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公开(公告)号：CN118308432A
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202410505892.4
申请日：2024-04-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种促进枯草芽孢杆菌产生纳米管的方法，属于生物技术领域。本发明为了能够获得在自然培养状态下可产生纳米管的枯草芽孢杆菌，使用质粒过表达dyna基因，构建好的菌株无需按压，无需存在聚L‑赖氨酸即可产生纳米管。在该领域实现了从0到1的突破，产生的纳米管最长达22.94μm，长度目前为第一。同时，经发酵验证，该菌株能够显著提高生物合成中的产物产量，在合成生物学具有重要应用价值。
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公开(公告)号：CN114835818B
公开(公告)日：2024-03-22
申请号：CN202210265179.8
申请日：2022-03-17
Applicant: 江南大学
IPC: C07K19/00 , C12N9/78 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/75
Abstract: 本发明涉及一种基因编辑融合蛋白、其构建的腺嘌呤碱基编辑器及其应用。基因编辑融合蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.2‑4所示的序列之一，基于该基因编辑融合蛋白构建的腺嘌呤碱基编辑器还包括crRNA阵列插入区，将基因组多位点腺嘌呤转化为鸟嘌呤。本发明构建的腺嘌呤碱基编辑器解决了现有的腺嘌呤碱基编辑器在基因组上的可操作范围受限，而且在多位点的碱基编辑过程中效率低且操作复杂的问题，提供了一种编辑位点多、编辑窗口大、编辑效率和编辑活性高的腺嘌呤碱基编辑器。
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公开(公告)号：CN117645985A
公开(公告)日：2024-03-05
申请号：CN202311593867.8
申请日：2023-11-27
Applicant: 山东润德生物科技有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种乙酰氨基葡萄糖‑6磷酸磷酸酶突变体及其应用，属于生物技术领域。本发明以来源于多形拟杆菌Bacteroides thetaiotaomicron VPI‑5482的乙酰氨基葡萄糖‑6磷酸磷酸酶为出发序列，通过突变位点的筛选及验证，发现了一种能够提高此酶的底物专一性和催化活力的突变体，将该突变体引入基因工程大肠杆菌中后进行发酵验证，发现N‑乙酰氨基葡萄糖在胞外的积累量最高可达224g/L，与转化突变前pET28a‑BT4131的对照菌株相比，发酵液中乙酰氨基葡萄糖浓度提高了49.3％，在工业生产上具有十分广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN117603899A
公开(公告)日：2024-02-27
申请号：CN202311762831.8
申请日：2023-12-19
Abstract: 本发明提供了蛋白质谷氨酰胺酶在食品级大肠杆菌中的重组表达，属于发酵工程技术领域。本发明以大肠杆菌Nissle1917为初始菌株，构建了异源表达蛋白质谷氨酰胺酶的重组菌株，对RBS和启动子进行优化和筛选，通过融合表达绿色荧光蛋白和目的基因，检测细胞荧光强度，对发酵条件进行筛选，得到最佳酶活化时间、发酵温度与IPTG添加量，在该发酵条件下，发酵12h之后，摇瓶发酵酶活可达13.5U/mL。该重组菌株可以广泛应用于蛋白质谷氨酰胺酶的生产，有利于降低蛋白质谷氨酰胺酶的生产成本，且由于大肠杆菌Nissle1917作为食品级大肠杆菌具有无毒害等优势，该重组菌株也扩大了蛋白质谷氨酰胺酶在食品领域的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117586902A
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202311603926.5
申请日：2023-11-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效分泌表达人骨桥蛋白的毕赤酵母及其构建和应用。首先通过构建杂合信号肽表达质粒引导OPN表达分泌，确定了一种能够有效的提高OPN的表达量的方法，摇瓶发酵产量为45.4mg/L；其次，对分子伴侣蛋白和转录因子进行筛选，在毕赤酵母中共表达，进行摇瓶发酵验证。取发酵液的上清液进行Western Blot和ELISA验证，发现胞外能够检测到OPN产量达到80.4mg/L，相较于原始菌株提升了2.5倍。本发明的毕赤酵母工程菌不仅解决了人骨桥蛋白在毕赤酵母中大量表达易出现错误折叠、引起细胞分泌系统崩溃的问题，促进了OPN在毕赤酵母中正确折叠并能够快速分泌到细胞外，还实现了目前OPN产量的最高水平，具有重大工业应用潜力。
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公开(公告)号：CN117402804A
公开(公告)日：2024-01-16
申请号：CN202311420604.7
申请日：2023-10-30
Applicant: 江南大学 , 鄂尔多斯市中轩生化股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种α‑1,2岩藻糖基转移酶突变体及产2'‑岩藻糖基乳糖的大肠杆菌，属于生物技术领域。本发明借助生物信息学等方法，基于蛋白序列比对、丙氨酸扫描半理性选取多个氨基酸残基作为改造靶点，针对性地对α‑1,2岩藻糖基转移酶构建“小而精”的高质量突变体文库，对特定靶点进行组合突变等半理性改造方法，获得了高活性的α‑1,2岩藻糖基转移酶突变体用于大肠杆菌中2'‑FL的合成，为富含2'‑岩藻糖基乳糖的食品开发奠定了基础。
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公开(公告)号：CN117402762A
公开(公告)日：2024-01-16
申请号：CN202211557632.9
申请日：2022-12-06
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12P17/18 , C12P21/02 , C07K14/805 , C12R1/865 , C12R1/85
Abstract: 本发明公开了一种提升酿酒酵母血红素供给水平的方法及其应用，属于基因工程技术领域。本发明通过截短的Hem1p53‑549，截短的Hem14p40‑539和截短的Hem15p30‑393实现了三个蛋白定位于线粒体，解除血红素合成过程中的空间隔离障碍；通过在酿酒酵母基因组的cut416d位点整合含有SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列自组装的结构域CBD，实现关键酶胞内自组装，提高血红素合成，实现胞内血红素达到0.3mg/L。本发明通过表达具有功能活性的大豆血红蛋白、三叶草血红蛋白、猪肌红蛋白、牛肌红蛋白、猪血红蛋白和牛血红蛋白，为在酿酒酵母中合成以血红素为辅基的蛋白提供胞内供给奠定基础。
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公开(公告)号：CN117229986A
公开(公告)日：2023-12-15
申请号：CN202310513993.1
申请日：2023-05-09
Abstract: 本发明公开了一种生产人源乳铁蛋白的枯草芽孢杆菌及其应用，属于生物技术领域。本发明首先通过筛选合适的启动子和表达载体成功构建了能够高效表达HLF的重组B.subtilis菌株HLF1，其总产量为18.91μg/L。其次通过SCORE方法筛选了适合HLF分泌表达的信号肽‑RBS组合，成功实现HLF的进一步分泌表达，其中分泌量最高的重组质粒为pHT‑P21‑RBS1‑SPYycP‑HLF和pHT‑P21‑RBS2‑SPYncM‑HLF，HLF蛋白总产量分别为39.1μg/L和41.2μg/L，分泌蛋白量分别为16.9μg/L和17.4μg/L。本发明构建的重组菌所生产的人源HLF表达稳定、表达量高，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN116948925A
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202310229184.8
申请日：2023-03-10
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/74 , C12N9/92 , C12N9/88 , C07K14/195 , C12N9/02 , C12N9/04 , C12N9/12 , C12N9/90 , C12N15/52 , C12P7/60 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种可以利用葡萄糖高效合成2‑KLG的氧化葡萄糖酸杆菌的构建及其应用，属于基因工程及生物工程技术领域。本发明通过在氧化葡萄糖酸杆菌ATCC9937中敲除醛酮还原酶psAKR，整合表达2,5‑DKG转运蛋白KgtpA、基因组水平增加了2,5‑DKG还原酶DKGRA的拷贝数，同时强化了工程菌株的葡萄糖转运系统，获得能够通过葡萄糖直接合成2‑KLG的重组氧化葡萄糖酸杆菌GKLG11。所述氧化葡萄糖酸杆菌能够通过通过葡萄糖直接一步发酵合成2‑KLG，因而所述重组氧化葡萄糖酸杆菌在化妆品、纺织品、食品领域具有重要作用。
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