公开(公告)号：CN119876104A

公开(公告)日：2025-04-25

申请号：CN202411091498.7

申请日：2024-08-09

Applicant: 江南大学

Inventor： 康振 ,  杨凤玲 ,  胥睿睿 ,  王阳 ,  李江华 ,  堵国成 ,  陈坚

IPC: C12N9/88 ,  C12P19/26 ,  C12N15/60 ,  C12N11/02 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/62 ,  C07K19/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种基于自组装策略构建固定化肝素裂解酶及其制备低分子量肝素的方法，属于生物技术领域。本发明提供的肝素III突变体相较于野生型有着更高的催化效率，突变体K85A/Q95F/S471T的催化效率是野生型的1.75倍；本发明还利用聚集蛋白自组装肝素裂解酶Ⅲ，实现酶的固定化，进一步对Linker进行筛选和优化，提高了转化效率。本发明构建的酶固定系统可实现肝素裂解酶III的固定化，通过对重组细胞破壁后离心收集沉淀，减少了蛋白纯化脱盐等复杂步骤。固定化肝素裂解酶在循环10次以后仍有50％的催化活性，实现了低分子量肝素的高效制备，增加了酶的利用效率，降低了生产成本。

公开(公告)号：CN119220470A

公开(公告)日：2024-12-31

申请号：CN202411381169.6

申请日：2024-09-30

Applicant: 江南大学

Inventor： 康振 ,  陈坚 ,  胥睿睿 ,  杨凤玲 ,  李瑀卓 ,  李江华 ,  堵国成

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/54 ,  C12N9/10 ,  C12P33/00 ,  A61K31/575 ,  A61P1/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种酶法磺酸化合成缓解溃疡性结肠炎药物硫酸胆固醇的方法，属于生物技术领域。本发明用大肠杆菌BL21(DE3)作为宿主菌，对来自于B.thetaiotaomicron的羟基类固醇磺基转移酶2B1进行表达后纯化，再利用底物胆固醇在体外催化合成胆固醇硫酸盐，实现胆固醇硫酸盐的绿色、高效磺酸化修饰，从而用于缓解溃疡性结肠炎药物生产。

公开(公告)号：CN119320762A

公开(公告)日：2025-01-17

申请号：CN202411710325.9

申请日：2024-11-27

Applicant: 江南大学 ,  嘉兴未来食品研究院

Inventor： 康振 ,  杨凤玲 ,  王阳 ,  胥睿睿 ,  堵国成 ,  陈坚

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种肝素水解酶突变体及其重组表达的方法，属于酶工程技术领域。本发明在大肠杆菌中异源表达来源于亚马逊铬菌(Chromobacterium amazonense)的肝素水解酶，并对该肝素水解酶进行修饰，添加TrxA促溶标签，并对部分氨基酸位点进行定点突变，突变体G37T/N145D/V281K催化效率比原始菌株提高了1.96倍，对肝素水解酶的应用和工业化生产起到重要作用。

公开(公告)号：CN118421586A

公开(公告)日：2024-08-02

申请号：CN202410614080.3

申请日：2024-05-17

Applicant: 江南大学

Inventor： 康振 ,  陈坚 ,  堵国成 ,  胡立涛 ,  杨凤玲 ,  肖森 ,  王发银 ,  刘祉妤

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/77 ,  C12N1/21 ,  C12P19/26 ,  C12P19/18 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明涉及一种合成不同分子量透明质酸的透明质酸合酶突变体，属于生物酶工程技术领域。本发明的透明质酸合酶突变体是对氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的透明质酸合酶进行点突变或者复合突变，在此基础上筛选出的透明质酸合酶突变体能够合成不同分子量的透明质酸。本发明突变后的透明质酸合酶与突变前的透明质酸合酶相比，能够合成不同分子量的透明质酸，且所获得的透明质酸分子量范围在300KDa‑40000KDa，同时透明质酸的产量增加，具有很高的工业应用价值。

公开(公告)号：CN116536383A

公开(公告)日：2023-08-04

申请号：CN202310486408.3

申请日：2023-04-28

Applicant: 江南大学

Inventor： 康振 ,  胥睿睿 ,  王阳 ,  李江华 ,  杨凤玲 ,  堵国成 ,  陈坚

IPC: C12P19/32 ,  C12P19/26 ,  C12N9/12 ,  C12N9/16 ,  C12N9/10

Abstract: 本发明公开了一种构建PAPS再生循环系统及应用的方法，属于生物技术领域。本发明通过设计PAPS再生路径，构建了基于包含ATP合成、PAPS合成和AMP再生三个模块的PAPS再生系统，在廉价底物聚磷酸和MgSO4的参与下，成功在肝素、硫酸软骨素和磺酸海藻糖等磺酸化修饰合成反应中应用，大大提高了磺酸化修饰效率并降低了PAPS合成应用成本。本发明构建的PAPS再生系统各个模块也可以单独使用，实现一步合成ATP、一步合成PAPS和提高提高磺基转移酶的催化效率。

公开(公告)号：CN118421586B

公开(公告)日：2025-05-16

申请号：CN202410614080.3

申请日：2024-05-17

Applicant: 江南大学

Inventor： 康振 ,  陈坚 ,  堵国成 ,  胡立涛 ,  杨凤玲 ,  肖森 ,  王发银 ,  刘祉妤

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/77 ,  C12N1/21 ,  C12P19/26 ,  C12P19/18 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明涉及一种合成不同分子量透明质酸的透明质酸合酶突变体，属于生物酶工程技术领域。本发明的透明质酸合酶突变体是对氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的透明质酸合酶进行点突变或者复合突变，在此基础上筛选出的透明质酸合酶突变体能够合成不同分子量的透明质酸。本发明突变后的透明质酸合酶与突变前的透明质酸合酶相比，能够合成不同分子量的透明质酸，且所获得的透明质酸分子量范围在300KDa‑40000KDa，同时透明质酸的产量增加，具有很高的工业应用价值。