公开(公告)号：CN108977414A

公开(公告)日：2018-12-11

申请号：CN201810934991.9

申请日：2018-08-16

Applicant: 中国科学院昆明植物研究所

Inventor： 刘莉 ,  和建芳 ,  李萍 ,  杨红

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/82 ,  A01H11/00

Abstract: 本发明提供了一种β-胡萝卜素酮化酶的人工合成突变体及其编码序列和应用，属于基因工程技术领域。本发明提供了一种β-胡萝卜素酮化酶的人工合成突变体，所述人工合成突变体的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明提供了上述人工合成突变体的编码序列，所述编码序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。利用上述编码序列转化苔藓，可显著提高被转化苔藓的色素合成能力以及抗逆能力。

公开(公告)号：CN106386483A

公开(公告)日：2017-02-15

申请号：CN201610772729.X

申请日：2016-08-30

Applicant: 中国科学院昆明植物研究所

Inventor： 杨红 ,  李萍 ,  刘莉 ,  鲁元学 ,  章成君

IPC: A01H4/00

Abstract: 本发明公开了一种皱叶青藓的快速繁殖方法。包括以下步骤：野外采集皱叶青藓茎叶配子体和孢子囊，无菌水浸泡5小时；配子体冲洗干净后剪成1厘米小段，在直径5厘米的无菌小培养皿中次氯酸钠消毒1分钟，无菌水清洗5遍后打磨粉碎接种于BCD培养基，同时孢子囊置于1.5ml离心管消毒5分钟，用镊子碾碎后接种于BCD培养基；在温度为23℃，80μmol photons m-2s-1光强，16小时长日照下的培养箱中生长2周；配子体和孢子长出新原丝体后，经机械打磨粉碎后接种于BCD培养基，一周即可得到大量繁殖的原丝体，一个月得到成熟配子体。为后期皱叶青藓的工程化生产提供技术保障。

公开(公告)号：CN106359092A

公开(公告)日：2017-02-01

申请号：CN201610772610.2

申请日：2016-08-30

Applicant: 中国科学院昆明植物研究所

Inventor： 杨红 ,  李萍 ,  刘莉 ,  鲁元学 ,  章成君

IPC: A01H4/00

CPC classification number: A01H4/008

Abstract: 本发明提供小立碗藓原丝体快速繁殖方法，将生长5天的小立碗藓原丝体材料经过机械打磨粉碎继代，设置以BCD培养基为基础培养基的不同钙离子浓度的测试平板，经过打磨继代后接种于各种不同浓度的CaCl2的BCD培养基平板上，进行生长状态观测，最终确定原丝体生长及分化状态最佳的钙离子浓度。本发明针对小立碗藓的原丝体培养进行了培养及配方的改进实验表明，在控制培养箱温度为23℃，80μmol photons m-2s-1光强，16小时长日照下，5mM钙离子浓度可获得生长最旺盛、材料最多的植物原丝体，为后期原生质体制备及转化重组实验提供了技术基础。

公开(公告)号：CN106119185A

公开(公告)日：2016-11-16

申请号：CN201610771350.7

申请日：2016-08-30

Applicant: 中国科学院昆明植物研究所

Inventor： 杨红 ,  李萍 ,  刘莉 ,  鲁元学 ,  章成君 ,  关艳龙

IPC: C12N5/04

CPC classification number: C12N5/04

Abstract: 本发明公开了一种苔藓‑小立碗藓的原生质体的制备方法，包含下述步骤：原生质体的原材料‑原丝体与无菌超纯水机械打磨粉碎后，转移到10皿BCD培养基，控制pH值4.5，23℃，80μmol photons m‑2s‑1光强，16小时长日照下，培养5天后重复该过程一次，5天后显微镜检查细胞生长状况，收集20皿原丝体；新鲜配制20ml浓度0.7％溶解于8％甘露醇的崩溃酶，室温黑暗下溶解所收集的原丝体20分钟，1000rpm离心5分钟收集细胞，经过三次8％甘露醇洗涤后溶解于5ml甘露醇，显微计数一共约有9.6X106个；转移到再生培养基培养3天后显微观察发现再生效率约为99％。与现有技术相比得到的再生原生质体增加了一倍。