公开(公告)号：CN108795916B

公开(公告)日：2020-02-21

申请号：CN201810787121.3

申请日：2018-07-16

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈可泉 ,  王璟 ,  许晟 ,  毛静文 ,  高思远 ,  欧阳平凯

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P13/00 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种赖氨酸脱羧酶突变体，它是由氨基酸序列如SEQ ID No:2所示的赖氨酸脱羧酶通过定点突变得到，为如下(1)和(2)中的任意一种：(1)将氨基酸序列如SEQ ID No:2所示的赖氨酸脱羧酶的第12位的缬氨酸突变为半胱氨酸，第41位的天冬氨酸突变为半胱氨酸，得到赖氨酸脱羧酶突变体V12C/D41C；(2)将氨基酸序列如SEQ ID No:2所示的赖氨酸脱羧酶的第89位的亮氨酸突变为半胱氨酸，第442位的亮氨酸突变为半胱氨酸，得到赖氨酸脱羧酶突变体L89C/L442C。本发明提供的赖氨酸脱羧酶突变体其在耐碱及催化性能方面有大幅度提高，更加适合工业化生产需求，满足社会生产的要求。

公开(公告)号：CN106011191B

公开(公告)日：2019-11-19

申请号：CN201610500252.X

申请日：2016-06-30

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈可泉 ,  蔡沛沛 ,  王昕 ,  应晗笑 ,  王璟 ,  欧阳平凯

IPC: C12P13/00 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种利用表达了L‑赖氨酸2‑单加氧酶DavB和δ‑戊酰胺水解酶 DavA的大肠杆菌细胞作为催化剂，生物催化生产5‑氨基戊酸的方法，是对表达了DavBA的E.coliBL21（DE3）进行低温诱导表达，集菌，然后将其作为催化剂，在缓冲体系中，使体系中细胞OD600nm为5‑90，赖氨酸浓度为0‑400g/L，并在金属离子及表面活性剂的辅助下，全细胞催化生产5‑氨基戊酸的方法。本发明解决了发酵法生产周期长，代谢产物复杂，底物转化率低，产物分离提取困难，及能耗高的问题，也解决了酶法催化中级联催化过程不易实现的不足，提高了催化效率，同时省去了繁琐的酶纯化过程，生产成本更低。

公开(公告)号：CN107879940A

公开(公告)日：2018-04-06

申请号：CN201711153335.7

申请日：2017-11-17

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈可泉 ,  许晟 ,  田威龙 ,  李干禄 ,  魏国光 ,  何育美 ,  程琪 ,  王璟 ,  王靖 ,  欧阳平凯

IPC: C07C209/84 ,  C07C211/09 ,  C07C209/82 ,  C07C209/86

CPC classification number: C07C209/82 ,  C07C209/84 ,  C07C209/86 ,  C07C211/09

Abstract: 本发明公开了一种连续精制戊二胺的装置和方法，该装置包括原料池、气化釜、精馏塔、冷却釜、连续固液分离器；所述的原料池的出料口与气化釜的进料口相连，气化釜的气体出口与精馏塔的进料口相连，所述的气化釜的出料口与冷却釜的进料口相连、冷却釜的出料口与连续固液分离器的进料口相连。该方法包括将戊二胺原料液气化产生戊二胺与水的共沸气体，将所述共沸气体精馏，得到戊二胺；将气化残余的料液冷却，析出无机盐固体，然后对冷却后的料液连续固液分离，得到无机盐固体和戊二胺水溶液。本发明能够消除溶剂损失，节省能耗，解决传统过程中高盐废水难以处理的难题，并且可实现戊二胺的连续精制，显著提高戊二胺的收率与产品纯度，降低生产成本。

公开(公告)号：CN107602419A

公开(公告)日：2018-01-19

申请号：CN201710997300.5

申请日：2017-10-23

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈可泉 ,  许晟 ,  田威龙 ,  何育美 ,  王璟 ,  魏国光 ,  程琪 ,  王靖 ,  欧阳平凯

IPC: C07C263/10 ,  C07C265/14

Abstract: 本发明提供了一种基于二氧化碳耦合的1，5-戊二异氰酸酯制备方法，该方法包括全细胞催化赖氨酸脱羧生成戊二胺和二氧化碳，收集二氧化碳；使得到的二氧化碳与戊二胺反应生成戊二胺碳酸盐；戊二胺碳酸盐与光气反应，然后减压脱溶、减压精馏，得到1，5-戊二异氰酸酯。本发明提供的方法回收赖氨酸脱羧过程中释放的二氧化碳用于戊二胺成盐过程，无需额外二氧化碳投入，大幅降低了1，5-戊二异氰酸酯的生产成本，减少了戊二胺生成过程中的碳排放，更环保，并且合成的1，5-戊二异氰酸酯与购买外源二氧化碳合成的相比无明显差异。

公开(公告)号：CN106367445A

公开(公告)日：2017-02-01

申请号：CN201610724114.X

申请日：2016-08-25

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈可泉 ,  蔡沛沛 ,  王昕 ,  应晗笑 ,  王璟 ,  欧阳平凯

IPC: C12P7/44 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种全细胞生物催化生产戊二酸的方法。该方法先诱导表达并收集重组菌株E.coliBL-22AB-YDT的细胞和E.coli28LGOX的细胞，再将重组菌E.coli28LGOX的细胞和重组菌E.coliBL-22AB-YDT的细胞按1：1-5混合后加入底物L-赖氨酸和L-谷氨酸，使L-谷氨酸与L-赖氨酸的摩尔比为1：0.5-4，加入表面活性剂，全细胞催化生产戊二酸。本发明方法无需添加2-酮戊二酸，降低了生产成本，解决了发酵法生产周期长，代谢产物复杂，底物转化率低，产物分离提取困难，及能耗高的问题，也解决了酶法催化中级联催化过程不易实现的不足，提高催化效率，同时省了酶纯化过程。

公开(公告)号：CN105316377A

公开(公告)日：2016-02-10

申请号：CN201510779357.9

申请日：2015-11-13

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈可泉 ,  张阿磊 ,  王璟 ,  应晗笑 ,  曹逊 ,  欧阳平凯

IPC: C12P19/26 ,  C12N9/42

CPC classification number: Y02P20/582

Abstract: 一种产N-乙酰氨基葡萄糖的工艺，通过选取几丁质生产菌株发酵得几丁质酶粗酶液，向几丁质酶粗酶液中加入几丁质，发生亲和吸附，再将吸附上酶的几丁质分离，通过加入纯水搅拌后离心取上清液，最后出去蛋白和色素浓缩干燥得产品。本发明巧妙的利用了底物几丁质与几丁质酶的特异性亲和作用来吸附几丁质酶，除去了粗酶液里大部分杂质，然后对吸附有酶的几丁质进行降解；降解过程中采取了防止染菌措施；此方法能耗低，操作简单，污染少，且降解液中只含有产物、底物与极少量的蛋白，因此产物分离简单，纯度高，实现了以低价值的几丁质为原料低成本生产具有高医疗价值N-乙酰氨基葡萄糖的目的，具有显著的经济效益和社会效益。