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公开(公告)号：CN101235366A
公开(公告)日：2008-08-06
申请号：CN200810070684.7
申请日：2008-02-29
Applicant: 厦门大学
Abstract: 从重组大肠杆菌XM－LU制备内切－β－1，3－1，4－葡聚糖酶的方法，涉及一种细菌培养基及发酵工艺。提供一种具有较高活性，适于工业化生产的从重组大肠杆菌XM－LU制备内切－β－1，3－1，4－葡聚糖酶的方法。重组大肠杆菌XM－LU是大肠埃希氏菌(Escherichia coli)，发酵培养基甘油8～12g·L－1、玉米浆9～15g·L－1、NaNO36～ 10g·L－1、NaCl 10g·L－1、KH2PO42.4g·L－1、K2HPO412.5g·L－1，卡那霉素0.05g·L－1，余为水；液体发酵条件为通气量0.8～1.5L/(L ·min)，自第10～16h起持续流加甘油原液8～20h。
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公开(公告)号：CN116042559A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202310168149.X
申请日：2023-02-27
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明提供了一种热稳定亮氨酸脱氢酶的应用及其制备方法，属于基因工程技术领域。本发明中公开了的三种亮氨酸脱氢酶的氨基酸序列如：SEQ ID NO.1～3所示。这三种亮氨酸脱氢酶具有优异的温度适应范围、较广的pH的适应范围，在最适温度70℃下的半衰期高达30h左右，这三种酶可应用于高温条件下的氧化脱氨反应或还原胺化反应中。而且利用原核表达的这三种酶具有较高的纯度与生物学活性可以用于制备L‑叔亮氨酸。
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公开(公告)号：CN110396509B
公开(公告)日：2021-02-12
申请号：CN201910670475.4
申请日：2019-07-24
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明提供了一种改变葡萄糖脱氢酶的辅酶活性和偏好性的方法及其应用，涉及基因工程技术领域。本发明所述方法通过对葡萄糖脱氢酶保守序列GXXXGXG第四位氨基酸进行定点突变，无需通过大量筛选就可以简单直接获得改变辅酶活性和偏好性的突变蛋白，可以广泛应用酶催化辅酶再生反应。在本发明实施例中，通过对不同来源的葡萄糖脱氢酶中广泛存在的保守序列GXXXGXG中与烟酰胺辅酶核糖2’‑磷酸结合的第4位氨基酸进行定点突变，最终得到四种葡萄糖脱氢酶突变体T17G、T17K、T17R以及K17G，且经过验证，其酶活以及偏好性等都发生了变化。
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公开(公告)号：CN108676808B
公开(公告)日：2021-02-12
申请号：CN201810516761.0
申请日：2018-05-25
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明提供了一种重组质粒pET28a‑Ag43、表面展示质粒、重组工程菌及其应用，属于基因工程技术领域。所述重组质粒pET28a‑Ag43，自转运蛋白Ag43编码基因插入到质粒pET28a的EcoRI和HindIII多克隆位点处；所述自转运蛋白Ag43编码基因具有序列表中SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。外源蛋白基因片段可以通过双酶切方式快速连接至重组质粒的多克隆位点，构建重组工程菌，实现外源蛋白在细胞表面展示表达，不需要破壁释放胞内蛋白酶，同时酶蛋白固定到细胞表面，方便酶蛋白的回收和重复利用。
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公开(公告)号：CN110396509A
公开(公告)日：2019-11-01
申请号：CN201910670475.4
申请日：2019-07-24
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明提供了一种改变葡萄糖脱氢酶的辅酶活性和偏好性的方法及其应用，涉及基因工程技术领域。本发明所述方法通过对葡萄糖脱氢酶保守序列GXXXGXG第四位氨基酸进行定点突变，无需通过大量筛选就可以简单直接获得改变辅酶活性和偏好性的突变蛋白，可以广泛应用酶催化辅酶再生反应。在本发明实施例中，通过对不同来源的葡萄糖脱氢酶中广泛存在的保守序列GXXXGXG中与烟酰胺辅酶核糖2’-磷酸结合的第4位氨基酸进行定点突变，最终得到四种葡萄糖脱氢酶突变体T17G、T17K、T17R以及K17G，且经过验证，其酶活以及偏好性等都发生了变化。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103451247B
公开(公告)日：2015-08-19
申请号：CN201310416765.9
申请日：2013-09-13
Applicant: 厦门大学
Abstract: 一种花生四烯酸的制备方法，涉及花生四烯酸。对高山被孢霉产ARA的培养条件进行优化，在基础培养基分批发酵，在优化培养基中以酵母粉和玉米浆为氮源分批发酵，再以酵母粉为氮源进行的发酵罐放大实验，对高山被孢霉在优化培养基中以玉米浆和酵母粉为混合氮源进行培养，将优化培养基中的氮源替换为玉米浆和酵母粉，得混合氮源优化培养基；对高山被孢霉在混合氮源优化培养基中分批发酵；对高山被孢霉高糖驯化及对驯化后的菌种在混合氮源优化培养基中分批发酵，在当葡萄糖浓度降至10g/L时，流加600g/L葡萄糖，使残糖控制在10g/L左右，培养168h后开始收获干菌体、油脂和ARA。
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公开(公告)号：CN104388486A
公开(公告)日：2015-03-04
申请号：CN201410800324.3
申请日：2013-09-13
Applicant: 厦门大学
CPC classification number: C12P7/6427 , C12P7/64
Abstract: 花生四烯酸的制备方法，涉及花生四烯酸。对高山被孢霉产ARA的培养条件进行优化，在基础培养基分批发酵，在优化培养基中以酵母粉和玉米浆为氮源分批发酵，再以酵母粉为氮源进行的发酵罐放大实验，对高山被孢霉在优化培养基中以玉米浆和酵母粉为混合氮源进行培养，将优化培养基中的氮源替换为玉米浆和酵母粉，得混合氮源优化培养基；对高山被孢霉在混合氮源优化培养基中分批发酵；对高山被孢霉高糖驯化及对驯化后的菌种在混合氮源优化培养基中分批发酵，再以酵母粉为氮源进行的发酵罐放大实验，菌体生长正常，未发生自溶现象，并获得干菌体、油脂和ARA。
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公开(公告)号：CN103834698A
公开(公告)日：2014-06-04
申请号：CN201410113472.8
申请日：2014-03-25
Applicant: 厦门大学
Abstract: 一种通过温度转换发酵生产含γ-亚麻酸油脂的方法。涉及生产γ-亚麻酸油脂的方法。将小克银汉霉菌接种于PDA平板培养基中培养，再将菌块接种于新PDA平板培养基中再培养，新PDA平板培养基上的菌块接种于另一新的PDA平板培养基中培养；然后将另一新的PDA平板培养基上的菌块接种于装有种子培养基的摇瓶中，pH值调至5～7，培养后，得摇瓶种子；将所得摇瓶种子接种于装有发酵培养基的摇瓶中，pH值调至5～7，先于30～40℃培养6～8d，转速为100～250rpm，再于10～20℃培养4～6d，转速为100～250rpm，得发酵液，抽滤，润洗，得湿菌体，烘干、研磨、萃取，得到含γ-亚麻酸油脂。
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公开(公告)号：CN101838614B
公开(公告)日：2013-09-18
申请号：CN201010150422.9
申请日：2010-04-16
Applicant: 厦门大学
Abstract: 一种虾青素生产菌株及其诱变筛选方法与应用，涉及一种微生物菌株及其获取方法。所述一种虾青素生产菌株为红法夫酵母(Phaffia rhodozyma)的诱变菌株N1806-04。以红法夫酵母为出发菌株，采用酶法制备红法夫酵母原生质体，再通过NTG诱变及β-紫罗酮筛选等方法进行虾青素生产菌株的选育，获得虾青素生产菌株，连续传代5次后虾青素的产量稳定。将该虾青素生产菌株用发酵罐放大培养，其虾青素产量和含量分别可达500～600mg/L和5000～6300mg/kg(细胞干重)，生物量可达80～110g/L。虾青素产量和含量以及对应的生物量都满足了工业化生产的要求，具有很大的应用前景。
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公开(公告)号：CN103204951A
公开(公告)日：2013-07-17
申请号：CN201310167325.4
申请日：2013-05-08
Applicant: 厦门大学
IPC: C08B37/00
Abstract: 裂殖壶藻胞外多糖的分离纯化方法，涉及胞外多糖。包括以下步骤：1）以裂殖壶菌发酵液为原料，用乙醇沉淀发酵液中多糖，有机溶剂清洗不溶物，再用去离子水溶解不溶物，三氯乙酸法去除蛋白，再次使用乙醇沉淀得多糖粗品，使用去离子水为溶媒，配制成待分级溶液；2）将步骤1）配制成的待分级溶液经快流速纤维素琼脂糖凝胶阴离子交换树脂梯度洗脱分管收集，硫酸苯酚法测定各管多糖浓度，绘制洗脱曲线，将收集的各个部分合并，浓缩，经透析膜出去小分子杂质，冻干后即得分离纯化的裂殖壶藻胞外多糖。操作简便﹑高效，适用于大规模工业生产，获得多糖性质专一，生理活性高。
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