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公开(公告)号:CN105695496A
公开(公告)日:2016-06-22
申请号:CN201610160020.4
申请日:2016-03-21
Applicant: 南宁中诺生物工程有限责任公司
CPC classification number: C12N9/88 , C12N9/0006 , C12N9/0008 , C12P7/18 , C12P7/24 , C12P7/42 , C12Y101/01202 , C12Y102/01005 , C12Y402/01028
Abstract: 本发明公开了一种二醇脱水酶基因pduCDE的应用。具体是在含有该基因的工程菌在发酵甘油制备3-羟基丙醛、1,3-丙二醇和3-羟基丙酸过程中的应用。该基因首次在大肠杆菌中表达成功,其编码的酶能催化甘油脱水生成3-羟基丙醛,在此发明基础上,可分别把1,3-丙二醇氧化还原酶基因或乙醛脱氢酶基因一起重组到大肠杆菌中,重组菌可以通过发酵将甘油转化为1,3-丙二醇或3-羟基丙酸。
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公开(公告)号:CN103319627A
公开(公告)日:2013-09-25
申请号:CN201310286415.5
申请日:2013-07-10
Applicant: 南宁中诺生物工程有限责任公司
IPC: C08B37/08
Abstract: 本发明涉及一种根据分子量对透明质酸钠分级的方法。该方法采用两阶段的膜分离技术将透明质酸钠粗品分子量分级。先将透明质酸钠粗品溶于水中,调节溶液pH到所需的数值,用微滤膜截留浓缩高分子量透明质酸钠,再用超滤膜截留浓缩低分子量透明质酸钠,然后将两种浓缩液用95%乙醇沉淀,沉淀物真空冷冻干燥得到成品。该方法可以用于制备不同分子量规格的HA成品,操作简单便捷,同时,提供了一种获得高分子量HA的新方法。
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公开(公告)号:CN114045318A
公开(公告)日:2022-02-15
申请号:CN202111291561.8
申请日:2021-11-03
Applicant: 南宁中诺生物工程有限责任公司
Abstract: 本发明提供一种在非水相介质中酶催化合成富马酸海藻糖酯的方法,涉及生物化工领域。该在非水相介质中酶催化合成富马酸海藻糖酯的方法,包括丙酮,所述丙酮中加入海藻糖和富马酸,利用Novozym 435脂肪酶催化合成富马酸海藻糖酯,生产工艺条件为:(1)海藻糖添加量为:1‑25mmol/L,优选为10mmol/L,(2)催化剂novozym 435脂肪酶添加量为:0‑50g/L,优选为37g/L。该在非水相介质中酶催化合成富马酸海藻糖酯的方法,首次实现富马酸海藻糖酯的酶促催化生产,与结构类似物富马酸海藻糖甲酯的化学合成方法相比,本方法采用酶法一步合成,采用溶剂为食品生产中可使用的丙酮,产物单一,还省去了大量基团的保护和去保护步骤,步骤简单,也更为绿色环保。
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公开(公告)号:CN105779481B
公开(公告)日:2019-01-11
申请号:CN201610219972.9
申请日:2016-04-07
Applicant: 南宁中诺生物工程有限责任公司
IPC: C12N15/66
Abstract: 本发明公开了一种外源基因DNA片段克隆到质粒载体相邻或重叠的限制性内切酶酶切位点的方法。质粒载体用限制性内切酶A\B、A\C分别酶切,得到AB、BA及AC、CA四个DNA片段。(B、C为质粒载体上相邻或重叠的限制性内切酶酶切位点)。外源基因DNA片段用限制性内切酶B、C酶切,得到BC片段。AB、BC、CA与AC、BC、BA这三个DNA片段分别进行连接、转化,涂布在筛选平板上培养,再挑取单菌落进行筛选,可以得到外源基因连入质粒载体正反两个方向的重组质粒。本发明的优点是:使用本发明构建的质粒载体,无法进行双酶切的相邻或重叠的限制性内切酶酶切位点也可作为克隆外源基因DNA片段的选择;另外,外源基因DNA片段连入载体的两个方向也可实现。
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公开(公告)号:CN105779481A
公开(公告)日:2016-07-20
申请号:CN201610219972.9
申请日:2016-04-07
Applicant: 南宁中诺生物工程有限责任公司
IPC: C12N15/66
Abstract: 本发明公开了一种外源基因DNA片段克隆到质粒载体相邻或重叠的限制性内切酶酶切位点的方法。质粒载体用限制性内切酶A\B、A\C分别酶切,得到AB、BA及AC、CA四个DNA片段。(B、C为质粒载体上相邻或重叠的限制性内切酶酶切位点)。外源基因DNA片段用限制性内切酶B、C酶切,得到BC片段。AB、BC、CA与AC、BC、BA这三个DNA片段分别进行连接、转化,涂布在筛选平板上培养,再挑取单菌落进行筛选,可以得到外源基因连入质粒载体正反两个方向的重组质粒。本发明的优点是:使用本发明构建的质粒载体,无法进行双酶切的相邻或重叠的限制性内切酶酶切位点也可作为克隆外源基因DNA片段的选择;另外,外源基因DNA片段连入载体的两个方向也可实现。
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公开(公告)号:CN103215300B
公开(公告)日:2015-04-08
申请号:CN201310174692.7
申请日:2013-05-13
Applicant: 南宁中诺生物工程有限责任公司
IPC: C12N15/75 , C12N1/21 , C12N9/90 , C12P19/24 , C12P19/12 , C12R1/125 , C12R1/10 , C12R1/145 , C12R1/08 , C12R1/15 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种以整合型重组枯草芽孢杆菌为菌种生产海藻糖合成酶并将此酶用于生产海藻糖的方法。具体是将海藻糖合成酶表达元件整合到枯草芽孢杆菌染色体中构建整合型重组枯草芽孢杆菌,以此重组枯草芽孢杆菌为菌种,在营养培养基中发酵生产海藻糖合成酶。经过简单分离,发酵液中的海藻糖合成酶能够直接用于海藻糖的制造.本发明的优点是:本发明利用食品安全的表达系统生产海藻糖合成酶,整合型表达的菌株所含的外源基因能够稳定传代和表达,表达的海藻糖合成酶分泌到胞外,无抗菌活性,达到食品应用酶制剂要求,有利于下一步海藻糖的制造。
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公开(公告)号:CN107201375B
公开(公告)日:2020-11-10
申请号:CN201710509047.4
申请日:2017-06-28
Applicant: 南宁邦尔克生物技术有限责任公司 , 广西科学院
Abstract: 本发明公开了一种生产(R,R)‑2,3‑丁二醇基因工程菌株的构建方法及其应用,该方法是将α‑乙酰乳酸合成酶基因、α‑乙酰乳酸脱羧酶基因和(R,R)‑2,3‑丁二醇脱氢酶基因的核苷酸序列进行密码子优化,利用人工合成的方法获得包含三个基因的基因簇;将基因簇插入表达载体中,获得多顺反子重组质粒;将多顺反子重组质粒导入宿主菌E. coli,并敲除主要副产物合成途径的关键基因,获得生产(R,R)‑2,3‑丁二醇的基因工程菌株。本发明提供的工程菌株所用的原料来源广泛、成本低,菌株无致病性,菌株的(R,R)‑2,3‑丁二醇产量、生产效率高,最高产量可达到93.5 g/L,光学纯度可达99%以上。本发明还利用非粮木薯粉和廉价氮源作为发酵原料生产(R,R)‑2,3‑丁二醇,降低了生产成本。
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公开(公告)号:CN118726307B
公开(公告)日:2025-02-18
申请号:CN202411029380.1
申请日:2024-07-30
Applicant: 广西科学院 , 南宁邦尔克生物技术有限责任公司
Abstract: 本发明涉及重组酶技术领域。本发明提供了一种磷脂酶A1及其在枯草芽孢杆菌中整合分泌表达的方法和应用,所述磷脂酶A1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过从枯草芽孢杆菌同源蛋白信号肽库中,构建各种信号肽与相结合的表达载体,结合高通量的筛选方法,筛选出能提高PLA1分泌的信号肽,从而使PLA1的分泌优化,与原信号肽相比,PLA1的分泌量提高了10倍,酶活力提高10倍,对于PLA1生产成本的下降以及进一步大规模应用具有重要意义。此外,本发明所制备的磷脂酶A1酶制剂可在温度为55℃,酸性条件下将稻米油的含磷量降低至70~75ppm。
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公开(公告)号:CN107201375A
公开(公告)日:2017-09-26
申请号:CN201710509047.4
申请日:2017-06-28
Applicant: 南宁邦尔克生物技术有限责任公司 , 广西科学院
Abstract: 本发明公开了一种生产(R,R)‑2,3‑丁二醇基因工程菌株的构建方法及其应用,该方法是将α‑乙酰乳酸合成酶基因、α‑乙酰乳酸脱羧酶基因和(R,R)‑2,3‑丁二醇脱氢酶基因的核苷酸序列进行密码子优化,利用人工合成的方法获得包含三个基因的基因簇;将基因簇插入表达载体中,获得多顺反子重组质粒;将多顺反子重组质粒导入宿主菌E.coli,并敲除主要副产物合成途径的关键基因,获得生产(R,R)‑2,3‑丁二醇的基因工程菌株。本发明提供的工程菌株所用的原料来源广泛、成本低,菌株无致病性,菌株的(R,R)‑2,3‑丁二醇产量、生产效率高,最高产量可达到93.5 g/L,光学纯度可达99%以上。本发明还利用非粮木薯粉和廉价氮源作为发酵原料生产(R,R)‑2,3‑丁二醇,降低了生产成本。
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公开(公告)号:CN105112433A
公开(公告)日:2015-12-02
申请号:CN201510565796.X
申请日:2015-09-08
Applicant: 广西科学院
Abstract: 本发明利用PCR技术获得T.flagellatus sp.菌株(CGMCC NO.1.12170)普鲁兰酶基因pulB的全长序列,该基因全长1728bp,其核苷酸编码序列如SEQ ID NO:1所示。编码575个氨基酸,预测蛋白大小66kDa,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明的重组普鲁兰酶可专一性切开支链淀粉分支点中的α-1,6-糖苷键,从而剪下整个侧枝,形成直链淀粉;能够与α-淀粉酶、β-淀粉酶等协同作用生产高葡萄糖浆、超高麦芽糖浆、提高啤酒中的发酵度它可以将最小单位的支链分解,可应用于淀粉加工、环保、食品、医疗保健等行业。
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