利用双探针检测核酸的方法和试剂

    公开(公告)号:CN115948499A

    公开(公告)日:2023-04-11

    申请号:CN202211511703.1

    申请日:2022-11-29

    Abstract: 本发明提供一种利用双探针检测核酸的方法和试剂,双探针组合至少包括:信号探针和捕获探针;所述信号探针为含有能与目标核酸第一靶点区域互补配对的核苷酸序列的单链核酸,且所述信号探针上标记有氧化还原分子;所述捕获探针为含有能与目标核酸序列第二靶点区域互补配对的核苷酸序列的单链核酸。本文中的双探针提高了检测的特异性,尤其是排除了二聚体或者多聚体产生的假阳性。

    一种双色量子点硅质体球形核酸比率荧光传感器用于miRNA高灵敏可视化检测的方法

    公开(公告)号:CN112033942B

    公开(公告)日:2023-03-28

    申请号:CN202010742750.1

    申请日:2020-07-30

    Applicant: 东南大学

    Inventor: 孙清江

    Abstract: 本发明公开了一种双色量子点硅质体球形核酸比率荧光传感器用于miRNA高灵敏可视化检测的方法,包括如下步骤:(1)制备双色量子点硅质体球形核酸(QD2@C‑SNA)比率荧光传感器,双色量子点硅质体球形核酸(QD2@C‑SNA)包括包覆双色量子点的硅质体、与硅质体交联的捕获DNA、与捕获DNA杂交的双DNA酶以及猝灭剂修饰的底物,双色量子点分别置于硅质体亲水内腔和疏水双层中;(2)像荧光传感器中加入靶标miRNA,与QD2@C‑SNA表面的捕获DNA杂交,触发QD2@C‑SNA上双DNA酶自动化行走,介导产生比率荧光信号;(3)检测QD2@C‑SNA的荧光颜色,实现对miRNA的检测和可视化分析。该方法通过双DNA酶行走介导的信号放大实现miRNA快速、高灵敏度检测。

    一种基于双重适配体和金纳米颗粒的CRISPR-cas12a传感体系及其应用

    公开(公告)号:CN115820810A

    公开(公告)日:2023-03-21

    申请号:CN202211472143.3

    申请日:2022-11-23

    Applicant: 中南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于双重适配体和金纳米颗粒的CRISPR‑cas12a传感体系及其应用。该传感体系包括cas12a/g‑RNA复合物、双重适配体以及负载分子信标的金纳米颗粒。其中,金纳米颗粒负载分子信标使单位浓度中报告子的浓度增大,能够显著提升cas12a的切割效率,提升传感体系灵敏度,将该传感体系应用于腺苷检测时,具有选择性好、灵敏度高、检测限低、检测范围宽等优点,能够高精度检测出样本中腺苷的含量。传感体系的制备方法简单,成本低廉,操作方便,有利于扩大生产和应用。

    基于适配体识别-杂交链式反应同时检测金黄色葡萄球菌肠毒素A、B的荧光传感器

    公开(公告)号:CN111139288B

    公开(公告)日:2023-03-21

    申请号:CN202010069513.3

    申请日:2020-01-21

    Abstract: 本发明公开了一种基于适配体识别‑杂交链式反应同时检测金黄色葡萄球菌肠毒素A、B的荧光传感器。所述检测方法包括:分别将肠毒素A适配体2(SEA‑apt2)和肠毒素B适配体2(SEB‑apt2)与荧光标记的发夹探针H1和H2杂交,适配体上的引发序列发生杂交链式反应,得HCR反应产物;将SEA和SEB的适配体1修饰在磁珠表面,分别识别检测体系中的待测靶标SEA和SEB,然后加入HCR反应产物,形成夹心结构的适配体1‑肠毒素‑适配体2/HCR复合物,通过测定荧光值大小实现对待测靶标的定量检测。本发明充分结合了适配体的高亲和力、低成本,杂交链式反应信号放大及磁珠的高效分离等优势,具有恒温扩增、灵敏度高、成本低、操作简单等优点,具有良好的应用前景。

    基于DNA四面体局部结构降解的miRNA检测传感器、试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN115807060A

    公开(公告)日:2023-03-17

    申请号:CN202211555601.X

    申请日:2022-12-06

    Inventor: 柴华 缪鹏

    Abstract: 本发明公开了一种基于DNA四面体局部结构降解的miRNA检测传感器、试剂盒及检测方法,该miRNA检测传感器包括:侧链上具有茎环结构序列的DNA四面体以及修饰在所述DNA四面体上的连接基团和捕获基团,所述连接基团用于与电极偶联,所述捕获基团用于捕获电化学探针。本发明成果构建了一种新的miRNA检测策略,通过目标miRNA与特殊构造的DNA四面体反应,来形成部分DNA/RNA杂合体,在触发双链特异性核酸酶的活性进行切割后,可实现DNA四面体局部结构的降解,同时释放用于捕获银纳米颗粒信号探针的单链区域,能实现miRNA的高灵敏度、高特异性电化学检测。

    一种基于CRISPR/Cas13a的电化学传感器及其应用

    公开(公告)号:CN112595766B

    公开(公告)日:2022-12-06

    申请号:CN202011114420.4

    申请日:2020-10-16

    Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas13a的电化学传感器及其应用,采用一步电化学沉积法制备SPCE‑Au电极,引入巯基修饰的捕获链形成SH‑DNA/SPCE‑Au电化学检测基底;将靶标、crRNA和LwaCas13a特异性结合形成三元复合物,实现对报告探针的非特异性、非靶标性降解(反式切割)。SH‑DNA/SPCE‑Au作为检测平台对报告探针进行捕获,完成检测信号从无到有的过程,即“signal on”检测机理,实现对靶标序列的检测。

    一种新冠类RNA病毒检测的无极小型化测量装置

    公开(公告)号:CN113281393B

    公开(公告)日:2022-11-25

    申请号:CN202110335404.6

    申请日:2021-03-29

    Abstract: 本发明公开了一种基于新冠类RNA病毒检测的无极小型化测量装置,包括:测量池盖、金属反应腔、金电极、石英晶片、控制模块和振荡电路;所述金电极的顶部电极设置在所述测量池盖的底部,所述底部电极设置在所述金属反应腔的底部,所述石英晶片设置在所述金属反应腔内,位于顶部电极与底部电极之间,且不与顶部电极以及底部电极接触。本发明的无极小型化测量装置可实现用压电传感芯片对RNA病毒的高精度检测,同时将金属电极剥离压电传感芯片表面,可提高传感芯片的Q值,扩大压电传感芯片的质量检测范围,为新冠病毒核酸检测提供稳定性更好、更便携的检测设备。

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