一种用添加山梨醇提高发酵生产碱性果胶酶产量的方法

    公开(公告)号:CN101525604B

    公开(公告)日:2011-03-30

    申请号:CN200910030831.2

    申请日:2009-04-17

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种用添加山梨醇提高发酵生产碱性果胶酶产量的方法,涉及碳源添加策略在发酵过程优化中的应用技术领域。本发明用重组毕赤酵母GS115为发酵菌株,在发酵诱导期以恒速或加速添加山梨醇到发酵液中,以提高细胞活力,减弱甲醇的毒害作用,进而提高碱性果胶酶的产量。较低的山梨醇添加量不仅不会抑制甲醇对菌体的产酶效果,还可以从一定程度上削弱菌体受到的甲醇毒害作用,从而进一步提高产酶效率。当山梨醇采用变速流加(0.9g/h-7.2/h)时,酶活从对照的930U/mL提高到1541U/mL。本发明工艺简单有效,而且可应用于今后果胶酶的工业化生产中,且对其它的毕赤酵母发酵过程优化具有一定的指导意义。

    一种谷氨酰胺转胺酶发酵过程中补料的方法

    公开(公告)号:CN101698836A

    公开(公告)日:2010-04-28

    申请号:CN200910223521.2

    申请日:2009-11-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明提供了一种谷氨酰胺转胺酶发酵过程中的补料方法,特别涉及一种提高谷氨酰胺转胺酶发酵过程中溶氧的补料方法。在吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus CCTCC M 203062)发酵8h-16h,通过流加氮比为1.0-1.5的葡萄糖(800g/L)与蛋白胨(800g/L-1200g/L)的混合液控制比生长速率为0.15h-1,16h-24h,通过流加混合液控制比生长速率为0.10h-1。此方法一方面避免氮源被谷氨酰胺转胺酶交联,影响了发酵过程中的溶氧水平;另一方面通过流加氮源的方式,提高了菌体的生物量。该方法的效果是显著的,生物量提高125-140%,酶活提高了58-63%。

    一种抑制谷氨酰胺转胺酶发酵法制酶制剂中蛋白酶的方法

    公开(公告)号:CN1724658A

    公开(公告)日:2006-01-25

    申请号:CN200510040489.6

    申请日:2005-06-08

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种抑制谷氨酰胺转胺酶发酵法制酶制剂中蛋白酶的方法,属于酶制剂技术领域。本发明采用谷氨酰胺转胺酶发酵液制备酶制剂,在酶制剂的制备过程中或应用过程中通过添加金属离子鳌合剂抑制其中的蛋白酶活性,避免蛋白酶的水解作用对谷氨酰胺转胺酶的交联作用产生不利的影响。本发明方法操作简便、高效,省去了分离纯化等工序带来的繁琐,极易在工业生产中运用。

    一种产PVA脱氢酶的基因工程菌及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN102080054B

    公开(公告)日:2012-07-25

    申请号:CN201010581331.0

    申请日:2010-12-10

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种产PVA脱氢酶(polyvinylalcoholdehydrogenase,EC1.1.99.23,简称PVADH)的基因工程菌及其构建方法与应用,属于遗传工程领域。本发明通过将优化后的PVA脱氢酶基因连接到毕赤酵母GS115(Pichiapastoris)染色体上,构建了一株高效分泌表达PVA脱氢酶的基因工程菌,解决了PVA脱氢酶产量低的问题。应用该菌种生产PVA脱氢酶,产量高达110U/mL,工艺简单、便于工业化应用。

    一种提高发酵法生产PVA降解酶产量的方法

    公开(公告)号:CN101724609B

    公开(公告)日:2012-05-30

    申请号:CN200910260992.0

    申请日:2009-12-18

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高发酵法生产PVA降解酶产量的方法。通过在发酵过程中添加1,4-丁二醇,提高了PVA降解酶的产量。通过两步发酵法、三步发酵法,发酵结束后,PVA降解酶产量分别达到2.92U/mL和3.43U/mL,与不添加1,4-丁二醇相比,产量分别提高了2.6倍和3倍。本发明还具有操作简单、原料价格便宜等优点。

    一种产谷氨酰胺转胺酶活化蛋白酶抑制剂的基因工程菌及其构建方法

    公开(公告)号:CN102080064A

    公开(公告)日:2011-06-01

    申请号:CN201010579755.3

    申请日:2010-12-09

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种产谷氨酰胺转胺酶活化蛋白酶抑制剂的基因工程菌及其构建方法,属于遗传工程领域。本发明通过分子生物学的手段,首次得到了吸水链霉菌(Streptomyceshygroscopicus)中TGase活化蛋白酶抑制剂(TAPI)的完整基因序列,并根据得到序列构建了pET22b(+)-TAPI重组质粒,使TAPI在大肠杆菌中表达,应用该菌种生产TAPI,产量可达10mg/L。本方法工艺简单、产品产量高等诸多优点,开发了一种安全性、温和性和“绿色性”的新型蛋白质类表面活性剂;并且该菌株生产的目的蛋白直接分泌到胞外,便于分离纯化。本发明为用基因手段表达蛋白质类表面活性剂提供了参考和依据,也为表面活性剂的发展拓展了方向。

Patent Agency Ranking