公开(公告)号：WO2011136613A2

公开(公告)日：2011-11-03

申请号：PCT/KR2011/003214

申请日：2011-04-29

Applicant: 한국과학기술원 ,  김학성 ,  박선영 ,  김완중 ,  김용태 ,  손영덕 ,  이상철 ,  김은경 ,  김성호 ,  김정회

Inventor： 김학성 ,  박선영 ,  김완중 ,  김용태 ,  손영덕 ,  이상철 ,  김은경 ,  김성호 ,  김정회

IPC: G01N33/533 ,  G01N33/68

CPC classification number: G01N33/746 ,  C12N15/85 ,  G01N33/6803 ,  G01N33/6842 ,  G01N2400/02

Abstract: 본 발명은 당 단백질 분석용 키트 및 이의 용도에 관한 것으로서, 보다 구체적으로 본 발명은 형광표지된 항체, 형광표지된 생체물질 및 지지체를 포함하는 당 단백질 분석용 키트, 상기 키트를 이용하여 당 단백질의 함량 및 당화 특성을 동시에 정량분석하는 이중 탐침법, 상기 키트를 이용하여 목적하는 당화 특성을 갖는 당단백질을 생산하는 단일세포를 선별하는 방법 및 상기 방법으로 선별된 목적하는 당화 특성을 갖는 당단백질을 생산하는 세포에 관한 것이다.

Abstract translation: 本发明涉及糖蛋白分析试剂盒及其用途，更具体地，涉及包含荧光素标记的抗体，荧光素标记的生物材料和载体的糖蛋白分析试剂盒，其涉及双探针方法， 使用试剂盒，同时对糖蛋白的含量和糖基化特征的定量分析，使用试剂盒选择产生具有所需糖基化特征的糖蛋白的单细胞的方法和选择的细胞 通过该方法，并产生具有所需糖基化特征的糖蛋白。

公开(公告)号：KR1020110092225A

公开(公告)日：2011-08-17

申请号：KR1020110010312

申请日：2011-02-01

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 김정회 ,  손영덕 ,  황진영 ,  정연태

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/52 ,  C07K14/505 ,  C12N15/18

CPC classification number: C07K14/505 ,  C07K14/524 ,  C07K14/705 ,  C12N9/1081 ,  C12N9/1205 ,  C12N9/90 ,  C12P21/005 ,  C12Y501/03014

Abstract: PURPOSE: A method for preparing recombinant glycoprotein is provided to overexpress three kinds of genes in a host cell and to produce glycoprotein with enhanced sialic acid content. CONSTITUTION: A method for preparing glycoprotein with enhanced sialic acid concent comprises: a step of preparing an expression vector containing a gene encoding UDP-GlcNAc 2-epimerase/ManNAc kinase(GNE/MNK), a gene encoding alpha-2,3-sialyltransferase, and a gene encoding a cytidine monophosphate(CMP)- sialic acid transporter; a step of transforming the expression vector to a host cell which produces glycoprotein with sialic acid bond; and a step of culturing the transformant and purifying the recombinant glycoprotein from the transformant.

Abstract translation: 目的：提供重组糖蛋白的制备方法，以过表达宿主细胞中的三种基因，产生唾液酸含量增加的糖蛋白。 构成：用于制备具有增强唾液酸浓度的糖蛋白的方法包括：制备含有编码UDP-GlcNAc 2-差向异构酶/ ManNAc激酶（GNE / MNK）的基因的表达载体的步骤，编码α-2,3唾液酸转移酶 ，以及编码胞苷酸单磷酸（CMP） - 唾液酸转运蛋白的基因; 将表达载体转化为产生具有唾液酸键的糖蛋白的宿主细胞的步骤; 以及培养转化体并从转化体纯化重组糖蛋白的步骤。

公开(公告)号：KR101322925B1

公开(公告)日：2013-10-29

申请号：KR1020110041180

申请日：2011-04-29

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 김학성 ,  박선영 ,  김완중 ,  김용태 ,  손영덕 ,  이상철 ,  김은경 ,  김성호 ,  김정회

IPC: G01N33/533 ,  G01N33/68 ,  G01N33/52

CPC classification number: G01N33/746 ,  C12N15/85 ,  G01N33/6803 ,  G01N33/6842 ,  G01N2400/02

Abstract: 본 발명은 형광표지된 항체, 형광표지된 생체물질 및 지지체를 포함하는 당 단백질 분석용 키트, 상기 키트를 이용하여 당 단백질의 함량 및 당화 특성을 동시에 정량분석하는 이중 탐침법, 상기 키트를 이용하여 목적하는 당화 특성을 갖는 당단백질을 생산하는 단일세포를 선별하는 방법 및 상기 방법으로 선별된 목적하는 당화 특성을 갖는 당단백질을 생산하는 세포에 관한 것이다. 본 발명의 당 단백질 분석용 키트를 이용하면, 단일세포가 생산하는 당 단백질의 양과 상기 당 단백질에 포함된 탄수화물 영역의 함량을 동시에 분석할 수 있고, 특정 탄수화물의 함량을 분석할 수 있으며, 목적하는 당화 특성을 갖는 당 단백질을 생산하는 세포를 선별할 수 있으므로, 산업적으로 가치 있는 당 단백질의 개발 및 생산에 널리 활용될 수 있을 것이다.

公开(公告)号：KR101241322B1

公开(公告)日：2013-03-11

申请号：KR1020110010312

申请日：2011-02-01

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 김정회 ,  손영덕 ,  황진영 ,  정연태

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/52 ,  C07K14/505 ,  C12N15/18

CPC classification number: C07K14/505 ,  C07K14/524 ,  C07K14/705 ,  C12N9/1081 ,  C12N9/1205 ,  C12N9/90 ,  C12P21/005 ,  C12Y501/03014

Abstract: 본 발명은 시알산 함량이 높은 재조합 당단백질의 제조 방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 263번 아미노산인 아르기닌을 류신으로 치환하거나, 또는 263번 아미노산인 아르기닌을 류신으로 치환하고 266번 아미노산인 아르기닌을 글루타민 또는 트립토판으로 치환하여 점 돌연변이를 유도한 UDP-GlcNAc 2-epimerase/ManNAc kinase(GNE/MNK) 효소는, 시티딘모노포스페이트(cytidine monophosphate, CMP)-시알산의 농도에 상관없이 에피머라제(epimerase)의 활성이 지속적으로 유지되고, 이를 과발현시킨 세포는 세포 내 CMP-시알산의 함량이 증가하며, 특히, 상기 점 돌연변이가 유도된 GNE/MNK, 인간 알파-2,3 시알산당전이효소 및 CMP-시알산 수송단백질 유전자를 동시에 과발현시킨 당단백질(에리스로포이에틴 또는 트롬보포이에틴) 생산 숙주세포에서는 세포 내 CMP-시알산 및 당단백질의 시알산 함량이 증가하므로, 상기 3가지 유전자의 시알산결합을 가진 재조합 당단백질 생산 숙주세포에서의 과발현은 시알산 함량이 증가된 당단백질의 제조에 유용하게 이용될 수 있다.

公开(公告)号：KR1020110120843A

公开(公告)日：2011-11-04

申请号：KR1020110041180

申请日：2011-04-29

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 김학성 ,  박선영 ,  김완중 ,  김용태 ,  손영덕 ,  이상철 ,  김은경 ,  김성호 ,  김정회

IPC: G01N33/533 ,  G01N33/68 ,  G01N33/52

CPC classification number: G01N33/746 ,  C12N15/85 ,  G01N33/6803 ,  G01N33/6842 ,  G01N2400/02

Abstract: PURPOSE: A kit comprising a labeled antibody, a fluorescence-labeled biosubstance, and a support is provided to analyze the content of specific carbohydrate. CONSTITUTION: A kit for glycoprotein analysis comprises: a fluorescence-labeled antibody which selectively binds to a protein region of the glycoprotein; a florescence-labeled biosubstance which selectively binds to carbohydrate region of the glycoprotein; and a support which binds to the glycoprotein. The biosubstance is lectin, antibody, aptamer, or peptides. The glycoprotein is purified glycoprotein or isolated from single cells. The support is coated with other antibodies which bind to the glycoprotein targeting the surface.

Abstract translation: 目的：提供包含标记抗体，荧光标记的生物物质和载体的试剂盒，以分析特定碳水化合物的含量。 构成：用于糖蛋白分析的试剂盒包括：选择性结合糖蛋白的蛋白质区域的荧光标记抗体; 选择性结合糖蛋白的碳水化合物区域的荧光标记的生物物质; 和与糖蛋白结合的载体。 生物体是凝集素，抗体，适体或肽。 糖蛋白是纯化的糖蛋白或从单细胞分离。 该载体用与靶向该表面的糖蛋白结合的其它抗体包被。