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公开(公告)号：CN107201375B
公开(公告)日：2020-11-10
申请号：CN201710509047.4
申请日：2017-06-28
Applicant: 南宁邦尔克生物技术有限责任公司 , 广西科学院
Abstract: 本发明公开了一种生产(R,R)‑2,3‑丁二醇基因工程菌株的构建方法及其应用，该方法是将α‑乙酰乳酸合成酶基因、α‑乙酰乳酸脱羧酶基因和(R,R)‑2,3‑丁二醇脱氢酶基因的核苷酸序列进行密码子优化，利用人工合成的方法获得包含三个基因的基因簇；将基因簇插入表达载体中，获得多顺反子重组质粒；将多顺反子重组质粒导入宿主菌E. coli，并敲除主要副产物合成途径的关键基因，获得生产(R,R)‑2,3‑丁二醇的基因工程菌株。本发明提供的工程菌株所用的原料来源广泛、成本低，菌株无致病性，菌株的(R,R)‑2,3‑丁二醇产量、生产效率高，最高产量可达到93.5 g/L，光学纯度可达99%以上。本发明还利用非粮木薯粉和廉价氮源作为发酵原料生产(R,R)‑2,3‑丁二醇，降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN107177620A
公开(公告)日：2017-09-19
申请号：CN201710509031.3
申请日：2017-06-28
Applicant: 南宁中诺生物工程有限责任公司 , 广西科学院
Abstract: 本发明公开了一种利用廉价原料生产四甲基吡嗪的方法，将α‑乙酰乳酸合成酶基因、α‑乙酰乳酸脱羧酶基因和NADH氧化酶基因的核苷酸序列进行密码子优化；拼接获得包含该三个基因的基因簇；将基因簇插入表达载体中，获得多顺反子重组质粒；再导入宿主菌E. coli，获得生产乙偶姻的基因工程菌株；将活化的菌株接种至含廉价原料的发酵培养基进行发酵培养，获得含有乙偶姻的发酵液；取发酵液进行离心处理，取上清液，再加入磷酸氢二铵，发酵产生的乙偶姻与NH4+反应合成四甲基吡嗪。本发明提供的菌株能有效利用来源广泛、成本低廉的原料生产高浓度前体物质乙偶姻，氧化型辅酶NAD+能够有效再生，可提高乙偶姻产量和生产效率，从而有效降低四甲基吡嗪的生产成本，缩短生产周期。
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公开(公告)号：CN119638760A
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202411826157.X
申请日：2024-12-12
Applicant: 南宁中诺生物工程有限责任公司 , 广西科学院
Abstract: 本发明涉及海藻糖制备技术领域，尤其涉及一种高纯度海藻糖及其结晶方法与应用。本发明的结晶方法，包括如下步骤：(1)将海藻糖液加热至温度为60～65℃，加入晶种，得到晶种糖液；(2)将所述的晶种糖液降温至25～30℃，得到海藻糖晶体；(3)将所述的海藻糖晶体升温至60～65℃，保持10～20min，得到海藻糖混合物；(4)重复步骤(2)～(3)0～2次后，将海藻糖混合物降温至25～30℃，保持9～10h，离心、干燥、筛选，得到高纯度海藻糖。按照本发明的方法制备得到的高纯度海藻糖纯度高，杂质少，海藻糖晶体的颗粒均匀，质量稳定，回收率高，可以广泛用于食品，医药，日用化工等领域。
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公开(公告)号：CN118726307B
公开(公告)日：2025-02-18
申请号：CN202411029380.1
申请日：2024-07-30
Applicant: 广西科学院 , 南宁邦尔克生物技术有限责任公司
Abstract: 本发明涉及重组酶技术领域。本发明提供了一种磷脂酶A1及其在枯草芽孢杆菌中整合分泌表达的方法和应用，所述磷脂酶A1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过从枯草芽孢杆菌同源蛋白信号肽库中，构建各种信号肽与相结合的表达载体，结合高通量的筛选方法，筛选出能提高PLA1分泌的信号肽，从而使PLA1的分泌优化，与原信号肽相比，PLA1的分泌量提高了10倍，酶活力提高10倍，对于PLA1生产成本的下降以及进一步大规模应用具有重要意义。此外，本发明所制备的磷脂酶A1酶制剂可在温度为55℃，酸性条件下将稻米油的含磷量降低至70～75ppm。
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公开(公告)号：CN107201375A
公开(公告)日：2017-09-26
申请号：CN201710509047.4
申请日：2017-06-28
Applicant: 南宁邦尔克生物技术有限责任公司 , 广西科学院
Abstract: 本发明公开了一种生产(R,R)‑2,3‑丁二醇基因工程菌株的构建方法及其应用，该方法是将α‑乙酰乳酸合成酶基因、α‑乙酰乳酸脱羧酶基因和(R,R)‑2,3‑丁二醇脱氢酶基因的核苷酸序列进行密码子优化，利用人工合成的方法获得包含三个基因的基因簇；将基因簇插入表达载体中，获得多顺反子重组质粒；将多顺反子重组质粒导入宿主菌E.coli，并敲除主要副产物合成途径的关键基因，获得生产(R,R)‑2,3‑丁二醇的基因工程菌株。本发明提供的工程菌株所用的原料来源广泛、成本低，菌株无致病性，菌株的(R,R)‑2,3‑丁二醇产量、生产效率高，最高产量可达到93.5 g/L，光学纯度可达99%以上。本发明还利用非粮木薯粉和廉价氮源作为发酵原料生产(R,R)‑2,3‑丁二醇，降低了生产成本。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105112433A
公开(公告)日：2015-12-02
申请号：CN201510565796.X
申请日：2015-09-08
Applicant: 广西科学院
Abstract: 本发明利用PCR技术获得T.flagellatus sp.菌株（CGMCC NO.1.12170）普鲁兰酶基因pulB的全长序列，该基因全长1728bp，其核苷酸编码序列如SEQ ID NO：1所示。编码575个氨基酸，预测蛋白大小66kDa，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明的重组普鲁兰酶可专一性切开支链淀粉分支点中的α-1,6-糖苷键，从而剪下整个侧枝，形成直链淀粉；能够与α-淀粉酶、β-淀粉酶等协同作用生产高葡萄糖浆、超高麦芽糖浆、提高啤酒中的发酵度它可以将最小单位的支链分解，可应用于淀粉加工、环保、食品、医疗保健等行业。
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公开(公告)号：CN119351383A
公开(公告)日：2025-01-24
申请号：CN202411826156.5
申请日：2024-12-12
Applicant: 广西科学院 , 南宁中诺生物工程有限责任公司
Abstract: 本发明涉及基因工程和酶工程技术领域，尤其涉及一种海藻糖合成酶PfTreS及其应用与一种表达载体和表达菌株。本发明提供了一种海藻糖合成酶PfTreS，所述海藻糖合成酶PfTreS的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。该酶可以将高浓度的麦芽糖催化生成海藻糖，转化效率高，并且简单，只需一步就可完成，不仅降低了生产成本，还避免了多种酶反应时最适反应条件冲突生成的额外工艺的风险，适宜工业化生产。
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公开(公告)号：CN118726307A
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202411029380.1
申请日：2024-07-30
Applicant: 广西科学院 , 南宁邦尔克生物技术有限责任公司
Abstract: 本发明涉及重组酶技术领域。本发明提供了一种磷脂酶A1及其在枯草芽孢杆菌中整合分泌表达的方法和应用，所述磷脂酶A1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过从枯草芽孢杆菌同源蛋白信号肽库中，构建各种信号肽与相结合的表达载体，结合高通量的筛选方法，筛选出能提高PLA1分泌的信号肽，从而使PLA1的分泌优化，与原信号肽相比，PLA1的分泌量提高了10倍，酶活力提高10倍，对于PLA1生产成本的下降以及进一步大规模应用具有重要意义。此外，本发明所制备的磷脂酶A1酶制剂可在温度为55℃，酸性条件下将稻米油的含磷量降低至70～75ppm。
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公开(公告)号：CN114717213B
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202210478600.3
申请日：2022-05-05
Applicant: 广西科学院 , 南宁中诺生物工程有限责任公司
Abstract: 本发明属于酶工程技术领域，本发明提供了一种葡聚糖蔗糖酶的N端截短突变酶及其制备方法。本发明将已知葡聚糖蔗糖酶基因序列的N端截短，得到截短突变体酶，通过诱导表达及其活力筛选，发现获得的突变酶的酶活比原基因酶提高约20倍。选该突变酶进行酶学性质分析，发现其在酸性条件下稳定性较好且最适诱导表达温度和反应温度接近室温。本发明为理性设计和实际应用以及酶工程生产右旋糖酐奠定了基础。
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公开(公告)号：CN114717213A
公开(公告)日：2022-07-08
申请号：CN202210478600.3
申请日：2022-05-05
Applicant: 广西科学院 , 南宁中诺生物工程有限责任公司
Abstract: 本发明属于酶工程技术领域，本发明提供了一种葡聚糖蔗糖酶的N端截短突变酶及其制备方法。本发明将已知葡聚糖蔗糖酶基因序列的N端截短，得到截短突变体酶，通过诱导表达及其活力筛选，发现获得的突变酶的酶活比原基因酶提高约20倍。选该突变酶进行酶学性质分析，发现其在酸性条件下稳定性较好且最适诱导表达温度和反应温度接近室温。本发明为理性设计和实际应用以及酶工程生产右旋糖酐奠定了基础。
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