一种耐盐耐有机溶剂的低温碱性酯酶EstSL3及其基因和应用

    公开(公告)号:CN105176943B

    公开(公告)日:2018-09-18

    申请号:CN201510668911.6

    申请日:2015-10-13

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明涉及基因工程领域,本发明提供了一种来源于嗜盐嗜碱菌的酯酶EstSL3,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,上述酯酶的基因组编码基因estSL3,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,以及包含该基因的重组载体和重组菌株。该酯酶EstSL3最适pH 9.0,最适反应温度30℃,在0℃的时候还具有70%左右的酶活,表明该酶是一个低温酯酶。在0.5–4.0 M NaCl存在的情况下剩余98%以上的酶活,且在4 M和5M NaCl的浓度下非常稳定。本发明的酯酶具有低温、碱性、耐盐、耐洗涤剂和耐有机溶剂的特点,可应用于精细化工、制药、洗涤剂以及食品等工业领域。

    一种耐盐耐有机溶剂的低温碱性酯酶EstSL3及其基因和应用

    公开(公告)号:CN105176943A

    公开(公告)日:2015-12-23

    申请号:CN201510668911.6

    申请日:2015-10-13

    Applicant: 福州大学

    CPC classification number: C12N9/18 C12Y301/01001

    Abstract: 本发明涉及基因工程领域,本发明提供了一种来源于嗜盐嗜碱菌的酯酶EstSL3,其氨基酸序列如SEQ ID NO. 1所示,上述酯酶的基因组编码基因estSL3,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,以及包含该基因的重组载体和重组菌株。该酯酶EstSL3最适pH 9.0,最适反应温度30℃,在0℃的时候还具有70%左右的酶活,表明该酶是一个低温酯酶。在0.5–4.0 M NaCl存在的情况下剩余98%以上的酶活,且在4M和5M NaCl的浓度下非常稳定。本发明的酯酶具有低温、碱性、耐盐、耐洗涤剂和耐有机溶剂的特点,可应用于精细化工、制药、洗涤剂以及食品等工业领域。

    一种血清白蛋白及其表达载体

    公开(公告)号:CN102399286A

    公开(公告)日:2012-04-04

    申请号:CN201110405289.1

    申请日:2011-12-08

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明提供了一种血清白蛋白及其表达载体,属于生物技术领域。本发明血清白蛋白,为如下(a)或(b)所示的蛋白质:(a)其氨基酸序列如SEQNO.1所示;(b)在(a)限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或叠加一个或几个氨基酸衍生的蛋白质且与(a)的蛋白质具有相同的功能。本发明还提供了一种表达上述的血清白蛋白的重组载体。本发明提供一种血清白蛋白(DOF)易被酶解为多肽或氨基酸等小分子物质,经免疫家兔制备的多克隆抗体与纯化的重组血清白蛋白能够特异性地结合;本发明提供的重组血清白蛋白能促大鼠成骨样UMR-106细胞增值。

    一种多酶级联合成羟基酪醇的方法

    公开(公告)号:CN118389613A

    公开(公告)日:2024-07-26

    申请号:CN202410669480.4

    申请日:2024-05-28

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 林娟 许炼 刘文凯

    Abstract: 本发明公开了一种多酶级联合成羟基酪醇的方法,包括:1)以3,4‑二羟基苯甲醛、L‑苏氨酸、甲酸钠、NAD+为原料,通过L‑苏氨酸转醛酶、乙醇脱氢酶、甲酸脱氢酶催化合成L‑苏式‑3‑(3,4‑二羟基苯基)丝氨酸;2)以L‑苏式‑3‑(3,4‑二羟基苯基)丝氨酸为底物,添加葡萄糖、NAD+并通过苯丝氨酸脱水酶、α‑酮酸脱羧酶、醛还原酶及葡萄糖脱氢酶级联催化合成羟基酪醇。利用本发明提供的合成方法,羟基酪醇的产率>99%,时空产率达到0.88g/L/h,为目前最高水平,具有巨大的工业化应用前景,适宜进一步推广应用。

    多酶级联合成(1R,2R)-4-甲砜基苯丝氨醇的方法及其应用

    公开(公告)号:CN117646044A

    公开(公告)日:2024-03-05

    申请号:CN202310823682.5

    申请日:2023-07-06

    Abstract: 本发明公开多酶级联合成(1R,2R)‑4‑甲砜基苯丝氨醇的方法,以D‑丝氨酸、对甲砜基苯甲醛和D‑丙氨酸为底物,利用氨基酸氧化酶、丙酮酸脱羧酶和转氨酶为催化剂,通过多酶级联反应合成(1R,2R)‑4‑甲砜基苯丝氨醇。合成路线为:D‑丝氨酸首先被氨基酸氧化酶转化为β‑羟基丙酮酸,β‑羟基丙酮酸和对甲砜基苯甲醛在丙酮酸脱羧酶的催化下生成(R)‑1‑对甲砜基苯基‑1‑羟基‑2‑氧代‑3‑丙醇(即中间产物2a),中间产物2a和D‑丙氨酸继续在转氨酶的催化下转化为(1R,2R)‑4‑甲砜基苯丝氨醇。本方案无需添加有机溶剂且无副产物生成,转化率高达99.9%,建立了一条新的(1R,2R)‑4‑甲砜基苯丝氨醇的高效绿色酶法合成路线。

    一种化学酶法偶联合成氟苯尼考的方法

    公开(公告)号:CN117185971A

    公开(公告)日:2023-12-08

    申请号:CN202311136364.8

    申请日:2023-09-05

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明公开了一种化学酶法偶联合成氟苯尼考的方法,以β‑氟丙酮酸钠盐、对甲砜基苯甲醛和D‑丙氨酸为底物,在丙酮酸脱羧酶和转氨酶的级联催化下,“一锅法”合成氟苯尼考胺,再经酰胺化反应合成氟苯尼考。合成路线包括:β‑氟丙酮酸钠盐和对甲砜基苯甲醛在丙酮酸脱羧酶的催化下生成(1R)‑3‑氟‑1‑羟基‑1‑对甲砜基苯基‑2‑丙酮;(1R)‑3‑氟‑1‑羟基‑1‑对甲砜基苯基‑2‑丙酮和D‑丙氨酸继续被反应体系中的转氨酶转化为氟苯尼考胺,最后氟苯尼考胺经一步化学的酰胺化反应合成氟苯尼考。本发明与传统的氟苯尼考化学合成法相比,步骤更少,且中间涉及构型的步骤均由高立体选择性的酶催化替代,省却拆分步骤,反应过程更加绿色环保,原子经济性更高,适宜推广应用。

    羰基还原酶突变体及光学纯3-羟基四氢呋喃的制备与光学纯度测定方法

    公开(公告)号:CN117070484A

    公开(公告)日:2023-11-17

    申请号:CN202310993018.5

    申请日:2023-08-08

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明公开了羰基还原酶突变体及光学纯3‑羟基四氢呋喃的制备与光学纯度测定方法。光学纯3‑羟基四氢呋喃的制备方法是以四氢呋喃‑3‑酮为底物,经羰基还原酶突变体不对称还原合成单一立体构型的3‑羟基四氢呋喃。所述突变体衍生于近平滑念珠菌(Candida metapsilosis)来源的羰基还原酶CmCR,CmCR的氨基酸序列和核苷酸序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。本发明采用CmCR的突变体制备光学纯的3‑羟基四氢呋喃,与化学法相比,具有环境污染小、效率高、立体选择性高等优点,与酶拆分法相比具有更高的光学纯度和原子经济性,ee值和转化率都达99%,为目前酶法制备单一构型的3‑羟基四氢呋喃的最高水平。

    一种羰基还原酶突变体及其在制备甾体激素--睾酮中的应用

    公开(公告)号:CN113528475B

    公开(公告)日:2023-04-21

    申请号:CN202110831411.5

    申请日:2021-07-22

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种羰基还原酶突变体及其在制备甾体激素‑‑睾酮中的应用。将羰基还原酶突变体PmCRm与甲酸脱氢酶BstFDH_m在大肠埃希氏菌中共表达,并以该共表达工程菌的静息细胞作为生物催化剂催化雄甾‑4‑烯‑3,17‑二酮合成睾酮。该生物催化剂具有较高的催化活性、区域选择性和立体选择性,可以在10 h以内完全转化28.8 g/L雄甾‑4‑烯‑3,17‑二酮生成目标产物睾酮,且无副产物产生,其底物投料量、转化率和时空转化率皆为国内生物法制备睾酮的最高水平,经过分离纯化,产物回收率高达95%以上,说明该生物催化剂是睾酮绿色合成的高效催化剂。

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