一种对透明质酸钠进行分子量分级的方法

    公开(公告)号:CN103319627A

    公开(公告)日:2013-09-25

    申请号:CN201310286415.5

    申请日:2013-07-10

    Abstract: 本发明涉及一种根据分子量对透明质酸钠分级的方法。该方法采用两阶段的膜分离技术将透明质酸钠粗品分子量分级。先将透明质酸钠粗品溶于水中,调节溶液pH到所需的数值,用微滤膜截留浓缩高分子量透明质酸钠,再用超滤膜截留浓缩低分子量透明质酸钠,然后将两种浓缩液用95%乙醇沉淀,沉淀物真空冷冻干燥得到成品。该方法可以用于制备不同分子量规格的HA成品,操作简单便捷,同时,提供了一种获得高分子量HA的新方法。

    一种在非水相介质中酶催化合成富马酸海藻糖酯的方法

    公开(公告)号:CN114045318A

    公开(公告)日:2022-02-15

    申请号:CN202111291561.8

    申请日:2021-11-03

    Abstract: 本发明提供一种在非水相介质中酶催化合成富马酸海藻糖酯的方法,涉及生物化工领域。该在非水相介质中酶催化合成富马酸海藻糖酯的方法,包括丙酮,所述丙酮中加入海藻糖和富马酸,利用Novozym 435脂肪酶催化合成富马酸海藻糖酯,生产工艺条件为:(1)海藻糖添加量为:1‑25mmol/L,优选为10mmol/L,(2)催化剂novozym 435脂肪酶添加量为:0‑50g/L,优选为37g/L。该在非水相介质中酶催化合成富马酸海藻糖酯的方法,首次实现富马酸海藻糖酯的酶促催化生产,与结构类似物富马酸海藻糖甲酯的化学合成方法相比,本方法采用酶法一步合成,采用溶剂为食品生产中可使用的丙酮,产物单一,还省去了大量基团的保护和去保护步骤,步骤简单,也更为绿色环保。

    一种外源基因DNA片段克隆到质粒载体相邻或重叠的限制性内切酶酶切位点的方法

    公开(公告)号:CN105779481B

    公开(公告)日:2019-01-11

    申请号:CN201610219972.9

    申请日:2016-04-07

    Abstract: 本发明公开了一种外源基因DNA片段克隆到质粒载体相邻或重叠的限制性内切酶酶切位点的方法。质粒载体用限制性内切酶A\B、A\C分别酶切,得到AB、BA及AC、CA四个DNA片段。(B、C为质粒载体上相邻或重叠的限制性内切酶酶切位点)。外源基因DNA片段用限制性内切酶B、C酶切,得到BC片段。AB、BC、CA与AC、BC、BA这三个DNA片段分别进行连接、转化,涂布在筛选平板上培养,再挑取单菌落进行筛选,可以得到外源基因连入质粒载体正反两个方向的重组质粒。本发明的优点是:使用本发明构建的质粒载体,无法进行双酶切的相邻或重叠的限制性内切酶酶切位点也可作为克隆外源基因DNA片段的选择;另外,外源基因DNA片段连入载体的两个方向也可实现。

    一种外源基因DNA片段克隆到质粒载体相邻或重叠的限制性内切酶酶切位点的方法

    公开(公告)号:CN105779481A

    公开(公告)日:2016-07-20

    申请号:CN201610219972.9

    申请日:2016-04-07

    Abstract: 本发明公开了一种外源基因DNA片段克隆到质粒载体相邻或重叠的限制性内切酶酶切位点的方法。质粒载体用限制性内切酶A\B、A\C分别酶切,得到AB、BA及AC、CA四个DNA片段。(B、C为质粒载体上相邻或重叠的限制性内切酶酶切位点)。外源基因DNA片段用限制性内切酶B、C酶切,得到BC片段。AB、BC、CA与AC、BC、BA这三个DNA片段分别进行连接、转化,涂布在筛选平板上培养,再挑取单菌落进行筛选,可以得到外源基因连入质粒载体正反两个方向的重组质粒。本发明的优点是:使用本发明构建的质粒载体,无法进行双酶切的相邻或重叠的限制性内切酶酶切位点也可作为克隆外源基因DNA片段的选择;另外,外源基因DNA片段连入载体的两个方向也可实现。

    一种新的I型普鲁兰酶的编码基因及其重组表达和应用

    公开(公告)号:CN105112433A

    公开(公告)日:2015-12-02

    申请号:CN201510565796.X

    申请日:2015-09-08

    Abstract: 本发明利用PCR技术获得T.flagellatus sp.菌株(CGMCC NO.1.12170)普鲁兰酶基因pulB的全长序列,该基因全长1728bp,其核苷酸编码序列如SEQ ID NO:1所示。编码575个氨基酸,预测蛋白大小66kDa,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明的重组普鲁兰酶可专一性切开支链淀粉分支点中的α-1,6-糖苷键,从而剪下整个侧枝,形成直链淀粉;能够与α-淀粉酶、β-淀粉酶等协同作用生产高葡萄糖浆、超高麦芽糖浆、提高啤酒中的发酵度它可以将最小单位的支链分解,可应用于淀粉加工、环保、食品、医疗保健等行业。

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