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公开(公告)号:CN117402762B
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202211557632.9
申请日:2022-12-06
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/60 , C12P17/18 , C12P21/02 , C07K14/805 , C12R1/865 , C12R1/85
Abstract: 本发明公开了一种提升酿酒酵母血红素供给水平的方法及其应用,属于基因工程技术领域。本发明通过截短的Hem1p53‑549,截短的Hem14p40‑539和截短的Hem15p30‑393实现了三个蛋白定位于线粒体,解除血红素合成过程中的空间隔离障碍;通过在酿酒酵母基因组的cut416d位点整合含有SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列自组装的结构域CBD,实现关键酶胞内自组装,提高血红素合成,实现胞内血红素达到0.3mg/L。本发明通过表达具有功能活性的大豆血红蛋白、三叶草血红蛋白、猪肌红蛋白、牛肌红蛋白、猪血红蛋白和牛血红蛋白,为在酿酒酵母中合成以血红素为辅基的蛋白提供胞内供给奠定基础。
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公开(公告)号:CN117887678A
公开(公告)日:2024-04-16
申请号:CN202410227825.0
申请日:2024-02-29
Applicant: 北京泛球生物科技有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种合成藻蓝素的大肠杆菌重组菌株及应用,属于生物工程技术领域。本发明实现了藻蓝素铁氧还蛋白还原酶(PcyA)来源筛选和理性改造,解决了之前藻蓝素产量低的问题。通过从5种不同藻类来源的PcyA中筛选出最适合胆绿素和藻蓝素大肠杆菌合成的关键限速酶,并在此基础上理性改造,可实现摇瓶水平藻蓝素在大肠杆菌中的高效合成。在摇瓶水平,所得藻蓝素产量可达24.80mg/L,该结果为藻蓝素在食品、医药、化妆品领域的应用奠定了基础。
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公开(公告)号:CN117143861A
公开(公告)日:2023-12-01
申请号:CN202311259561.9
申请日:2023-09-27
Applicant: 宜宾五粮液股份有限公司 , 江南大学
IPC: C12N15/10 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明公开了一种白酒大曲总RNA的快速提取方法,属于生物工程技术领域。白酒大曲总RNA的快速提取方法,通过液氮冷冻处理结合研制的RNA裂解液处理提取法,最后经过洗涤液洗涤,能在1小时内快速提取大曲微生物的总RNA。本发明从成分复杂的大曲中首次分离得到浓度高、纯度高的总RNA,并且提取速度快,可在1h内完成白酒大曲总RNA的提取,本发明可以为白酒大曲中微生物的转录信息分析提供技术支撑,对于白酒大曲发酵过程重要物质的产生机理的研究及提高大曲品质具有重要意义。
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公开(公告)号:CN116376733A
公开(公告)日:2023-07-04
申请号:CN202310303990.5
申请日:2023-03-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高毕赤酵母工程菌生产大豆血红蛋白的发酵方法,属于生物工程技术领域。本发明实现了发酵罐水平生产大豆血红蛋白,解决了之前大豆血红蛋白发酵罐水平产量低的问题。通过优化培养基、溶氧条件、血红素和甲醇流加浓度增强菌体的生长和分泌合成大豆血红蛋白的能力,可实现发酵罐水平大豆血红蛋白在毕赤酵母中的高效表达。在发酵罐水平,所得大豆血红蛋白产量可达591mg/L,该结果为大豆血红蛋白在人造肉等食品加工领域的应用奠定了基础。
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公开(公告)号:CN115975963A
公开(公告)日:2023-04-18
申请号:CN202310079752.0
申请日:2023-02-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了利用大肠杆菌P450酶全细胞催化合成羟基化黄酮化合物的方法及应用,属于基因工程技术领域。本发明通过筛选出高产羟基化黄酮化合物的P450sca‑2mut、通过还原伴侣工程、酶工程以及全细胞催化条件优化,使sca‑2mutR88A/S96A催化柚皮素合成圣草酚的效率达到77%;催化二氢山奈酚合成二氢槲皮素的效率达到66%;催化芹菜素合成木犀草素的效率达到32%;催化大豆苷元合成7,3',4'‑三羟基异黄酮的效率达到75%,为提高羟基化化合物的生物合成提供了新的策略。
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公开(公告)号:CN113136349B
公开(公告)日:2023-03-31
申请号:CN202110607028.1
申请日:2021-05-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效表达不同来源肌红蛋白/血红蛋白毕赤酵母重组菌株的构建,属于基因工程技术领域。本发明首先实现了不同动植物来源的肌红蛋白/血红蛋白在毕赤酵母中的高效分泌表达,构建得到表达猪肌红蛋白、牛肌红蛋白、三叶草血红蛋白、大豆血红蛋白以及猪血红蛋白β单亚基的重组菌,在摇瓶条件下产量分别达到42.0mg/L、20.0mg/L、5.0mg/L、100.0mg/L与1.0mg/L;并进一步优化猪肌红蛋白在毕赤酵母中的分泌表达体系,最终构建得到的重组菌株X33‑△ku70‑△yps1‑1‑MB菌株48h摇瓶发酵产量达到69.0mg/L,较对照提高了59.4%。本发明有利于不同来源肌红蛋白/血红蛋白在人造肉等在食品加工领域的应用及进一步发展。
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公开(公告)号:CN113215146A
公开(公告)日:2021-08-06
申请号:CN202110579696.8
申请日:2021-05-26
Applicant: 宜宾五粮液股份有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及从白酒大曲或酒醅中提取微生物总DNA的方法及用途。本发明所解决的技术问题是针对白酒大曲或酒醅微生物中DNA提取困难的现状,提供一种通过物理法、酶法和试剂盒法联用提高微生物总DNA提取质量的方法。本发明的方法中试剂易于获取,操作方法也较为简单,利用酶、物理相结合的方法破壁,得到的真菌及细菌的基因组DNA较为完整,纯度也高,提取质量稳定。本发明的方法不仅适用于大曲微生物总DNA的提取,对于提取酒醅微生物总DNA也有较好的效果。
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公开(公告)号:CN113150120A
公开(公告)日:2021-07-23
申请号:CN202110558529.5
申请日:2021-05-21
Applicant: 江南大学 , 江苏东汇生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了发酵液中猪肌红蛋白的分离纯化方法,属于生物技术领域。本发明通过在发酵液中创造性地分步添加不同浓度的硫酸铵,对表达猪肌红蛋白的重组毕赤酵母的发酵液进行浓缩,并对其进一步超滤浓缩,并对浓缩液进行纯化得到的肌红蛋白纯度达88.04%,纯化率可达66.05%,实现了从发酵液中纯化猪肌红蛋白,解决了之前猪肌红蛋白发酵液难以纯化的问题,并实现了猪肌红蛋白发酵液的高效纯化。本发明的分离纯化方法特异性高,操作条件温和,步骤简洁,纯化效果好,回收率高,成本低,速度快,益于扩大生产。
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公开(公告)号:CN113136349A
公开(公告)日:2021-07-20
申请号:CN202110607028.1
申请日:2021-05-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效表达不同来源肌红蛋白/血红蛋白毕赤酵母重组菌株的构建,属于基因工程技术领域。本发明首先实现了不同动植物来源的肌红蛋白/血红蛋白在毕赤酵母中的高效分泌表达,构建得到表达猪肌红蛋白、牛肌红蛋白、三叶草血红蛋白、大豆血红蛋白以及猪血红蛋白β单亚基的重组菌,在摇瓶条件下产量分别达到42.0mg/L、20.0mg/L、5.0mg/L、100.0mg/L与1.0mg/L;并进一步优化猪肌红蛋白在毕赤酵母中的分泌表达体系,最终构建得到的重组菌株X33‑△ku70‑△yps1‑1‑MB菌株48h摇瓶发酵产量达到69.0mg/L,较对照提高了59.4%。本发明有利于不同来源肌红蛋白/血红蛋白在人造肉等在食品加工领域的应用及进一步发展。
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公开(公告)号:CN112210525A
公开(公告)日:2021-01-12
申请号:CN201910625206.6
申请日:2019-07-11
Applicant: 江南大学
IPC: C12N5/00 , C12N5/0775
Abstract: 本发明公开了一种无血清培养体系及其在细胞培养肉中的应用,属于生物工程技术领域。该发明可以降低动物细胞培养过程对血清的依赖性,减少血清中不确定因素对动物细胞培养安全性的影响。此外,在本发明中所使用除基础培养基的外源添加成分均为全合成,可以有效降低无血清培养基成本,更有利于该技术的大规模应用。
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