一种抑制谷氨酰胺转胺酶发酵法制酶制剂中蛋白酶的方法

    公开(公告)号:CN1318583C

    公开(公告)日:2007-05-30

    申请号:CN200510040489.6

    申请日:2005-06-08

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种抑制谷氨酰胺转胺酶发酵法制酶制剂中蛋白酶的方法,属于酶制剂技术领域。本发明采用谷氨酰胺转胺酶发酵液制备酶制剂,在酶制剂的制备过程中或应用过程中通过添加金属离子鳌合剂抑制其中的蛋白酶活性,避免蛋白酶的水解作用对谷氨酰胺转胺酶的交联作用产生不利的影响。本发明方法操作简便、高效,省去了分离纯化等工序带来的繁琐,极易在工业生产中运用。

    添加胰蛋白酶提高发酵法制备谷氨酰胺转胺酶产量的方法

    公开(公告)号:CN1944632A

    公开(公告)日:2007-04-11

    申请号:CN200610097160.8

    申请日:2006-10-28

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种添加胰蛋白酶提高发酵法制备谷氨酰胺转胺酶产量的方法,涉及吸水链霉菌发酵制备谷氨酰胺转胺酶技术领域。本发明采用吸水链霉菌为发酵菌株,经斜面培养和种子培养后,接种在发酵培养基中经液体发酵制备谷氨酰胺转胺酶。通过在发酵过程中添加胰蛋白酶,最终实现了提高谷氨酰胺转胺酶产量的目标。本发明的优点是所用胰蛋白酶用量较少,且价格低廉,可显著提高谷氨酰胺转胺酶的产量,在其它培养条件相同的情况下,本发明比不添加胰蛋白酶的对照例产量提高达35%,达到发酵法制备谷氨酰胺转胺酶的先进水平。

    一种高效分泌谷氨酰胺转胺酶的变铅青链霉菌及其应用

    公开(公告)号:CN102586164B

    公开(公告)日:2014-06-18

    申请号:CN201210034340.7

    申请日:2012-02-16

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种高效分泌谷氨酰胺转胺酶的变铅青链霉菌(Streptomyces?lividan),其细胞内含有高效表达MTG基因的载体pIJ86/tg1,MTG基因如Genebank:EU477523所示,通过发酵优化本发明以pIJ86为表达载体,利用TGase天然启动子、信号肽构建了TGase表达载体pIJ86/tg1,并将它们转化表达宿主S.lividans?TK24。在较优的发酵条件下,S.lividansTK24(pIJ86/tg1)摇瓶发酵的TGase活力可达到3.0U/mL,3L发酵罐培养最高酶活为2.3?U/mL。通过本发明提供的工程菌及发酵方法,实现了MTG在S.lividan?TK24中高效率分泌性表达,适合工业化生产。

    一种产氧化型PVA水解酶的基因工程菌及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN102134557B

    公开(公告)日:2012-07-25

    申请号:CN201010100613.4

    申请日:2010-01-25

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种产氧化型PVA水解酶(oxidized polyvinyl alcohol hydrolase,EC 3.7.1.7,简称OPH)的基因工程菌及其构建方法与应用,本发明通过将合成的氧化型PVA水解酶基因连接到毕赤酵母GS115(Pichia pastoris)染色体上,构建了一株高效分泌表达氧化型PVA水解酶的基因工程菌,发酵3-4天后,氧化型PVA水解酶活力可达85U/mL,解决了氧化型PVA水解酶产量低的问题。应用该菌种生产氧化型PVA水解酶,产量高、工艺简单、便于工业化应用。

    一种产谷氨酰胺转胺酶活化蛋白酶抑制剂的基因工程菌及其构建方法

    公开(公告)号:CN102080064B

    公开(公告)日:2012-02-08

    申请号:CN201010579755.3

    申请日:2010-12-09

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种产谷氨酰胺转胺酶活化蛋白酶抑制剂的基因工程菌及其构建方法,属于遗传工程领域。本发明通过分子生物学的手段,首次得到了吸水链霉菌(Streptomyceshygroscopicus)中TGase活化蛋白酶抑制剂(TAPI)的完整基因序列,并根据得到序列构建了pET22b(+)-TAPI重组质粒,使TAPI在大肠杆菌中表达,应用该菌种生产TAPI,产量可达10mg/L。本方法工艺简单、产品产量高等诸多优点,开发了一种安全性、温和性和“绿色性”的新型蛋白质类表面活性剂;并且该菌株生产的目的蛋白直接分泌到胞外,便于分离纯化。本发明为用基因手段表达蛋白质类表面活性剂提供了参考和依据,也为表面活性剂的发展拓展了方向。

    一种产氧化型PVA水解酶的基因工程菌及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN102134557A

    公开(公告)日:2011-07-27

    申请号:CN201010100613.4

    申请日:2010-01-25

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种产氧化型PVA水解酶(oxidized polyvinyl alcohol hydrolase,EC 3.7.1.7,简称OPH)的基因工程菌及其构建方法与应用,本发明通过将合成的氧化型PVA水解酶基因连接到毕赤酵母GS115(Pichia pastoris)染色体上,构建了一株高效分泌表达氧化型PVA水解酶的基因工程菌,发酵3-4天后,氧化型PVA水解酶活力可达85U/mL,解决了氧化型PVA水解酶产量低的问题。应用该菌种生产氧化型PVA水解酶,产量高、工艺简单、便于工业化应用。

    一种产类胰蛋白酶基因工程菌及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN102094040A

    公开(公告)日:2011-06-15

    申请号:CN201010580906.7

    申请日:2010-12-09

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种产类胰蛋白酶的基因工程菌及其构建方法与应用,属于遗传工程领域。本发明通过将体外扩增所得的类胰蛋白酶基因连接到毕赤酵母GS115(Pichiapastoris)染色体上,构建了一株高效分泌表达类胰蛋白酶的基因工程菌,发酵3~4天后,得到0.5U/mL的酶活,解决了类胰蛋白酶产量低的问题。应用该菌种生产类胰蛋白酶,产量高、工艺简单、便于工业化应用。

    一种提高发酵法生产PVA降解酶产量的方法

    公开(公告)号:CN101724609A

    公开(公告)日:2010-06-09

    申请号:CN200910260992.0

    申请日:2009-12-18

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高发酵法生产PVA降解酶产量的方法。通过在发酵过程中添加1,4-丁二醇,提高了PVA降解酶的产量。通过两步发酵法、三步发酵法,发酵结束后,PVA降解酶产量分别达到2.92U/mL和3.43U/mL,与不添加1,4-丁二醇相比,产量分别提高了2.6倍和3倍。本发明还具有操作简单、原料价格便宜等优点。

    一种提高漆酶生产强度的方法

    公开(公告)号:CN101698833A

    公开(公告)日:2010-04-28

    申请号:CN200910223520.8

    申请日:2009-11-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高漆酶生产强度的新方法。本发明以一株保藏于中国典型微生物保藏中心,编号为CCTCC M209240的拟青霉菌作为出发菌株(Paecilomyces sp.),经过液体深层发酵制备漆酶。其特点是:菌体在液体培养基中培养3-4天后,加入0.5g/L-1.5g/L的非离子型表面活性剂Tween80。当本方法用于发酵生产漆酶时,其发酵周期从8天缩短至6天,缩短了生产漆酶的时间,生产强度最高提高了53%,此方法简单有效,明显提高了生产漆酶的经济指标。

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