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公开(公告)号：CN116855532A
公开(公告)日：2023-10-10
申请号：CN202310811822.7
申请日：2023-07-04
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于骨干载体的RNAi表达框及相应载体和应用。本发明的表达框可以抑制MLH1基因表达并且实现了引导编辑后将其切除。本发明的骨干载体包括融合蛋白、pegRNA和OsMLH RNAi表达框和激活Cre重组酶表达的表达框；所述融合蛋白为Cas9切刻酶或其变体、反转录酶组成的融合蛋白。pegRNA包含靶向目的DNA片段的sgRNA、逆转录模板和引物结合位点、连接得到的RNA分子。本发明所述的骨干质粒载体中，pegRNA表达框和融合蛋白表达框、OsMLH RNAi表达框及Cre表达框位于同一双元载体中。本发明的PE‑MLH1i‑Cre引导编辑系统不仅大大提高了编辑靶点的编辑效率，并能获得纯合突变植株，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN119351600A
公开(公告)日：2025-01-24
申请号：CN202411494402.1
申请日：2024-10-24
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及水稻筛选分子标记技术领域，具体涉及一种快速筛选抗除草剂水稻种质的方法、CAPS分子标记及其应用。方法包括以下步骤：提取待测水稻种质植株的基因组DNA；以基因组DNA为模板，利用引物进行PCR、酶切后，检测是否含有89bp、171bp和260bp的条带，当仅含有260bp的条带时，对应待测水稻种质为非抗除草剂水稻，当含有89bp和171bp的两条条带时，对应待测水稻种质为抗除草剂水稻；本发明通过检测CAPS分子标记检测基因型，对水稻除草剂抗性进行鉴定和预测，避免了环境因子对表型鉴定的不利影响，且本发明PCR扩增稳定，检测准确度大大提高。
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公开(公告)号：CN116855518B
公开(公告)日：2024-02-13
申请号：CN202310959199.X
申请日：2023-08-01
Applicant: 合肥戬谷生物科技有限公司 , 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种植物抗除草剂EPSPS突变型基因及其应用。本发明还提供了植物抗除草剂EPSPS突变型蛋白、表达盒和重组载体。本申请的发明人通过实验证明，包含本发明的植物抗除草剂EPSPS突变型基因或植物抗除草剂EPSPS突变型蛋白的植物，尤其是水稻，对草甘膦除草剂具有显著的抗性，能够在该除草剂中几乎不受影响地正常生长，而相同条件下野生型植株则生长受到显著抑制，本发明的该基因突变体具有巨大的市场经济前景。
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公开(公告)号：CN116814677A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202310793261.2
申请日：2023-06-30
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种提高引导编辑效率的融合蛋白表达框及相应骨架载体和应用。本发明的骨干载体包括PE融合蛋白、pegRNA；所述融合蛋白为Cas9切刻酶或其变体、反转录酶和MLH基因破坏域序列组成的融合蛋白。pegRNA包含靶向目的DNA片段的sgRNA、逆转录模板和引物结合位点、连接得到的RNA分子。本发明所述骨干质粒载体中，融合蛋白和pegRNA表达框表达框位于同一双元载体中，Cas9核酸酶表达框由ZmUBI启动子，融合蛋白编码序列和35s终止子依次构成；pegRNA表达框依次由35S‑CmYLCV‑U6复合启动子、tRNA基因序列、壮观霉素抗性基因SpR、RNA核酶HDV序列、EQ序列和polyT‑HSPt复合终止子组成。本发明的ePE2‑OsMLHdn引导编辑系统不仅大大提高了编辑靶点的编辑效率，并能获得纯合突变植株，具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN119060966A
公开(公告)日：2024-12-03
申请号：CN202411334640.6
申请日：2024-09-24
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及一种水稻ACCase突变型蛋白及其应用。本发明提供了一种水稻ACCase突变型蛋白，所述水稻ACCase突变型蛋白为野生型水稻ACCase蛋白的氨基酸序列在第2038位处发生突变。含有本发明的水稻ACCase突变蛋白的转基因水稻在施用1倍推荐使用浓度的乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂后，植株仍然正常生长发育和结实，而野生型水稻幼苗在施用1倍推荐使用浓度的乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂后，植株死亡，并且含有在第2038位处的氨基酸序列由色氨酸突变半胱氨酸的突变型蛋白的转基因水稻在施用8倍推荐使用浓度的乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂后，植株仍然正常生长发育和结实。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116855518A
公开(公告)日：2023-10-10
申请号：CN202310959199.X
申请日：2023-08-01
Applicant: 合肥戬谷生物科技有限公司 , 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明公开了一种植物抗除草剂EPSPS突变型基因及其应用。本发明还提供了植物抗除草剂EPSPS突变型蛋白、表达盒和重组载体。本申请的发明人通过实验证明，包含本发明的植物抗除草剂EPSPS突变型基因或植物抗除草剂EPSPS突变型蛋白的植物，尤其是水稻，对草甘膦除草剂具有显著的抗性，能够在该除草剂中几乎不受影响地正常生长，而相同条件下野生型植株则生长受到显著抑制，本发明的该基因突变体具有巨大的市场经济前景。
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公开(公告)号：CN116732070A
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202310703968.X
申请日：2023-06-14
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12N15/62 , C12N15/56 , C12N15/57 , C12N15/55 , C12N9/22 , C12N9/78 , C12N9/24 , C07K19/00 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/46
Abstract: 本发明提供了一种能够实现碱基颠换的CGBE碱基编辑器及其应用。本发明设计合成了鳕鱼来源的尿嘧啶糖基化酶基因cUNG，融合大鼠来源的胞嘧啶脱氨酶基因rAPO的突变体APOEE以及失活的Cas9蛋白基因nSpCas9，组合成为APOEE‑nCas9‑cUNG基因，该基因可以实现C‑G的碱基颠换。并且本发明还提供包括APOEE‑nCas9‑cUNG基因的表达盒和一种表达载体，以及该表达盒和表达载体在水稻基因编辑方面的应用。本发明利用设计的APOEE‑nCas9‑cUNG基因构建植物表达载体，进而构建水稻打靶载体，导入水稻细胞后造成水稻特异基因位点的单碱基替换，特别是实现高效率的C‑G碱基颠换。
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公开(公告)号：CN119193906A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202411494403.6
申请日：2024-10-24
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及水稻筛选分子标记技术领域，具体涉及一种快速筛选抗除草剂水稻的CAPS分子标记及其应用。所述CAPS分子标记与抗除草剂标靶基因ACC1共分离，包括位于如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列上第5374位处，碱基为G的SNP位点以及与所述SNP位点相对应的引物；所述引物在水稻基因组DNA中可扩增出267bp的条带，抗除草剂水稻扩增条带经内切酶酶切后，得到89bp和178bp的两条条带，非抗除草剂水稻扩增条带经内切酶酶切后，得到267bp的一条条带。本发明提供的CAPS分子标记与水稻除草剂抗性紧密连锁，适用于不同的水稻材料，操作简便易行，结果稳定可靠。
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公开(公告)号：CN118995757A
公开(公告)日：2024-11-22
申请号：CN202411334653.3
申请日：2024-09-24
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及一种水稻ACCase突变型基因及其应用。本发明提供的一种水稻ACCase突变型基因，所述水稻ACCase突变型基因为野生型水稻ACCase基因的核苷酸序列在第6114位处发生突变。含有本发明突变型基因的物质对乙酰辅酶A抑制剂类除草剂具有优异的抗性。将突变型基因转入野生型水稻中，使野生型水稻具有抗乙酰辅酶A抑制剂类除草剂的抗性，根据水稻三叶期的田间喷施结果显示，含有本发明的突变型基因的突变水稻在使用盖草能8倍以上浓度，仍能保持正常的生长发育，且结实率以及生育期不受影响，而野生型植株，仅1倍浓度，即出现植株失绿发黄，4‑5天后逐渐枯萎，直至整株死亡。
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公开(公告)号：CN118773219A
公开(公告)日：2024-10-15
申请号：CN202410879498.7
申请日：2024-07-02
Applicant: 安徽省农业科学院水稻研究所 , 合肥戬谷生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及生物基因技术领域，具体涉及一种水稻ACCase突变型基因及其应用。本发明提供了一种水稻ACCase突变型基因及其应用，本发明提供的水稻ACCase突变型基因为野生型ACCase基因在核苷酸序列第6300位处产生了突变，由T突变为G或A。这种突变不仅可以赋予植物抗(耐)乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂抗性，而且可以在施用5倍推荐使用浓度的乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂后，植株仍然正常生长发育和结实，而野生型水稻幼苗在施用1倍推荐使用浓度的乙酰辅酶A羧化酶抑制剂类除草剂后，植株生长逐渐停止，叶片逐渐失绿、变浅黄色，最终整株死亡。
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