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公开(公告)号:CN101182494A
公开(公告)日:2008-05-21
申请号:CN200710131863.2
申请日:2007-09-05
Applicant: 扬州大学
Abstract: 基因VII型新城疫病毒致弱株A-NDV-VII及其构建方法,涉及应用反向遗传技术,本发明利用已建立的鹅源新城疫病毒ZJ1株的反向遗传操作平台,将具有高繁殖性能的新城疫病毒分离株JS-5-05-Go的两个囊膜糖蛋白F和HN基因片段对ZJ1株基因组的对应部分进行替换,得到重组病毒NDV-VII,对重组病毒的F基因进行致弱突变后拯救出高度致弱的基因VII型新城疫病毒株A-NDV-VII。同时该病毒在鸡胚上具有较高的繁殖滴度,适合于疫苗的大规模生产,可用于制造疫苗。
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公开(公告)号:CN114990078B
公开(公告)日:2024-03-26
申请号:CN202210754217.6
申请日:2022-06-29
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了带有His标签的重组新城疫病毒的构建方法及用途。基于已建立的基因VIId亚型新城疫病毒I4强毒株反向遗传操作系统,将His标签(6×His)与I4基因组全长转录载体pNDVI4中的HN基因融合,成功构建带有His标签的重组新城疫病毒基因组全长cDNA感染性克隆pNDVI4‑HN‑His。经转染得到重组新城疫病毒rNDVI4‑HN‑His,可通过标签蛋白抗体用于重组病毒HN蛋白的纯化及其与宿主蛋白互作研究。
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公开(公告)号:CN112326963B
公开(公告)日:2024-02-06
申请号:CN202011236849.0
申请日:2020-11-09
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , C07K14/11 , C07K1/22 , C12N15/44 , C12N15/85
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及A型流感病毒PB2cap蛋白的真核表达及其应用。本发明公开了真核表达的A型流感病毒PB2cap蛋白在检测A型流感病毒RNA帽结合活性中的应用。本发明构建了基于真核表达载体pCAGGS的真核表达质粒pCAGGS‑PB2cap(aa:318‑483),并经瞬时转染将PB2cap进行真核表达,通过该表达蛋白与m7GTP在体外的结合能力来评估流感病毒的RNA帽结合活性,可为A型流感病毒PB2蛋白功能的差异研究提供新的检测指标。
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公开(公告)号:CN116355904A
公开(公告)日:2023-06-30
申请号:CN202310147990.0
申请日:2023-02-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , A61K9/127 , A61K47/28 , A61K47/24 , A61K31/7105 , A61P31/16 , C12N15/85 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种广谱抗流感病毒的长链非编码RNA(LncRNA#61)及其应用。LncRNA#61显著抑制各亚型流感病毒的复制,包括人源H1N1病毒以及各种高致病性和低致病性的禽流感病毒。本发明构建了基于脂质纳米颗粒体内递送LncRNA#61的lncRNA脂质纳米颗粒,基于该lncRNA脂质纳米颗粒递送的LncRNA#61发挥了良好的体内抗病毒效果。此外,解析了LncRNA#61的抗病毒机制,鉴定了其抗病毒关键功能区,发现其通过降低病毒聚合酶活性和抑制聚合酶蛋白核聚集发挥抗病毒作用。
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公开(公告)号:CN116286884A
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202310147988.3
申请日:2023-02-22
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/44 , C12N15/866 , C12N7/01 , C12N7/04 , A61K39/145 , A61P31/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了HA蛋白糖基化修饰模式改变的重组禽流感病毒样颗粒及其制备方法和应用。构建了三种表达不同糖基化修饰模式的H7N9高致病性禽流感病毒HA蛋白,然后基于前期构建的表达NA蛋白、M1蛋白的重组杆状病毒,将分别表达HA、NA和M1蛋白的重组杆状病毒共感染悬浮的昆虫细胞,收获在细胞内自行组装的HA蛋白上包含不同修饰模式的H7N9亚型禽流感病毒样颗粒。制备的病毒样颗粒疫苗免疫鸡可诱导机体产生特异性抗体。其中,当VLP疫苗HA蛋白的第38、133和158位同时发生糖基化修饰时效果最佳:显著增加抗原产量、显著提升VLP疫苗诱导的体液免疫、显著减轻SPF鸡的排毒和肺损伤。
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公开(公告)号:CN107384875A
公开(公告)日:2017-11-24
申请号:CN201710780038.9
申请日:2017-09-01
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N7/00 , C12N15/85 , C12N2760/16122 , C12N2760/18121
Abstract: 本发明涉及克服雏鸡新城疫母源抗体影响的嵌合新城疫病毒载体H7活疫苗候选株及其构建方法,所述新城疫疫苗株,它的保藏号CGMCC No.13798。其构建方法是利用能够在新城疫抗体存在下高效复制的嵌合病毒rAI4-TFHN的反向遗传操作平台,将禽流感H7N9亚型毒株的HA序列插入AI4-T4FHN株基因组全长转录载体中,得到含有禽流感病毒H7N9亚型HA基因的重组新城疫病毒基因组全长cDNA克隆pNDV/rAI4-T4FHN-H7。经转染获得的重组病毒AI4-T4FHN-H7在鸡胚上具有较高的繁殖滴度,连续传代仍能稳定表达HA蛋白,适合于疫苗的大规模生产,可用于制造疫苗。
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公开(公告)号:CN107254450A
公开(公告)日:2017-10-17
申请号:CN201710596136.7
申请日:2017-07-20
Applicant: 扬州大学
CPC classification number: C12N7/00 , C12N15/85 , C12N2760/18121 , C12N2760/18152
Abstract: 本发明属于应用反向遗传和基因替换技术领域,具体涉及克服鸡新城疫母源抗体影响的嵌合新城疫病毒疫苗载体候选株及其构建方法。所述的候选株是禽副黏病毒I型AI4‑T4FHN,其保藏号CGMCC No:12987。本发明利用已建立的新城疫病毒基因VII型致弱毒AI4株的反向遗传操作平台,将禽副黏病毒2型的囊膜蛋白F和HN胞外区序列对AI4株基因组的对应部分进行替换,拯救得到重组病毒AI4‑T4FHN。禽副黏病毒2型与新城疫病毒交叉反应能力很弱且对鸡不致病。故该嵌合病毒在鸡胚上具有与母本病毒相似的高繁殖能力,同时能在新城疫高母源抗体水平的鸡体内有效复制,是1株新型疫苗载体。
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公开(公告)号:CN105002146A
公开(公告)日:2015-10-28
申请号:CN201510490223.5
申请日:2015-08-11
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及表达H9亚型禽流感病毒(AIV)血凝素蛋白的重组火鸡疱疹病毒(HVT)rHVT-H9HA及其构建方法,所述疫苗株rHVT-H9HA的保藏号为CGMCC No:10907。从载体pEGFP-C1中分离GFP表达盒插入到HVT基因组中,获得重组病毒rHVT-GFP。通过再次同源重组将H9N2亚型AIV流行株A/Chicken/Jiangsu/WJ57/2012的HA基因替换重组病毒rHVT-GFP的GFP基因,挑选不带荧光的重组病毒,获得稳定表达H9亚型AIV HA基因的火鸡疱疹病毒株rHVT-H9HA。该重组病毒株成本低、安全性好、免疫期长,适合于疫苗的大规模生产,可用于制造疫苗。
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公开(公告)号:CN104178457A
公开(公告)日:2014-12-03
申请号:CN201410411768.8
申请日:2014-08-20
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及工程细胞系克隆MDCK-hSiat7e-ST3GalIV及其用途,更具体地涉及一株工程细胞系克隆MDCK-hSiat7e-ST3GalIV,它的保藏号是CGMCC NO:9330。还公开了该细胞系在降低MDCK细胞贴壁性能和提高禽流感病毒分离株的生长滴度中的应用;在抗禽流感病毒药物的筛选、中和抗体的测定中的应用。
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公开(公告)号:CN103468651A
公开(公告)日:2013-12-25
申请号:CN201310465927.8
申请日:2013-10-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 表达传染性支气管炎病毒S1蛋白的重组新城疫疫苗株rAI4-S1及其构建方法,所述新城疫疫苗株rAI4-S1,它的保藏号CGMCC No:8054。其构建方法是利用已建立的基因VII型NDV致弱毒AI4株的反向遗传操作平台,将SEQ ID NO.7所示的序列插入AI4株基因组全长转录载体pNDV/AI4中,得到含有传染性支气管炎病毒S1基因的重组新城疫病毒基因组全长cDNA克隆pNDV/AI4-S1。经转染获得的重组病毒rAI4-S1在鸡胚上具有较高的繁殖滴度,连续传代仍能稳定表达S1蛋白,适合于疫苗的大规模生产,可用于制造疫苗。
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