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公开(公告)号：CN114891742B
公开(公告)日：2024-06-04
申请号：CN202210716228.5
申请日：2022-06-23
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/0783
Abstract: 本发明公开了一种强杀伤性NK细胞培养基。本发明公开了一种强杀伤性NK细胞的体外扩增方法，将PBMC细胞进行磁珠分选得到NK细胞；将NK细胞悬于上述强杀伤性NK细胞培养基中，然后转移至细胞培养瓶中；继续向细胞培养瓶中加入自体血浆及5‑15μg/mL抗Her‑2单克隆抗体、900‑1100U/mL重组人IL‑2、25‑35ng/mLIGF‑1等，然后将细胞培养瓶置于培养箱中培养；每隔3天补加上述强杀伤性NK细胞培养基、900‑1100U/mL重组人IL‑2、25‑35ng/mL重组人IL‑15、5‑15ng/mL重组人IL‑21，继续培养；培养14天后，从培养袋中取出细胞，获得强杀伤性NK细胞。
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公开(公告)号：CN117568274A
公开(公告)日：2024-02-20
申请号：CN202311520248.6
申请日：2023-11-15
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/0783
Abstract: 本发明适用于NK细胞培养技术领域，提供了一种NK细胞培养体系及培养方法，所述NK细胞培养体系包括无血清培养基、NK细胞激活因子、丝素蛋白、儿茶素、改性聚乙烯醇、三磷酸腺甘二钠，本发明采用无血清培养基，不会带入支原体及病毒，通过加入丝素蛋白，具有良好的机械性能和生物相容性，能够提高细胞粘附能力和增殖能力，加入儿茶素，具有抗肿瘤、抗氧化、抗病菌多种药理作用，通过加入改性聚乙烯醇，具有良好的机械性能和生物相容性，能够改变培养体系剪切力，能够提高NK细胞的细胞活性，有利于提高NK细胞的扩增率及其杀伤活性，并且，儿茶素与改性聚乙二醇具有协同增效作用，能够进一步提高NK细胞的杀伤活性。
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公开(公告)号：CN116806809A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202310536822.0
申请日：2023-05-10
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: A01N1/02
Abstract: 本发明公开了一种免疫细胞冻存液，其组分包括：二甲基亚砜0.01‑0.05mL/mL，葡萄糖0.1‑0.18g/mL，L‑岩藻糖0.02‑0.08mg/mL，氧化铁负载维生素C 1‑4mg/mL，聚甘油脂肪酸酯0.1‑0.6μg/mL，聚乙二醇0.01‑0.05mg/mL，非必需氨基酸5‑20mg/mL，人血白蛋白5‑25mg/mL。本发明还公开了一种免疫细胞冻存方法，将外周血单核细胞与上述免疫细胞冻存液混合均匀得到细胞悬浮液，移入无菌冻存管然后放入冻存盒中，程序降温至‑50～‑70℃，冻存5‑15h，然后转入液氮中冻存。本发明还公开了一种免疫细胞冻存复苏方法。
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公开(公告)号：CN116058363A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202310038621.8
申请日：2023-01-13
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: A01N1/02 , C12N5/0783
Abstract: 本发明涉及一种增加NK细胞冻存复苏后活性的方法及其应用，所述方法包括：将待冻存的NK细胞于冻存前先与L‑脯氨酸和β‑巯基乙醇混合培养，然后再与NK细胞冻存液混合，得到细胞悬液，将细胞悬液置于无菌冻存管中，于液氮中冻存。本发明创造性地发现在冻存前的NK细胞培养阶段向培养体系中添加L‑脯氨酸和β‑巯基乙醇，能够使冻存复苏后仍保持较高的细胞存活率和杀伤能力。这种方法提供了一种冻存剂配方改良以外的NK细胞保存策略，可以减少冻存剂中二甲基亚砜等细胞保护剂的用量，使冻存液对冻存细胞和人体的毒性大大降低，以及降低成本。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114196628A
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN202111572220.8
申请日：2021-12-21
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/0783
Abstract: 本发明涉及细胞培养技术领域，尤其涉及一种NK细胞的培养基及培养方法。采用本发明提供的培养基培养PBMC，获得的NK细胞(CD3‑CD56+)平均纯度达到80％以上，平均扩增倍数达4076倍(按照起始培养NK细胞占比PBMC7.5％计)，细胞杀伤活性(效靶比为20:1)5小时杀伤80％以上。
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公开(公告)号：CN112608903A
公开(公告)日：2021-04-06
申请号：CN202011552820.3
申请日：2020-12-24
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/10 , C12N5/0783 , A61K35/17 , A61P31/00 , A61P35/00
Abstract: 本发明涉及免疫细胞治疗技术领域，特别涉及一种淋巴细胞及其培养体系和培养方法。该培养体系包括灭活的基因工程细胞、IL‑2、FBS、抗CD3抗体和淋巴细胞基础培养基；基因工程细胞为表达IL‑21、IL‑12、CD80和CD206的细胞。将该培养体系与单核细胞进行共培养，可以得到大量的免疫细胞，其中NK细胞为主要成分。这些免疫细胞不但可以高效杀伤肿瘤细胞，而且可对CD206阳性的肿瘤相关巨噬细胞进行高效去除。
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公开(公告)号：CN112501104A
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN202011538952.0
申请日：2020-12-23
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N1/21 , C12N5/0783 , C12R1/225 , C12R1/01 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及细胞培养技术领域，尤其涉及基因工程细菌及其在淋巴细胞扩增中的应用。本发明利用异体原核生物作为滋养层细胞，通过基因工程手段获表达CD137L、IL21和CD4中至少一种蛋白的基因工程细菌，将该基因工程细菌表达用于扩增淋巴细胞，具有扩增效率高、安全性好的优点，且成本更低。实现结果表明，利用本发明基因工程细菌扩增纯化的NK细胞或未经纯化的淋巴细胞，NK细胞14天分别增长25892.99倍、30150.22倍。其中，对未经纯化的淋巴细胞进行培养，获得NK细胞的纯度达98.5％，显著优于传统因子培养以及现有滋养细胞技术的培养效果。
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公开(公告)号：CN112430573A
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN202011539113.0
申请日：2020-12-23
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/0783 , C12N5/10
Abstract: 本发明涉及细胞培养技术领域，尤其涉及一种NK细胞的培养体系及培养方法。本发明提供的培养体系包括组分1和组分2；组分1包括NK细胞无血清培养基和灭活的基因工程细胞；组分2为NK细胞无血清培养基。利用本发明培养体系对NK细胞进行培养、扩增，14天可获得90％以上的效应细胞，扩增倍数约11000倍，为NK细胞过继免疫治疗的广谱应用奠定了基础。
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公开(公告)号：CN107177548B
公开(公告)日：2021-01-05
申请号：CN201710493447.0
申请日：2017-06-26
Applicant: 杭州中赢生物医疗科技有限公司
IPC: C12N5/0783 , C12N5/10 , A61K35/17 , A61P35/00 , A61P35/02 , A61P31/04 , A61P31/12 , A61P31/10 , A61P33/00 , A61P1/16 , A61P31/20 , A61P31/18 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及细胞免疫治疗领域，具体涉及一种体外扩增淋巴细胞的培养体系及扩增方法和应用。所述培养体系包括：白细胞介素21、白细胞介素12和CD80的混合物。采用本发明培养体系扩增的NK细胞，NK细胞纯度高，对肿瘤细胞杀伤力强，在第14天可以将NK细胞扩增约9100倍，达到各种临床适合治疗病症预期疗效应用要求；解决了临床应用培养体系的安全性问题，有效降低NK细胞的应用成本，为NK细胞过继免疫治疗的广谱应用奠定了基础。
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