公开(公告)号：WO2016143931A1

公开(公告)日：2016-09-15

申请号：PCT/KR2015/002576

申请日：2015-03-17

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 정원일 ,  한용만 ,  김미영 ,  은혁수 ,  장미진

IPC: C12N5/071 ,  C12N5/02 ,  C12Q1/02 ,  G01N33/50

CPC classification number: C12N5/0672 ,  C12N5/067 ,  C12N2500/38 ,  C12N2501/12 ,  C12Q1/02 ,  C12Q1/26 ,  C12Q1/30 ,  C12Q1/32 ,  G01N33/50

Abstract: 본 발명은 인간 줄기세포 유래 간세포의 약물 대사 기능 개선 방법에 관한 것으로, 인간 줄기세포 유래 간세포는 인간 간세포와 모양은 유사하지만, 약물 또는 알코올 대사 관련 효소, 및 항산화 효소의 발현은 감소되어 있음을 확인하였고, 이에 인간 줄기세포 유래 간세포를 마우스 간성상세포와 공동배양한 결과, 알코올에 의한 독성이 줄어들어 간세포의 손상이나 세포 사멸 정도가 감소하였고, 약물 및 알코올 대사 관련 효소, 및 항산화 효소의 발현이 증가하는 것을 확인하였으며, 인간 줄기세포 유래 간세포를 마우스 간성상세포와 공동배양한 결과, 레티놀 관련 유전자 발현이 변화하였으며, 레티놀(retinol)을 레티노익산으로 대사하지 못하는 마우스에서 분리한 간성상세포와 인간 줄기세포 유래 간세포를 공동배양한 결과, 간세포의 손상이 감소하지않고, 약물 및 알코올 대사 관련 효소, 및 항산화 효소의 발현 변화가 나타나지않아, 인간 줄기세포 유래 간세포에 레티노익산을 처리한 결과, 약물 및 알코올 대사 관련 효소, 및 항산화 효소의 발현이 증가하였고, 세포 사멸 정도가 감소하는 것을 확인함으로써, 상기 인간 줄기세포 유래 간세포를 간성상세포와 공동배양하는 방법 및 인간 줄기세포 유래 간세포에 레티노익산을 처리하는 것을 인간 줄기세포 유래 간세포의 약물 대사 기능 개선 방법으로서 유용하게 사용할 수 있다.

Abstract translation: 本发明涉及一种改善人类干细胞来源的肝细胞药物代谢功能的方法。 尽管人干细胞衍生的肝细胞与人肝细胞形状相似，但已经证实药物或酒精代谢相关酶和抗氧化酶的表达已被降低。 因此，通过与小鼠肝星形细胞共培养人干细胞衍生的肝细胞，证实由于酒精引起的毒性降低，肝细胞损伤和细胞死亡程度降低，表达 药物和酒精代谢相关的酶和抗氧化酶已经增加。 此外，通过与小鼠肝星形细胞共培养人干细胞衍生的肝细胞，结果改变视黄醇相关基因表达。 此外，作为与人干细胞衍生的肝细胞共培养的结果，从不将视黄醇代谢成视黄酸的小鼠分离的肝星状细胞，肝细胞损伤没有降低，药物和酒精代谢的表达 - 相关酶和抗氧化酶没有改变。 因此，通过用视黄酸处理人干细胞衍生的肝细胞的结果，证实药物和酒精代谢相关酶和抗氧化酶的表达增加，细胞死亡程度降低。 因此，用肝星状细胞共培养人干细胞来源的肝细胞，用视黄酸处理来自人干细胞的肝细胞的方法，可以用作改善人干细胞的药物代谢功能的方法 来源的肝细胞。

公开(公告)号：KR101643555B1

公开(公告)日：2016-07-28

申请号：KR1020150034365

申请日：2015-03-12

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 정원일 ,  한용만 ,  은혁수 ,  장미진

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/53 ,  C12Q1/68 ,  G01N15/14 ,  G01N33/50

CPC classification number: G01N33/68 ,  C12N5/0602 ,  C12N2501/12 ,  C12N2506/02 ,  C12N2506/45 ,  C12Q1/68 ,  G01N15/14 ,  G01N33/5008 ,  G01N33/53

Abstract: 본발명은 STRA6(Stimulated by retinoic acid 6)를이용한기능적으로성숙된인간줄기세포유래간세포의선별방법에관한것으로, 인간줄기세포유래간세포를유세포분석기를통해서세포의크기(FSC) 및세포내 과립함량(SSC)으로분류하여미분화된세포를제거하였고, 인간줄기세포유래간세포를마우스간성상세포와공동배양하거나, 레티노익산또는레티노익산작용억제제인 LE540을처리한후 세포를분류하여확인한결과, 약물및 알코올대사관련효소, 및항산화효소의발현이공동배양으로증가하고, 분류한세포에서더욱증가하는것을확인하였고, 레티노익산처리로발현이증가하고, 레티노익산작용억제제처리로감소되는것을확인하였으며, 인간줄기세포유래간세포에레티노익산처리시 STRA6 발현이증가하고, 인간줄기세포유래간세포를마우스간성상세포와공동배양한후 STRA6로분류하였을때, 알코올및 약물대사관련효소, 및항산화효소의발현이현저하게증가되는것을확인함으로써, 상기인간줄기세포유래간세포의 STRA6 발현수준을측정하여, STRA6 발현수준이높은간세포를분리하는방법을약물대사기능이향상된인간줄기세포유래간세포의선별방법으로서유용하게사용할수 있다.

Abstract translation: 本发明涉及通过使用由视黄酸6（STRA6）刺激的功能老化的人干细胞来源的肝细胞分选方法。 人类干细胞衍生的肝细胞通过细胞大小（FSC）和细胞内颗粒含量（SSC）通过皮肤细胞分析仪分类，因此去除未分化的细胞。 通过确认人干细胞衍生的肝细胞与小鼠肝星状细胞共培养或用视黄酸或作为视黄酸作用抑制剂的LED540处理后的细胞分类的结果，已经证实， 药物和酒精代谢相关酶和抗氧化酶通过共培养增加，并且在分级细胞中增加。 此外，已经确认通过视黄酸处理增加表达，并且通过视黄酸作用抑制剂治疗降低表达。 此外，当人类蒸汽细胞衍生的肝细胞用视黄酸处理时，已经证实了STRA6表达增加，并且当人类蒸汽细胞衍生的肝细胞是...时，药物和酒精代谢相关酶和抗氧化酶的表达显着增加 与小鼠肝星状细胞共培养，并用STRA6分类。 因此，通过测定人干细胞来源的肝细胞的STRA6表达水平，分离具有高STRA6表达水平的肝细胞的方法可用作用于分选具有改善的药物代谢功能的人干细胞来源的肝细胞的方法。

公开(公告)号：KR101646565B1

公开(公告)日：2016-08-12

申请号：KR1020150034271

申请日：2015-03-12

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 정원일 ,  한용만 ,  김미영 ,  은혁수 ,  장미진

IPC: A61K31/203 ,  A61K35/407 ,  A61K35/12

CPC classification number: A61K31/203 ,  A61K35/12 ,  A61K35/407

Abstract: 본발명은레티노익산(retinoic acid)을이용한인간줄기세포유래간세포의약물대사기능개선방법에관한것으로, 인간줄기세포유래간세포는인간간세포와모양은유사하지만, 약물또는알코올대사관련효소, 및항산화효소의발현은감소되어있음을확인하였고, 이에인간줄기세포유래간세포를마우스간성상세포와공동배양한결과, 레티놀관련유전자발현이변화하였으며, 레티놀(retinol)을레티노익산으로대사하지못하는마우스에서분리한간성상세포와인간줄기세포유래간세포를공동배양한결과, 간세포의손상이감소하지않고, 약물및 알코올대사관련효소, 및항산화효소의발현변화가나타나지않아, 인간줄기세포유래간세포에레티노익산을처리한결과, 약물및 알코올대사관련효소, 및항산화효소의발현이증가하였고, 세포사멸정도가감소하는것을확인함으로써, 상기인간줄기세포유래간세포에레티노익산을처리하는것을인간줄기세포유래간세포의약물대사기능개선방법으로서유용하게사용할수 있다.

Abstract translation: 本发明涉及通过使用视黄酸改善人干细胞衍生的肝细胞的药物代谢功能的方法。 尽管人类干细胞衍生的肝细胞形状与人类肝细胞相似，但证实药物或酒精代谢相关酶和抗氧化酶的表达已经降低。 因此，通过与小鼠肝星状细胞共培养人干细胞衍生的肝细胞，证实了与视网膜相关的基因表达改变，并且作为通过共培养人干细胞来源的肝细胞的结果 从不将视黄醇代谢成视黄酸的小鼠分离的肝星状细胞，证实肝细胞损伤没有降低，药物和酒精代谢相关酶和抗氧化酶的表达没有改变。 另外，通过用视黄酸处理人干细胞衍生的肝细胞的结果，证实药物和酒精代谢相关酶和抗氧化酶的表达增加，细胞死亡程度降低。 因此，用视黄酸治疗人干细胞来源的肝细胞的方法可用作改善人干细胞来源的肝细胞的药物代谢功能的方法。

公开(公告)号：KR101694315B1

公开(公告)日：2017-01-09

申请号：KR1020150034270

申请日：2015-03-12

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 정원일 ,  한용만 ,  은혁수 ,  장미진

IPC: A61K35/407 ,  A61K35/12

Abstract: 본발명은간성상세포(hepatic stellate cells, HSCs)를이용한인간줄기세포유래간세포의약물대사기능개선방법에관한것으로, 인간줄기세포유래간세포는인간간세포와모양은유사하지만, 약물또는알코올대사관련효소, 및항산화효소의발현은감소되어있음을확인하였고, 이에인간줄기세포유래간세포를마우스간성상세포와공동배양한결과, 알코올에의한독성이줄어들어간세포의손상이나세포사멸정도가감소하였고, 약물및 알코올대사관련효소, 및항산화효소의발현이증가하는것을확인함으로써, 상기인간줄기세포유래간세포를간성상세포와공동배양하는방법을인간줄기세포유래간세포의약물대사기능개선방법으로서유용하게사용할수 있다.

Abstract translation: 本发明涉及使用肝星状细胞（HSC）改善人干细胞衍生的肝细胞的药物代谢功能的方法。 尽管人干细胞衍生的肝细胞与人肝细胞形状相似，但证实药物或酒精代谢相关酶和抗氧化酶的表达降低。 因此，通过与小鼠肝星形细胞共培养人干细胞衍生的肝细胞，证实由于酒精引起的毒性降低，肝细胞损伤和细胞死亡程度降低，并且 药物和酒精代谢相关酶和抗氧化酶的表达增加。 因此，与肝星状细胞共培养人干细胞来源的肝细胞的方法可用作改善人干细胞衍生的肝细胞的药物代谢功能的方法。

公开(公告)号：KR1020160109576A

公开(公告)日：2016-09-21

申请号：KR1020150034270

申请日：2015-03-12

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 정원일 ,  한용만 ,  은혁수 ,  장미진

IPC: A61K35/407 ,  A61K35/12

CPC classification number: A61K35/407 ,  A61K35/12

Abstract: 본발명은간성상세포(hepatic stellate cells, HSCs)를이용한인간줄기세포유래간세포의약물대사기능개선방법에관한것으로, 인간줄기세포유래간세포는인간간세포와모양은유사하지만, 약물또는알코올대사관련효소, 및항산화효소의발현은감소되어있음을확인하였고, 이에인간줄기세포유래간세포를마우스간성상세포와공동배양한결과, 알코올에의한독성이줄어들어간세포의손상이나세포사멸정도가감소하였고, 약물및 알코올대사관련효소, 및항산화효소의발현이증가하는것을확인함으로써, 상기인간줄기세포유래간세포를간성상세포와공동배양하는방법을인간줄기세포유래간세포의약물대사기능개선방법으로서유용하게사용할수 있다.

Abstract translation: 本发明涉及使用肝星状细胞（HSC）改善人干细胞衍生的肝细胞的药物代谢功能的方法。 尽管人干细胞衍生的肝细胞与人肝细胞形状相似，但证实药物或酒精代谢相关酶和抗氧化酶的表达降低。 因此，通过与小鼠肝星形细胞共培养人干细胞衍生的肝细胞，证实由于酒精引起的毒性降低，肝细胞损伤和细胞死亡程度降低，并且 药物和酒精代谢相关酶和抗氧化酶的表达增加。 因此，与肝星状细胞共培养人干细胞来源的肝细胞的方法可用作改善人干细胞来源的肝细胞的药物代谢功能的方法。

公开(公告)号：KR1020110020468A

公开(公告)日：2011-03-03

申请号：KR1020090078088

申请日：2009-08-24

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 한용만 ,  전납둥 ,  박상욱 ,  장미진

IPC: C12N5/00 ,  C12N7/00

CPC classification number: C12N5/0606 ,  C12N5/0662 ,  C12N2501/115 ,  C12N2501/155 ,  C12N2501/16 ,  C12N2501/415 ,  C12N2501/999 ,  C12N2506/02

Abstract: PURPOSE: A method for differentiating mesenchymal stem cells from human embryonic stem cells is provided to obtain a large amount of mesenchymal stem cells used in cell therapy. CONSTITUTION: A composition for inducing embryonic stem cell(hESC)-derived mesoderm differentiation contains Activin A, 6-bromoindirubin-3'-oxime(BIO), and BMP4. Activin A, 6-bromoindirubin-3'-oxime(BIO), and BMP4 are contained in a final medium in a concentration of 2-5 ng/ml, 2-5 mM, and 10-20 ng/ml, respectively. A method for differentiating hESC-derived mesoderm precursor comprises: a step of culturing hESC in a conditioned medium for 1-3 days; and a step of culturing ESCs in the final medium for 3-5 days.

Abstract translation: 目的：提供一种区分间充质干细胞与人类胚胎干细胞的方法，以获得大量用于细胞治疗的间充质干细胞。 构成：用于诱导胚胎干细胞（hESC）衍生的中胚层分化的组合物含有活化素A，6-溴靛蓝素-3'-肟（BIO）和BMP4。 活化素A，6-溴靛玉红-3'-肟（BIO）和BMP4分别以2-5ng / ml，2-5mM和10-20ng / ml的浓度包含在最终培养基中。 用于分离hESC衍生的中胚层前体的方法包括：在条件培养基中培养1-5天的hESC的步骤; 以及在最终培养基中培养ESCs 3-5天的步骤。

公开(公告)号：KR101193541B1

公开(公告)日：2012-10-22

申请号：KR1020090078088

申请日：2009-08-24

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 한용만 ,  전납둥 ,  박상욱 ,  장미진

IPC: C12N5/00 ,  C12N7/00

CPC classification number: C12N5/0606 ,  C12N5/0662 ,  C12N2501/115 ,  C12N2501/155 ,  C12N2501/16 ,  C12N2501/415 ,  C12N2501/999 ,  C12N2506/02

Abstract: 본 발명은 조성물이 최적화된 배지에서 배양함으로써 인간 배아줄기세포를 중간엽 줄기세포로 분화시키는 방법에 관한 것으로, 구체적으로 TGF-β(Transforming growth factor-β), WNT 및 BMP(Bone morphogenic protein) 신호전달 경로를 활성화함으로써 중배엽을 유도한 후, bFGF 및/또는 PDGF-BB(Platelet-derived growth factor beta polypeptide)의 처리에 의해 중간엽 줄기세포를 제조하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법은 세포기반 치료에 유용한 중간엽 줄기세포를 대량으로 제공하는 데에 유용하게 이용될 수 있다.
중간엽 줄기세포, 중배엽, 인간 배아줄기세포, TGF-β(Transforming growth factor-β), WNT, BMP(Bone morphogenic protein), bFGF, PDGF-BB(Platelet-derived growth factor beta polypeptide)