세포 외 미세환경 기반의 wnt 신호 조절을 이용한 줄기세포의 심근세포로의 분화방법

    公开(公告)号:KR101826794B1

    公开(公告)日:2018-02-08

    申请号:KR1020160075149

    申请日:2016-06-16

    Abstract: 본발명은세포외 미세환경을모사할수 있는매트리겔(matrigel)을기반으로하여, wnt 신호조절을이용한줄기세포의심근세포(cardiomyocytes)로의분화방법에관한것으로, 구체적으로인간다능성줄기세포(human pluripotent stem cell; hPSCs)의분화시작단계(d-3)에서세포외 3차원미세환경을매트리겔(Matrigel)을이용하여구성한후, wnt 신호를활성및 억제할수 있는소분자(CHIR99021, IWP4)를처리한결과, 높은심근세포분화성공률, 현저한중배엽유도촉진, 및효과적인심근세포로의분화유도(84%)를확인하였고, FACS 분석을통해심근세포특이적마커인 cTnT가 84% 가량검출되어, 본발명의심근세포분화기술은종래의기술보다현저한심근세포분화효과가있음을확인하였다.

    인간 다능성 줄기세포로부터 유래된 심근세포를 이용한 in vitro 심장독성 평가 기술

    公开(公告)号:KR101916393B1

    公开(公告)日:2018-11-08

    申请号:KR1020160115572

    申请日:2016-09-08

    Abstract: 본발명은세포외 미세환경을모사할수 있는매트리겔(matrigel)을기반으로, 인간다능성줄기세포를심근세포(cardiomyocytes)로분화시킨후, 전기생리학적방식으로약물-유도성심장독성을평가하는방법에관한것으로, 구체적으로인간다능성줄기세포(human pluripotent stem cell; hPSCs)의분화시작단계(d-3)에서세포외 3차원미세환경을매트리겔(Matrigel)을이용하여구성한후, wnt 신호를활성및 억제할수 있는소분자(CHIR99021, IWP4)를처리하여, 심근세포분화성공률이 92%를나타냈으며, 중배엽으로의유도를현저히촉진하고심근세포로의분화를매우효과적으로유도할수 있음을확인하였다(84%). 또한분화를마친심근세포에서패치클램프(patch clamp) 실험기법을통해전기생리학적특성을확인하여인간다능성줄기세포유래심근세포(hPSC-CMs)가인체내 심근세포와유사할뿐만아니라전기생리학적특성및 약물유발성부정맥을효과적으로재현할수 있음을확인하였고, 잠재적인부정맥유발성약물들의독성평가시험모델로써사용할수 있음을최종확인하여, 본발명의인간다능성줄기세포로부터유래된심근세포는약물-유도성심장독성을평가하는방법에사용될수 있다.

    세포 외 미세환경 기반의 wnt 신호 조절을 이용한 줄기세포의 심근세포로의 분화방법
    4.
    发明公开
    세포 외 미세환경 기반의 wnt 신호 조절을 이용한 줄기세포의 심근세포로의 분화방법 审中-实审
    基于细胞外微环境的wnt信号调控将干细胞分化为心肌细胞

    公开(公告)号:KR1020170141995A

    公开(公告)日:2017-12-27

    申请号:KR1020160075149

    申请日:2016-06-16

    Abstract: 본발명은세포외 미세환경을모사할수 있는매트리겔(matrigel)을기반으로하여, wnt 신호조절을이용한줄기세포의심근세포(cardiomyocytes)로의분화방법에관한것으로, 구체적으로인간다능성줄기세포(human pluripotent stem cell; hPSCs)의분화시작단계(d-3)에서세포외 3차원미세환경을매트리겔(Matrigel)을이용하여구성한후, wnt 신호를활성및 억제할수 있는소분자(CHIR99021, IWP4)를처리한결과, 높은심근세포분화성공률, 현저한중배엽유도촉진, 및효과적인심근세포로의분화유도(84%)를확인하였고, FACS 분석을통해심근세포특이적마커인 cTnT가 84% 가량검출되어, 본발명의심근세포분화기술은종래의기술보다현저한심근세포분화효과가있음을확인하였다.

    Abstract translation: 本发明是基于基质胶(基质胶),其可以模拟微环境的细胞外涉及一种有区别的方式对Wnt信号控制使用一个单一系干细胞,心脏肌细胞(心肌细胞)中,所述多能干细胞中特异性流(人 多能干细胞; hPSCs)分钟屏幕过程开始步骤(d-3)的胞外三维然后使用微环境基质胶(基质胶),活性和抑制Wnt信号是小分子,其配置(CHIR99021,IWP4中) 常数和检测到的高的心肌细胞的分化成功率,显著中胚层诱导促进,并证实了诱导的(84%)的有效的心肌细胞,通过肌钙蛋白T的FACS分析心肌细胞特异性标记物的分化的是约84%,在本发明 已经证实,与常规技术相比,区分心肌分化和心肌分化的技术对心肌细胞分化具有显着作用。

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