公开(公告)号：WO2012128577A2

公开(公告)日：2012-09-27

申请号：PCT/KR2012/002091

申请日：2012-03-22

Applicant: 한국생명공학연구원 ,  한국과학기술원 ,  이승구 ,  김학성 ,  김유정 ,  이상철 ,  한지은 ,  김수진 ,  손정훈 ,  하재석

Inventor： 이승구 ,  김학성 ,  김유정 ,  이상철 ,  한지은 ,  김수진 ,  손정훈 ,  하재석

IPC: C12Q1/02 ,  C12N15/63 ,  G01N33/15 ,  G01N33/53 ,  G01N33/68

CPC classification number: C07K14/195 ,  C07K14/46 ,  C07K14/461 ,  C07K14/705 ,  C07K2319/35 ,  C07K2319/70 ,  C12N15/70 ,  C12Q1/6897 ,  G01N33/5023 ,  G06F19/16

Abstract: 본 발명은 LRR(Leucine rich repeat) 모듈의 반복적 조합에 의하여 구성된, LRR 단백질의 패혈증 저해 단백질 치료제로서의 효능을 분석하고, 서열변이 라이브러리로부터 우수한 저해효능을 보이는 단백질 치료제를 스크리닝하는 어세이 시스템의 구축에 관한 것이다. 보다 구체적으로, LPS 신호 전달 수용체가 표면에 발현된 세포주를 이용한 어세이 시스템에 정제한 MD-2 단백질을 첨가하는 단계를 포함하는 패혈증 단백질 치료제의 효능 분석 방법 또는 스크리닝 방법, THP-1 세포주에 정제한 외래 MD-2 단백질을 첨가하는 단계를 포함하는 패혈증 단백질 치료제의 효능 분석 방법 또는 스크리닝 방법, 상기 효능 분석용 또는 스크리닝용 세포주, 상기 세포주 및 정제한 외래 MD-2를 포함하는 패혈증 치료제 스크리닝용 또는 효능 분석용 키트에 관한 것이다.

Abstract translation: 本发明涉及用于分析LRR（富含亮氨酸重复）蛋白质的性能的测定系统的构建，其由LRR模块的重复组合构成，作为败血病抑制蛋白质治疗剂，并用于筛选蛋白质治疗剂， 从序列变异库显示出优异的抑制性能。 更具体地，本发明涉及：败血病蛋白治疗剂的性能分析方法或筛选方法，包括将纯化的MD-2蛋白加入到使用其中表达LPS信号传递受体的细胞系的测定系统的步骤 表面 用于败血病蛋白治疗剂的性能分析方法或筛选方法，包括将纯化的外源MD-2蛋白加入到THP-1细胞系中的步骤; 用于性能分析或筛选的细胞系; 以及用于败血症治疗剂筛选或性能分析的试剂盒，其包含细胞系和纯化的外源MD-2。

公开(公告)号：KR1020130098089A

公开(公告)日：2013-09-04

申请号：KR1020120019927

申请日：2012-02-27

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 김학성 ,  이중재 ,  이상철 ,  한지은 ,  최정민

IPC: C07K19/00 ,  C07K14/195 ,  C07K14/46 ,  C12N15/62

Abstract: PURPOSE: A polypeptide is provided to suppress the activity of interleukin-6 (IL-6) with higher affinity than IL-6 receptor, thereby developing an agent for preventing or treating IL-6 related diseases. CONSTITUTION: A polypeptide which specifically binds to IL-6 contains N-terminal of internaline B, a modified repeat module of variable lymphocyte receptor (VLR), and C-terminal of VLR. The polypeptide has one amino acid sequence of sequence numbers 9 and 11-21. The polypeptide suppresses the activity of IL-6 by being conjugated to IL-6.

Abstract translation: 目的：提供多肽以比IL-6受体更高的亲和力抑制白细胞介素-6（IL-6）的活性，从而开发用于预防或治疗IL-6相关疾病的药剂。 构成：特异性结合IL-6的多肽含有内含子B的N-末端，VLR的可变淋巴细胞受体（VLR）的修饰重复单元和VLR的C-末端。 多肽具有序列号9和11-21的一个氨基酸序列。 该多肽通过与IL-6缀合而抑制IL-6的活性。

公开(公告)号：KR1020110099600A

公开(公告)日：2011-09-08

申请号：KR1020100018735

申请日：2010-03-02

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 김학성 ,  이지오 ,  김동섭 ,  이상철 ,  이병철 ,  한지은 ,  이중재 ,  박근완 ,  홍승표

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/63 ,  C07K1/16

Abstract: 본 발명은 인터날린 단백질의 N-말단 및 LRR (Leucine rich repeat) 패밀리 단백질이 융합된 수용성 폴리펩타이드에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 인터날린 단백질의 N-말단 및 LRR 패밀리 단백질이 융합된 수용성 폴리펩타이드, 상기 폴리펩타이드를 제조하는 방법, 상기 폴리펩타이드를 코딩하는 핵산 서열을 포함하는 벡터, 벡터를 포함하는 숙주세포, 숙주세포 내에서 벡터를 발현시켜서 수용성 및 접힘이 향상된 융합 폴리펩타이드를 생산하는 방법 및 융합 폴리펩타이드의 수용성 및 접힘을 향상시키는 방법에 관한 것이다.

公开(公告)号：KR101219628B1

公开(公告)日：2013-01-10

申请号：KR1020100018735

申请日：2010-03-02

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 김학성 ,  이지오 ,  김동섭 ,  이상철 ,  이병철 ,  한지은 ,  이중재 ,  박근완 ,  홍승표

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/63 ,  C07K1/16

Abstract: 본 발명은 인터날린 단백질의 N-말단 및 LRR (Leucine rich repeat) 패밀리 단백질이 융합된 수용성 폴리펩타이드에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 인터날린 단백질의 N-말단 및 LRR 패밀리 단백질이 융합된 수용성 폴리펩타이드, 상기 폴리펩타이드를 제조하는 방법, 상기 폴리펩타이드를 코딩하는 핵산 서열을 포함하는 벡터, 벡터를 포함하는 숙주세포, 숙주세포 내에서 벡터를 발현시켜서 수용성 및 접힘이 향상된 융합 폴리펩타이드를 생산하는 방법 및 융합 폴리펩타이드의 수용성 및 접힘을 향상시키는 방법에 관한 것이다.

公开(公告)号：KR1020120107741A

公开(公告)日：2012-10-04

申请号：KR1020110025446

申请日：2011-03-22

Applicant: 한국생명공학연구원 ,  한국과학기술원

Inventor： 이승구 ,  김학성 ,  김유정 ,  이상철 ,  한지은 ,  이상준 ,  김수진 ,  손정훈 ,  하재석

IPC: C12Q1/02 ,  C12N15/63 ,  G01N33/15 ,  G01N33/53

CPC classification number: C07K14/195 ,  C07K14/46 ,  C07K14/461 ,  C07K14/705 ,  C07K2319/35 ,  C07K2319/70 ,  C12N15/70 ,  C12Q1/6897 ,  G01N33/5023 ,  G06F19/16

Abstract: PURPOSE: An assay system for screening a therapeutic agent is provided to maintain structural stability and to analyze the efficacy of a protein therapeutic agent. CONSTITUTION: A method for analyzing the efficacy of a protein therapeutic agent for treating sepsis comprises: a step of transducing a vector with an expression cassette containing a NF-kappaB which binds a motif-conjugated promoter and a gene encoding a reporter protein, and a vector with an expression cassette containing NF-kappaB which binds a motif-free promoter and a gene encoding the reporter protein into a cell line on which an LPS signal transduction receptor is expressed; a step of mixing purified MD-2(myeloid differentiation protein-2), LPS and protein therapeutic agent for treating sepsis; a step of contacting the mixture with the cell line; and a step of determining whether a contacted experimental group has a higher efficacy than a control group when expression level of the reporter protein is less than the control group. [Reference numerals] (AA) Luciola cruciata luciferase; (BB) Renilla luciferase; (CC) LAR II reagent; (DD) Stop&Glow reagent; (EE) Firefly/Renilla = TLR4/MD-2 activation index; (FF) TMB substrate; (GG) Cytokine TNF-alpha, IL-6, etc.

Abstract translation: 目的：提供用于筛选治疗剂的测定系统以维持结构稳定性并分析蛋白质治疗剂的功效。 构成：用于分析蛋白质治疗剂用于治疗败血症的功效的方法包括：用含有结合基序缀合的启动子的NF-κB和编码报道蛋白的基因的表达盒转导载体的步骤，以及 载体，其含有含有免疫启动子和编码报告蛋白的基因的NF-κB的表达盒进入表达LPS信号转导受体的细胞系中; 混合纯化的MD-2（髓样分化蛋白-2），LPS和治疗败血症的蛋白质治疗剂的步骤; 使混合物与细胞系接触的步骤; 以及当报道蛋白的表达水平低于对照组时，确定接触的实验组是否具有比对照组更高的功效的步骤。 （参考号）（AA）Luciola cruciata萤光素酶; （BB）海肾萤光素酶; （CC）LAR II试剂; （DD）停止＆发光试剂; （EE）萤火虫/ Renilla = TLR4 / MD-2激活指数; （FF）TMB底物; （GG）细胞因子TNF-α，IL-6等

公开(公告)号：KR1020120022453A

公开(公告)日：2012-03-12

申请号：KR1020100086055

申请日：2010-09-02

Applicant: 한국과학기술원 ,  한국생명공학연구원

Inventor： 김학성 ,  이상철 ,  한지은 ,  이중재 ,  김동섭 ,  홍승표 ,  박근완 ,  이승구 ,  하재석 ,  김유정

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/63 ,  A61P31/00

Abstract: PURPOSE: A novel polypeptide which specifically binds to MD-2 protein is provided to design a therapeutic agent protein for treating sepsis using VLR scaffolding protein. CONSTITUTION: A polypeptide which specifically binds to MD-2(myeloid differentiation protein-2) protein fused N-terminal of internalin B protein, VLR(vriable lymphocyte receptor)-modified repetitive module, and C-terminal of VLR protein. The polypeptide is sequence number 2, 3, 4, or 5. A repetitive module with high stability through consensus design is a repetitive module of sequence formula 1(LTNLxxLxLxxNQLQSLPxGVFDK). A method for preparing the polypeptide comprises: a step of preparing a vector containing a nucleic acid encoding the polypeptide; a step of introducing the vector to host cells; and a step of collecting polypeptides from the host cells.

Abstract translation: 目的：提供特异性结合MD-2蛋白的新型多肽，以设计使用VLR脚手架蛋白治疗败血症的治疗剂蛋白质。 构成：特异性结合MD-2（骨髓分化蛋白-2）蛋白的多肽融合内蛋白B蛋白的N末端，VLR（可变淋巴细胞受体）修饰的重复模块和VLR蛋白的C末端。 多肽是序列号2,3,4或5.通过共有设计具有高稳定性的重复模块是序列式1（LTNLxxLxLxxNQLQSLPXGVFDK）的重复模块。 制备该多肽的方法包括：制备含有编码该多肽的核酸的载体的步骤; 将载体引入宿主细胞的步骤; 以及从宿主细胞收集多肽的步骤。

公开(公告)号：KR101356075B1

公开(公告)日：2014-02-12

申请号：KR1020120019927

申请日：2012-02-27

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 김학성 ,  이중재 ,  이상철 ,  한지은 ,  최정민

IPC: C07K19/00 ,  C07K14/195 ,  C07K14/46 ,  C12N15/62

Abstract: 본 발명은 인터루킨-6과 결합하여 그의 활성을 저해할 수 있는 폴리펩타이드, 상기 폴리펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현벡터, 상기 발현벡터가 도입된 형질전환체 및 상기 형질전환체를 이용하여 상기 폴리펩타이드를 생산하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 폴리펩타이드는 자연계에 존재하는 IL-6의 수용체(IL-6Ra)보다도 높은 친화력으로 IL-6에 결합하여 그의 활성을 억제할 수 있으므로, IL-6 관련 질환의 예방 또는 치료용 제제의 개발에 널리 활용될 수 있을 것이다.

公开(公告)号：KR101255682B1

公开(公告)日：2013-04-18

申请号：KR1020100086055

申请日：2010-09-02

Applicant: 한국과학기술원 ,  한국생명공학연구원

Inventor： 김학성 ,  이상철 ,  한지은 ,  이중재 ,  김동섭 ,  홍승표 ,  박근완 ,  이승구 ,  하재석 ,  김유정

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/63 ,  A61P31/00

Abstract: 본 발명은 MD-2 (Myeloid differentiation protein-2) 단백질과 특이적으로 결합하는 신규한 폴리펩타이드에 관한 것이다. 보다 구체적으로 인터날린 B 단백질의 N-말단, VLR (Variable Lymphocyte Receptor) 단백질의 변형된 반복모듈 및 VLR 단백질의 C-말단이 융합된, MD-2 단백질에 특이적으로 결합하는 폴리펩타이드, 상기 폴리펩타이드를 코딩하는 핵산, 상기 핵산을 포함하는 벡터, 상기 벡터로 형질전환된 숙주세포, 숙주세포 내에서 벡터를 발현시켜서 상기 폴리펩타이드를 생산하는 방법 및 상기 폴리펩타이드를 포함하는 패혈증 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.