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公开(公告)号：CN109266595B
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN201811119484.6
申请日：2018-09-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种转化L‑苏氨酸生产L‑2‑氨基丁酸的重组菌的构建及应用，属于生物工程技术领域。本发明所述的生产方法利用一种表达双质粒的重组菌，同时实现三种酶的高效表达，将L‑苏氨酸转化为L‑2‑氨基丁酸，并偶联一辅酶再生体系，通过将NAD+转化为NADH，使得NADH在体系中浓度相对稳定，转化能够高效进行。更进一步地，在此过程中由甲酸铵转化而来的CO2可溶于转化体系中生成的氨水，对环境污染小，有工业化应用价值。本方法具有转化条件温和、专一性强、成本低廉、转化时间短等优点。采用本方法制备L‑2‑氨基丁酸，投入40g/L L‑苏氨酸，所得产物L‑2‑氨基丁酸的浓度为43.3g/L，转化率达99.9％以上。
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公开(公告)号：CN110951660A
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201911317890.8
申请日：2019-12-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株固定CO2产苹果酸的大肠杆菌工程菌的构建及应用，属于发酵领域。所述工程菌是对大肠杆菌Escherichia coli MG1655进行基因工程改造获得的菌；所述基因工程改造为敲除富马酸还原酶基因、富马酸酶基因、乳酸脱氢酶基因和乙醇脱氢酶基因，并游离过表达甲酸脱氢酶、乙酰辅酶A合成酶、酰化乙醛脱氢酶、甲醛裂合酶、二羟基丙酮激酶、苹果酸酶和亚磷酸氧化还原酶，获得菌株GH0407。上述菌株用于发酵生产苹果酸，以CO2和葡萄糖作为共底物厌氧发酵72h，苹果酸产量达到39g/L，得率为1.53mol/mol，原始出发菌株不积累苹果酸。
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公开(公告)号：CN110938580A
公开(公告)日：2020-03-31
申请号：CN201911363367.9
申请日：2019-12-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高D-酪氨酸生产效率的方法，属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段构建了一株双质粒共表达的重组菌，同时实现三种酶的高效表达，将L-酪氨酸转化为D-酪氨酸，并通过偶联辅酶再生系统，将NADP+转化为NADPH，使得NADPH循环再生，转化能够高效进行。并通过优化全细胞转化条件，实现了D-酪氨酸的高效生产。通过本发明生产的D-酪氨酸产量可达8.4g/L，转化率达93％。
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公开(公告)号：CN106282081B
公开(公告)日：2020-02-11
申请号：CN201610793043.9
申请日：2016-08-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产维生素C‑2‑磷酸酯的方法，属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段从铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)中克隆获得磷酸酶基因，将构建好的表达质粒导入E.coli BL21(DE3)，通过卡那霉素抗性平板筛选获得表达载体高拷贝重组的含磷酸酶工程菌。通过组氨酸标签对酶进行纯化，并用于转化维生素C生产维生素C‑2‑磷酸酯。通过控制底物比例，实现维生素C‑2‑磷酸酯的高效生产。在40℃、pH4.5的条件下反应8h，维生素C‑2‑磷酸酯产量可达54.8g/L，转化率为42.9％，时空产率为6.9g/L/h。
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公开(公告)号：CN110734936A
公开(公告)日：2020-01-31
申请号：CN201911128392.9
申请日：2019-11-18
Applicant: 江南大学 , 无锡宸明生物技术有限公司
IPC: C12P7/42
Abstract: 本发明公开了一种多酶级联生产(R/S)-羟基蛋氨酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明利用一锅法同步反应催化蛋氨酸生产(R)-HMTBA，通过分批补料解除底物抑制，转化周期由23h缩短至15h，(R)-HMTBA产量可达到97.0g/L，ee>99％，蛋氨酸摩尔转化率达到96.3％；利用一锅法同步反应催化蛋氨酸生产(S)-HMTBA，通过分批补料解除底物抑制，转化周期由23h缩短至18h，(S)-HMTBA产量可达到98.0g/L，ee>99％，蛋氨酸摩尔转化率达到98.6％。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104805144B
公开(公告)日：2018-05-04
申请号：CN201510230669.4
申请日：2015-05-07
Applicant: 江南大学 , 无锡宸明生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种高效生产L‑瓜氨酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段从乳酸菌中克隆获得精氨酸脱亚胺酶基因，采用分子生物学和过程优化等手段，提高ADI生产菌株产酶能力，通过优化催化体系，建立高效生物催化生产L‑瓜氨酸的平台。发酵得到的菌体无需破碎，即可直接用于转化，在50℃条件下，工程菌具有较高的透性，更有利于底物的吸收和产物的释放，反应速度得到极大的提高，转化周期仅需4‑12h，瓜氨酸产量可达150‑180g/L，转化率94％以上。
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公开(公告)号：CN105861529A
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201610363114.1
申请日：2016-05-27
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/88 , C12P13/001 , C12Y401/01019
Abstract: 本发明公开了一种精氨酸脱羧酶及其应用，属于生物工程技术领域。本发明通过基因组数据库挖掘及同源序列比对等虚拟筛选手段，结合分子生物学手段从腐败希瓦氏菌中克隆获得精氨酸脱羧酶基因。采用分子生物学和过程优化等手段，提高精氨酸脱羧酶生产菌株产酶能力，通过优化催化体系，建立高效生物催化生产胍基丁胺的平台。发酵得到的粗酶液经纯化后进行转化，反应体系成分明确，有利于后续产物提取纯化。在37℃条件下，脱羧酶具有较高的活性，同时也有利于宿主细胞大肠杆菌的生长，在该温度下，反应速度得到极大的提高，转化周期需24h，胍基丁胺产量可达61?71g/L，转化率达68?82％。
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公开(公告)号：CN119592530A
公开(公告)日：2025-03-11
申请号：CN202411829104.3
申请日：2024-12-12
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/02 , C12N15/53 , C12N15/31 , C12N15/70 , C12N1/21 , C07K14/195 , C12N9/04 , C12P7/02 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种P450突变体及其在合成骨化二醇中的应用，属于生物工程技术领域。本发明先通过构建P450酶突变体酶，并构建氧化还原伴侣和辅因子循环酶的单质粒三酶共表达体系，为P450酶提供充足的电子传递链，可在温和条件下，以维生素D3为底物，以更高效率合成骨化二醇。骨化二醇的转化率可达63.1％，极大的提升了该反应的转化率。采用本发明的方法，提高了催化剂的催化效率，降低了反应的成本。
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公开(公告)号：CN119331849A
公开(公告)日：2025-01-21
申请号：CN202411627046.6
申请日：2024-11-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种重组软骨素6‑O‑磺基转移酶截断体及其在合成硫酸软骨素C中的应用，属于生物工程技术领域。在来源于挪威大鼠的软骨素6‑O‑磺基转移酶的基础上，在RnCHST3的N端截断前11～106个氨基酸得到软骨素6‑O‑磺基转移酶截断体，表现出比原始RnCHST3更高的磺酸化率，提升了51％，24h磺酸化率可达11.5％。本发明在Δ106RnCHST3基础上，构建MBP融合表达的pET28a(+)‑MBP_Δ106RnCHST3，其可溶表达量得到显著提升。本发明还将所述软骨素6‑O‑磺基转移酶截断体用于催化制备CSC，提供了绿色环保的新方法。
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公开(公告)号：CN117683759B
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202311752427.2
申请日：2023-12-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种3‑脱氢莽草酸脱水酶突变体及产原儿茶酸的重组大肠杆菌，突变体ApAroZR363A的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，通过出发序列的第363位精氨酸突变为丙氨酸得到；本发明还基于该突变体构建了一株重组大肠杆菌，具体地：通过阻断碳流从3‑脱氢莽草酸流向下游莽草酸，敲除了大肠杆菌中3‑脱氢莽草酸脱氢酶基因aroE成功构建了一株高产3‑脱氢莽草酸的底盘菌株，并引入具有抵抗产物抑制的高活性3‑脱氢莽草酸脱水酶突变体ApAroZR363A在底盘菌株中构建原儿茶酸生物合成路径，最终建立了一个高效生物合成原儿茶酸的大肠杆菌重组菌株。
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