016050
申请日：2021-11-05
Applicant: 한국과학기술원
Abstract: 일 양상은 비천연 아미노산이 위치-특이적으로 도입된 유전자 편집 단백질 및 이를 이용한 유전자 편집 방법에 관한 것이다. 구체적으로, 일 양상에 따르면 유전자 편집 단백질의 세포 내 전달 및 활성을 크게 향상시킬 수 있는 아미노산 서열상의 위치를 기능화함으로써 표적 세포 유전자 교정 효과를 극대화할 수 있으므로 in vivo 및 ex vivo에서 외부 자극이나 장비 없이 세포교정을 통한 치료제로서 유용하게 활용될 수 있다.
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公开(公告)号：KR101719751B1
公开(公告)日：2017-04-04
申请号：KR1020160052369
申请日：2016-04-28
Applicant: 한국과학기술원
Inventor： 박희성
Abstract: 본발명은활성이증가한 SepRS(-phosphoseryl-tRNA synthetase) 변이체및 EF-Tu변이체를이용하여인산화된단백질을제조하는방법에관한것으로, 더욱상세하게는, 목적단백질이나폴리펩티드의 mRNA에서최소한하나의코돈을인식하는 tRNA과분자진화기법을통해선별된 tRNA에포스포세린(phosphoserine, Sep)을아미노아실화시키는데특화된-포스포세릴-tRNA 합성효소(-phosphoseryl-tRNA synthetase, SepRS) 변이체및 tRNA과 SepRS 복합체를탈아실화로부터보호해주는 EF-Tu 변이체를이용하여, 특정위치에포스포세린을함입하여인산화단백질을제조하는방법에관한것이다. 본발명에따르면, SepRS 및 EF-Tu 변이체를이용하여인산화단백질을 L 당 mg 수율로생산할수 있어, 인산화효소를포함한다양한인산화단백질의생산, 항체생산, 단백질칩의제조, 신약개발을위한세포기반스크리닝등에유용하다.
Abstract translation: 本发明涉及一种用于制造使用SepRS（-phosphoseryl酰-tRNA合成酶）和突变EF-Tu的突变体磷酸化蛋白增加活性，更具体地，在与mRNA的所需蛋白质或多肽的至少一个密码子 磷脂酶雪儿-tRNA合成酶（-phosphoseryl tRNA合成酶，SepRS）和tRNA变体和SepRS复杂-tRNA识别太好字符通过进化技术的tRNA的Epos瓷（磷酸丝氨酸，9月）的氨基藜失火sikineunde特定选择 本发明涉及一种通过使用EF-Tu突变体在特定位点掺入磷ce烯来产生磷酸化蛋白质的方法，该突变体可防止脱酰作用。 根据本发明，用于生产多种磷酸化蛋白，抗体的产生，生产蛋白质芯片，药物开发的小区基站可以使用SepRS和EF-Tu的突变体以mg每收率L，包括激酶产生一个磷酸化蛋白 筛选等。
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公开(公告)号：KR1020160053885A
公开(公告)日：2016-05-13
申请号：KR1020160052369
申请日：2016-04-28
Applicant: 한국과학기술원
Inventor： 박희성
Abstract: 본발명은활성이증가한 SepRS(-phosphoseryl-tRNA synthetase) 변이체및 EF-Tu변이체를이용하여인산화된단백질을제조하는방법에관한것으로, 더욱상세하게는, 목적단백질이나폴리펩티드의 mRNA에서최소한하나의코돈을인식하는 tRNA과분자진화기법을통해선별된 tRNA에포스포세린(phosphoserine, Sep)을아미노아실화시키는데특화된-포스포세릴-tRNA 합성효소(-phosphoseryl-tRNA synthetase, SepRS) 변이체및 tRNA과 SepRS 복합체를탈아실화로부터보호해주는 EF-Tu 변이체를이용하여, 특정위치에포스포세린을함입하여인산화단백질을제조하는방법에관한것이다. 본발명에따르면, SepRS 및 EF-Tu 변이체를이용하여인산화단백질을 L 당 mg 수율로생산할수 있어, 인산화효소를포함한다양한인산화단백질의생산, 항체생산, 단백질칩의제조, 신약개발을위한세포기반스크리닝등에유용하다.
Abstract translation: 本发明涉及通过使用具有改善的活性的O-磷酸丝氨酰-tRNA合成酶（SepRS）突变体和EF-Tu突变体来制备磷酸化蛋白质的方法。 更具体地说，本发明涉及通过使用SepRS突变体和EF-Tu突变体将磷酸丝氨酸包括在特定位置来生产磷酸转移蛋白的方法，其中所述SepRS突变体专门用于氨基酰化磷酸丝氨酸（Sep）至tRNA（ 用于编码通过靶蛋白或多肽的mRNA中的分子进化方案分选的至少一个密码子和tRNA（Sep）的编码，并且EF-Tu突变体保护tRNA（Sep）和脱甲酰化的SepRS复合物。 根据本发明，通过使用SepRS和EF-Tu突变体可以以mg产率/ L生产磷酸化蛋白质，其可用于生产各种磷酸化蛋白质，包括磷酸酶，产生抗体，产生蛋白质芯片，以及进行基于细胞的 筛选开发新药。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：KR100784478B1
公开(公告)日：2007-12-11
申请号：KR1020050117353
申请日：2005-12-05
Applicant: 한국과학기술원
IPC: C07K1/36
CPC classification number: C12N15/1027 , C12N9/78 , C12N9/88 , C12N15/1044
Abstract: 본 발명은 새로운 기능을 갖는 단백질을 제조하는 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 (A) 기존에 존재하는 단백질 골격(protein scaffold)에 부여하기를 원하는 새로운 기능에 필요한 기능요소들을 설계하는
기능요소 설계 단계 ; (B) 설계된 기능요소들에 해당하는 두 개 이상의 유전자 단편들을 단백질 골격 유전자에 동시에 삽입하는
기능요소 삽입단계 ; 및 (C) 새로운 변이 유전자들이 삽입된 변이체들의 라이브러리로부터 새로운 기능을 가진 1차 변이체를 선별하고 선별된 1차 변이체의 임의의 유전자 부위에 돌연변이를 유발시켜 상기 기능이 1차 변이체보다 개량된 2차 변이체를 얻는
변이체 선별 및 개량단계 ;로 구성되는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 새로운 기능을 갖는 단백질을 제조하는 방법은 의약용 단백질의 개발 및 산업용 효소의 창출 등 생명공학 및 생물공학 분야에서 광범위하게 활용될 수 있다.
신기능 단백질, 단백질 골격, 단백질 진화, 유전자 재조합-
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公开(公告)号：KR1020140133744A
公开(公告)日：2014-11-20
申请号：KR1020130053365
申请日：2013-05-10
Applicant: 한국과학기술원
Inventor： 박희성
CPC classification number: C12P21/00 , C07K14/245 , C07K14/47 , C12P21/02 , C12Y601/01027 , Y02P20/52
Abstract: 본 발명은 활성이 증가한 SepRS(
O -phosphoseryl-tRNA synthetase) 변이체 및 EF-Tu변이체를 이용하여 인산화된 단백질을 제조하는 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는, 목적 단백질이나 폴리펩티드의 mRNA에서 최소한 하나의 코돈을 인식하는 tRNA
Sep 과 분자진화기법을 통해 선별된 tRNA
Sep 에 포스포세린(phosphoserine, Sep)을 아미노아실화 시키는데 특화된
O -포스포세릴-tRNA 합성효소(
O -phosphoseryl-tRNA synthetase, SepRS) 변이체 및 tRNA
Sep 과 SepRS 복합체를 탈아실화로부터 보호해주는 EF-Tu 변이체를 이용하여, 특정 위치에 포스포세린을 함입하여 인산화 단백질을 제조하는 방법에 관한 것이다.
본 발명에 따르면, SepRS 및 EF-Tu 변이체를 이용하여 인산화 단백질을 L 당 mg 수율로 생산할 수 있어, 인산화효소를 포함한 다양한 인산화단백질의 생산, 항체 생산, 단백질 칩의 제조, 신약 개발을 위한 세포 기반 스크리닝 등에 유용하다.Abstract translation: 本发明涉及使用具有增强活性的O-磷酸丝氨酰-tRNA合成酶（SepRS）和EF-Tu突变体产生磷酸化蛋白质的方法，更具体地说，涉及通过在特定位点掺入磷酸丝氨酸（Sep）而制备磷蛋白的方法 使用SepRS突变体，其专门用于氨基酸化tRNA ^ 9d识别靶蛋白或多肽的mRNA中的至少一个密码子和通过与Sep进行分子进化选择的tRNA ^ 9'和保护脱酰基的EF-Tu突变体 tRNA ^ Sep和SepRS的复合物。 根据本发明，可以使用SepRS和EF-Tu突变体以每mg的产量生产磷蛋白，因此，本发明可用于生产各种磷蛋白，包括磷酸化酶，产生抗体，产生抗体 蛋白质芯片和基于细胞的筛选开发新药。
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公开(公告)号：KR1020050106831A
公开(公告)日：2005-11-11
申请号：KR1020040031878
申请日：2004-05-06
Applicant: 한국과학기술원
Abstract: 본 발명은 방향족 기질에 대한 효소활성이 향상된 히단토이나제(D-hydantoinase) 변이체에 관한 것으로서, 구체적으로 바실러스 스테아로써머필러스 SD1(
Bacillus stearothermophilus SD1) 유래의 야생형 히단토이나제의 활성부위를 구성하는 3개의 루프(loop)에 위치한 소수성의 아미노산을 다른 아미노산으로 치환하여 수득되는, 방향족 치환기를 갖는 기질에 대하여 효소활성이 증진된 새로운 히단토이나제 변이체에 관한 것이다.
본 발명에 따른 히단토이나제 변이체는 야생형 히단토이나제에 비하여 방향족 기질에 대한 기질 특이성이 최대 150배 이상 향상되어 산업적으로 매우 유용하다.-
公开(公告)号：KR102013742B1
公开(公告)日：2019-11-04
申请号：KR1020170113338
申请日：2017-09-05
Applicant: 한국과학기술원 , 아주대학교산학협력단
IPC: C12N15/85 , C12N9/00 , C12N15/113 , A01K67/027
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