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公开(公告)号：CN116103165A
公开(公告)日：2023-05-12
申请号：CN202211697744.4
申请日：2022-12-28
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于电化学装置的重组毕赤酵母利用甲酸或CO2生长的方法。该方法以甲酸或CO2为碳源，用微生物电化学系统提供外部电能实现重组毕赤酵母利用电能生长的应用。本发明选取天然的甲基营养型菌株巴斯德毕赤酵母为研究对象，前期构建了过表达还原性甘氨酸途径高效固碳的毕赤酵母，将重组毕赤酵母应用于微生物电化学系统中，以甲酸或CO2作为碳源，以微生物电化学系统供应的电能为能量来源，探究电能对毕赤酵母生长代谢的作用情况。
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公开(公告)号：CN116024277A
公开(公告)日：2023-04-28
申请号：CN202211339688.7
申请日：2022-10-28
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用大肠杆菌联产丁二酸与戊二胺的方法。（1）以产赖氨酸的大肠杆菌NT1003△Met△Thr为底盘细胞构建生产丁二酸的大肠杆菌；（2）将步骤（1）所得重组工程菌中带入赖氨酸脱羧酶基因，构建生产1,5‑戊二胺的重组大肠杆菌；（3）将步骤（2）中所得的改造工程菌，于好氧/厌氧两阶段联产丁二酸和戊二胺。本发明可以显著解决目前生物基聚酰胺单体二元酸、二元胺合成过程酸碱用量大、固废产生量多等难题，为生物合成技术转化可再生资源合成材料单体提供了新的理论知识和关键技术，为有机胺、有机酸等制造过程的原料、过程与产品绿色化提供了参考，为推动材料产业的转型升级提供了借鉴。
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公开(公告)号：CN114854822A
公开(公告)日：2022-08-05
申请号：CN202210670475.6
申请日：2022-06-14
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12Q1/48 , C12Q1/34 , C12N15/70 , C12N15/54 , C07D311/94
Abstract: 本发明公开了一种苯乙醇胺‑N‑甲基转移酶的高通量筛选方法。在酶标仪的96孔板中加入底物去甲肾上腺素和S‑腺苷蛋氨酸、PBS缓冲液、S‑腺苷‑L‑同型半胱氨酸水解酶SAHH，加入酶样品苯乙醇胺‑N‑甲基转移酶，在微孔板震荡反应器中，20‑50℃，500‑1000rpm，反应1‑3h，4℃，3700rpm离心，取上清，再加入化合物NDCC反应0‑90min，反应过程中每隔1‑30min取出酶标板，酶标测定其吸光值；根据吸光值变化，酶活定义为在特定条件下，每分钟OD405nm吸光值的变化*1000000。本发明具有操作简单、成本低廉、检测准确等特点，对苯乙醇胺‑N‑甲基转移酶的定向进化具有深远意义。
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公开(公告)号：CN111154683B
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202010059551.0
申请日：2020-01-19
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种食甲基丁酸杆菌的优化培养方法及其应用。它是使用一型甲基化酶，在TOP10菌株体内对外源质粒进行甲基化修饰，得到已甲基化修饰的质粒DNA。采用的方法包括：（1）筛选适合梭菌的培养基；（2）筛选在梭菌中稳定存在的复制子；（3）确定最优的甲基化酶；在所有最优的条件下，可以使已甲基化修饰的质粒DNA转入存在限制修饰系统的食甲基丁酸杆菌，而不会被剪切降解，可以进行后续代谢路径改造。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111118077B
公开(公告)日：2022-03-29
申请号：CN202010021593.5
申请日：2020-01-09
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用玉米芯水解液中木糖一步发酵生产1,5‑戊二胺的方法，所述的方法为构建表达木糖脱氢酶xylb和赖氨酸脱羧酶CadA的基因工程菌，将基因工程菌制得的种子液接种至含有玉米芯水解液的发酵培养基中发酵生产1,5‑戊二胺。与现有技术中直接以木糖为碳源，1,5‑戊二胺产量为8.82g/L，木糖与戊二胺的质量转化率为0.44g/g，本发明以玉米芯水解液作为碳源，1,5‑戊二胺产量为15.7g/L，水解液中的木糖与戊二胺的质量转化率为0.36g/g。玉米芯比木糖价格低廉，相同成本下使用玉米芯水解液替代木糖具有客观的经济效益，且利用废弃农作物对环境友好。
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公开(公告)号：CN110628689B
公开(公告)日：2021-10-26
申请号：CN201910994832.2
申请日：2019-10-18
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种产丁二酸的大肠杆菌基因工程菌，该大肠杆菌中过表达电子转换通道蛋白和细胞色素c成熟系统I蛋白，所述电子转换通道的蛋白基因序列如SEQ ID NO:1所示，所述细胞色素c成熟系统I蛋白的基因序列如SEQ ID NO:2所示。本发明在大肠杆菌中构建适配性高的跨膜电子通道，使其可以引入外源电子，调节细胞内NAD+/NADH，为微生物细胞内氧化还原调控提供了新的解决方案。通过异源表达Mtr途径的基因的构建重组大肠杆菌，使得重组大肠杆菌获得传递电子的能力，丁二酸产量提高了33.5％。
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公开(公告)号：CN112899298A
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN202110255680.1
申请日：2021-03-09
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于酪胺‑β‑羟化酶催化产章鱼胺的方法，该方法具体包括以下步骤：生成表达酪胺‑β‑羟化酶的基因工程菌BL21(DE3)/pET28a‑TBH；培养基因工程菌BL21(DE3)/pET28a‑TBH和诱导表达TBH；收集上述菌体，用缓冲液重悬菌体后，匀浆破碎，离心消除杂质，得TBH的粗酶液；以酪胺为底物，加入抗坏血酸、富马酸、铜离子为辅因子，加入TBH粗酶液反应得产物章鱼胺(在有氧条件下进行)。本发明方法是首次系统的做出从酪胺到章鱼胺的酶催化生产工艺，催化效率高达20mg/L，环境友好，原料易得，生产成本低，工艺简单，反应条件温和，成功打通了这条路径，为以后的章鱼胺生产研究奠定了良好的基础。
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公开(公告)号：CN107937422B
公开(公告)日：2020-11-27
申请号：CN201711202952.1
申请日：2017-11-24
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种panD突变基因，其核苷酸序列如SEQ ID No.1或SEQ ID No.3所示，所述的panD突变基因SEQ ID No.1是panD基因的第34位碱基由A变成G；所述的panD突变基因SEQ ID No.3是panD基因的第50位碱基由T变成C。本发明还公开了包含上述突变基因的基因工程以及该基因工程菌在催化生产β‑丙氨酸中的应用。本发明包含panD突变基因的基因工程菌可以高效转化L‑天冬氨酸来生物法制备β‑丙氨酸，β‑丙氨酸的产量分别达42.81g/L和19.46g/L左右，比亲株分别提高了近4.8倍和2.2倍。
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