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公开(公告)号:CN104726495A
公开(公告)日:2015-06-24
申请号:CN201510131862.2
申请日:2015-03-25
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N15/55 , C12N15/12 , C12N5/10 , C12N15/873
Abstract: 本发明公开了一种基于TALEN介导的基因打靶敲除山羊BLG的载体及重组细胞。本发明根据山羊β-乳球蛋白基因,设计并构建了针对其第一外显子的TALEN真核表达载体以及含有较短同源臂的BLG基因敲除载体,与以TALEN表达载体为模板体外转录的mRNAs共同转染山羊胎儿成纤维细胞,经药物筛选及鉴定后得到β-乳球蛋白基因敲除细胞。本发明利用TALEN技术大大提高了基因打靶效率,同时较短同源臂的利用可以更方便高效的进行中靶细胞的筛选,mRNAs的利用则避免了TALEN表达载体在基因组中的随机整合。
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公开(公告)号:CN102226199A
公开(公告)日:2011-10-26
申请号:CN201110109950.4
申请日:2011-04-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/85
Abstract: 本发明公开了一种用于生产外源蛋白的山羊β-乳球蛋白基因座打靶载体构建方法,以山羊β-乳球蛋白基因5’端调控序列BLG5作为5’端同源臂,以山羊β-乳球蛋白基因3’端包含第6、第7外显子及下游的序列BLG3作为3’端同源臂,以第5外显子和第5内含子的部分序列E5作为连接序列用以将正筛选标记基因置于第5内含子中;将BLG5、目的基因及E5顺次连接,再和BLG3分别连接到通用型打靶载体中正筛选标记两侧。在需要时可以将目标蛋白的基因组DNA或cDNA序列插入到该通用打靶载体的目的基因位置处或直接置换掉原来的目的基因,然后用所获得的打靶载体转染山羊胎儿成纤维细胞或其他细胞,筛选出中靶的细胞,通过体细胞核移植技术获得能在乳腺中生产目标蛋白的转基因山羊。
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公开(公告)号:CN118477174A
公开(公告)日:2024-08-13
申请号:CN202410716374.7
申请日:2024-06-04
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种布鲁氏菌OMP16单克隆抗体在制备抑制布鲁氏菌的产品中的应用,布鲁氏菌OMP16单克隆抗体的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。经体内和体外试验,本发明验证了OMP16单克隆抗体作为一种治疗性抗体在治疗布鲁氏菌病上的潜力。
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公开(公告)号:CN117860665A
公开(公告)日:2024-04-12
申请号:CN202410044232.0
申请日:2024-01-12
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明提供了一种奶牛富血小板血复合凝胶的制备方法,该方法为:将产后奶牛的血液分别进行两次离心,得到富血小板血浆;将50万单位青霉素注射液、盐酸利多卡因和凝血酶混合均匀,形成制剂;将制剂和富血小板血浆混合,得到奶牛富血小板血复合凝胶。本发明制备的奶牛富血小板血复合凝胶中,PRP具有促进伤口愈合的作用,青霉素抗菌,盐酸利多卡因具有麻醉作用,并且可进行缓释,使得药效可以长时间作用于患部,促进组织再生,并且减少奶牛疼痛,加强动物福利。
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公开(公告)号:CN116559469A
公开(公告)日:2023-08-08
申请号:CN202310741712.8
申请日:2023-06-21
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种血清因子标志物水平分析辅助预测不同繁殖方式奶牛早期妊娠状态的方法,通过检测血清因子(P4、PAG、EPF)水平来对不同繁殖方式奶牛进行妊娠诊断,涉及奶牛早期妊娠诊断技术领域,具体方法为检测胚胎移植牛第21d血清P4水平以及胚胎移植牛和人工授精牛第28d的血清PAG、EPF水平(天数计算以奶牛经同期发情程序或出现爬跨行为的当天定义为0天),并与这三种因子在相应天数的cut‑off值进行比对,以排查空怀牛和妊娠牛。本发明方法具有灵敏度高准确性强的特点,能显著提高奶牛早期妊娠诊断的准确率,缩短牛群空怀天数以及减少空怀导致的产犊、产奶、饲料以及人工等方面的经济损失。
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公开(公告)号:CN116103299A
公开(公告)日:2023-05-12
申请号:CN202211031385.9
申请日:2022-08-26
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/12 , C12N15/85 , C12N15/66 , C07K14/705
Abstract: 本发明公开了牛RORα基因的克隆、真核表达载体的构建及其应用,属于基因的克隆、真核表达载体的构建技术领域,本发明提供的牛RORα基因的克隆、真核表达载体的构建及其应用,成功构建了牛RORα基因的真核表达载体,补充了牛RORα基因分子水平研究的空白,目前关于RORα基因功能的研究主要以小鼠和人类的基因和细胞为模型,我们成功构建了牛RORα基因的研究模型,确认了NCBI数据库中牛RORα基因预测序列(XM_024997674)的正确性,RORα真核表达载体经过酶切与测序双重鉴定,质量可靠。
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公开(公告)号:CN111440755B
公开(公告)日:2023-03-10
申请号:CN202010283492.5
申请日:2020-04-10
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一株布鲁氏菌S2疫苗株DnaA条件性诱导缺失菌株,该菌株为在条件性诱导外源DnaA表达的基础上缺失内源性DnaA基因的布鲁氏菌S2疫苗株,可用于制备布鲁氏菌减毒疫苗。布鲁氏菌S2疫苗株DnaA条件性诱导缺失菌株为探究DnaA对布鲁氏菌的致病机制及区分自然感染和人工免疫的特性奠定基础,对预防和控制布病具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN113337530B
公开(公告)日:2022-12-27
申请号:CN202110622916.0
申请日:2021-06-04
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/20 , C12N15/62 , C12N15/10 , C12N1/21 , C12P21/02 , C07K14/555 , C07K1/14 , C07K1/34 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种可溶性bIFNT成熟肽基因克隆菌株的构建方法,包括以下步骤:(1)bIFNT成熟肽基因的扩增与获取;(2)bIFNT成熟肽基因克隆质粒的构建;(3)可溶性bIFNT成熟肽基因克隆菌株的构建;其中,所述可溶性bIFNT成熟肽基因克隆菌株的bIFNT成熟肽的基因序列如SEQ.ID.NO.1所示。同时,本发明还公开了可溶性bIFNT成熟肽表达菌株的构建方法及产物的诱导表达和纯化方法。本发明提供的方法成功构建了与天然bIFNT成熟肽基因序列完全一致的可溶性bIFNT成熟肽基因克隆菌株和可溶性bIFNT成熟肽表达菌株,应用大肠杆菌原核表达体系,可实现低成本大规模制备rbIFNT。
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公开(公告)号:CN115043939A
公开(公告)日:2022-09-13
申请号:CN202210720902.7
申请日:2022-06-16
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及免疫检测技术领域,具体涉及一种检测布鲁氏菌的Omp16特异性纳米抗体、表达载体及其应用,通过前期建立的布鲁氏菌纳米抗体展示文库,利用OMP16重组蛋白进行筛选,获得布鲁氏菌OMP16纳米抗体核酸序列,该纳米抗体能够特异性识别布鲁氏菌外膜蛋白OMP16,能够有效阻断布鲁氏菌阳性血清与Omp16的结合,因此,利用此抗体,可以建立阻断ELISA、胶体金等检测方法对布鲁氏菌病进行检测。
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公开(公告)号:CN104726495B
公开(公告)日:2018-06-19
申请号:CN201510131862.2
申请日:2015-03-25
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N15/55 , C12N15/12 , C12N5/10 , C12N15/873
Abstract: 本发明公开了一种基于TALEN介导的基因打靶敲除山羊BLG的载体及重组细胞。本发明根据山羊β‑乳球蛋白基因,设计并构建了针对其第一外显子的TALEN真核表达载体以及含有较短同源臂的BLG基因敲除载体,与以TALEN表达载体为模板体外转录的mRNAs共同转染山羊胎儿成纤维细胞,经药物筛选及鉴定后得到β‑乳球蛋白基因敲除细胞。本发明利用TALEN技术大大提高了基因打靶效率,同时较短同源臂的利用可以更方便高效的进行中靶细胞的筛选,mRNAs的利用则避免了TALEN表达载体在基因组中的随机整合。
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